GuruHealthInfo.com

Медицинско право: право, документи, отговорности, правила, актове.

здравно законодателство


Москва, Федерален център за санитарна инспекция Министерството на здравеопазването на Русия, 1999UtverzhdayuGlavny gosudarstvennyysanitarny vrachRossiyskoy FederatsiiG.G.ONISchENKO23 Октомври 1999 въведение godaData през януари 2000 г. goda4.1 -1. Методи за контрол. ХИМИЧЕСКИ FAKTORYOPREDELENIE MASS KONTSENTRATSIIMIKOTOKSINOV в хранителни суровини и PRODUKTAHPITANIYA. ПОДГОТОВКА НА ПРОБИТЕ METODOMTVERDOFAZNOY EKSTRAKTSIIMETODICHESKIE UKAZANIYAMUK 4.1.787-991. Разработено от Федералния център на Държавния санитарен и епидемиологичен MinzdravaRossii (VB Скачков, IV Bragin, кралица NV) и ЗАО"BioKhimMak CT" (Водещ изследовател Vasiyarov GG, GS starshiynauchny служител Алексеев, старши изследовател OsokinD.M., Доктор на химическите науки Staroverov см.). 2. Одобрени и въведени в действие главен gosudarstvennymsanitarnym лекар на Руската федерация от 23 октомври 1999 Г.3. Vpervye.1 въведена. Цел и обхват primeneniyaNastoyaschie Metodicheskieukazaniyaustanavlivayutsposobypodgotovki проби от хранителни суровини и храни produktovmetodom твърда фаза извличане posleduyuschegohromatograficheskogo за микотоксини анализ и безопасност Проучванията са dlyaprovedeniyalaboratornyh pischevoyproduktsii gossanepidsluzhby институции на Руската федерация, както и dlyapredpriyaty и институции, занимаващи се с контрол на качеството iissledovaniya хранителни суровини и хранителни продукти за съгласуваност с SanPiN 2.3.2.560-96 "Kkachestvu хигиенните изисквания и безопасността на хранителните суровини и pischevyhproduktov" и акредитирани в съответствие с установената poryadke.2. Метода от Приготовление probPodgotovka проби включва следните части: - екстракция тест цел осигуряване екстракт poluchenieedinogo съдържащ всички микотоксини нормализирана vdannom обект на SanPin препарат 2.3.2.560-96-- екстракт чрез екстрахиране vklyuchayuschayapredvaritelnuyuochistku твърда фаза, kontsentrirovanieiokonchatelnuyu пречистване на концентриране касети Diapak.3 , Изисквания bezopasnostiPri на реагенти, разтворители и veschestvamineobhodimo отговарят на изискванията за безопасност, установени dlyaraboty токсични, корозивни и запалими вещества POGOST 12.1.005-88.4. Условия за получаване probProtsessy извършващи получаване и обработка на проби разтвор проведени vnormalnyh условия при температура на околната среда 18 - 22grad. В.5. Афлатоксин В1 (AP-В1), зеараленон (ЗОН), деоксиниваленол (DON) и Т-2 токсин (T-2) 5.1. Машини, съоръжения и материали, reaktivyTablitsa 1 + ------------------------------------ + ------ --- + --------- + --- + --- + | Оборудване, материали, реагенти | AT-B1 | ЗОН | DON | 2 || T и решения + ---- + ---- + ---- + ---- + | ||| 1 | 2 | 1 | 2 | | ||| Var |. Var |. Var |. Var. | | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | тип шейкър проби | + || AVU-6C ТУ 64-1-2451-78 или магнитен | || -magnetic или механична бъркалка | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | аналитична везна с точност | + || претегля 0.01 гр +/- | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | тип Mill "циклон" QC-114 | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | ротационен изпарител (TS-1м2, | + || W или 25-1173.102-84 др.) | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | устройство за вакуум | + || около -0.7 мм живачен стълб (Водоструйни | || помпа, вакуумна помпа масло, | || Медицински аспиратор) | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | вакуумно устройство за обучение | + || проби (вакуумни системи), с приемници | || прякори изпитание капацитета на не по-малко от | || 10 куб. виж | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | устройство за изпаряване на проби | + | + | - | - | - | - || поток от азот при нагряване около ||||| | || 40 градуса. С (сух въздух е желателно ||||| | || Bath) ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Концентрирането патрон Diapak А-3, | + | + | + | + | + | + || ТУ 4215-002-05451931-94, ||||| | фирма || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Концентрирането патрон Diapak АС-3, | - | - | - | - | + | + || ТУ 4215-002-05451931-94, ||||| | фирма || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Концентрирането патрон Diapak Р-3, | + | + | + | + | - | - || ТУ 4215-002-05451931-94, ||||| | фирма || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Концентрирането патрон Diapak Н | + | - | + | - | + | + || ТУ 4215-002-05451931-94, ZAO ||||| | ||"BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Концентрирането патрон Diapak С, | - | + | - | + | - | - || ТУ 4215-002-05451931-94, ||||| | фирма || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | медицински плоски клещи, 15 см | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | метална шпатула или порцелан | + || лъжица | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | плоскодънни колби с конична | + | + | + | + | - | - || запушалките с капацитет от 50 кубически метра. см ||||| | || ГОСТ 25336 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | плоско дъно конични колби | + || (ерленмайерова) vmestimos- задръстванията | || Тю 250 или 300 см. см | || ГОСТ 25336 | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | на Бюхнер колба с капацитет от 500 кубически метра. | + || Вижте | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | фуния Бунзен капацитет | + || 200 мед. виж | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | фуния разделителен капацитет | + || 250 мед. виж ГОСТ 25336 | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | ostrodonnye колби с тапи за | + || ГОСТ 25336 с взаимозаменяеми konu- | || сом 14/23 капацитет от 5, 10 | || 25 куб. виж | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | крушовидни колби с тапи за | + | + | + | + | - | - || ГОСТ 25336 с взаимозаменяеми konu- ||||| | || сом 14/23 капацитет от 10 и 25 кубически метра. ||||| | || видите ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | измерване цилиндри с капацитет от 25, 50, | + || 100 мед. см 2 клетки, в съответствие с ГОСТ 1770 | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | микроспринцовка с капацитет от 100 кубически метра. mm | + || (или пипета завършва ГОСТ | || 20292 изпълнение на 4 или 5, първи кла |. || SA капацитет точност до 1 см) | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | филтърна хартия (плътен, тясна || - || - | + | + || koporistaya бавно филтриране ||||| | | | тип тънък седимент "синя ||||| | || Feed") ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | нестерилизирани медицински памук, | + || х / б | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | ацетонитрил за течна хроматография | + || графия, ОП-3 OFS ТУ | || 6-09-14-2167-84 отстранена | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | ацетон, с висока чистота, съгласно ТУ 6-09-3513-75 | - | + | - | - | - | - || ОП-2, поправено ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | бензен, реагент степен, в съответствие с ГОСТ 5955-75, vyder- | + | + | + | + | - | - || zhanny над Na SO, отстранени ||||| | || 02 април ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | хептан, хексан, XQ, ТУ | + | + | + | + | - | - || 6-09-3375-78 или петролев етер ||||| | || (фракция 70-100), реагент клас, ||||| | Ректифицираната || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 2-пропанол (изопропилов алкохол), | - | - | - | - | + | + || XQ, ТУ 6-09-402-75, ||||| | Ректифицираната || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | ледена оцетна киселина, XV, в | + | + | + | + | - | - || ГОСТ 61-75 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | хлороформ, медицински, претърпени | - | - | - | - | + | + || над калциев хлорид, поправено ||||| | || 2 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | метиленхлорид (дихлорометан), | + | + | - | - | - | - || поддържано калциев хлорид, ||||| | || 2 ||||| | Ректифицираната || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | етер диетил, поддържано | - | + | - | - | - | - || NaOH, отстранени ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | етил ацетат (етил ацетат || + || - || - || киселина), реагент степен, в съответствие с ГОСТ 22300-76, || ||| | || поддържа над натриев карбонат и rektifitsi- ||||| | || 03 февруари ||||| | Rowan || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | натриев сулфат, безводен, реагент степен, на | + | + | + | + | - | - || ГОСТ 4166-76 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | натриев хлорид, реагент степен, в съответствие с ГОСТ 4233-77 | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | дестилирана вода | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | екстрагент - 84% ацетонитрил във во | + || де, 840 кубически метра. Вижте ацетонитрил dovo- | || dyatsya до 1 литър вода или polucha- | || etsya чрез дестилация с вода воден | || но - ацетонитрил смес (1: 4) | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 33% бензен в ацетонитрил - смесват | + | + | + | + | - | - || 30 куб. Вижте бензен и 60 кубически метра. Виж ацетон ||||| | || tonitrila (1: 2) ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 20% ацетонитрил в бензол - 20 куб.м |. + | - | - | - | - | - || cm ацетонитрил се разрежда бензен ||||| | || до 100 кубически метра. виж ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 2% оцетна киселина в бензен - 2 | - | - | + | - | - | - || мед. виж разредена оцетна киселина ||||| | || бензен до 100 кубически метра. виж ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 5% оцетна киселина в бензен - 5 | - | + | - | - | - | - || мед. виж разредена оцетна киселина ||||| | || бензен до 100 кубически метра. виж ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 10% етил ацетат в бензол - 10 куб.м. | - | + | - | + | - | - || cm ацетат разрежда с бензол до ||||| | || 100 куб. виж ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 25% хексан в въздух - 25 CU. виж | - | + | - | - | - | - || хексан разрежда с диетилов етер ||||| | || до 100 кубически метра. виж ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 10% ацетон в дихлорометан - 10 куб. | - | + | - | - | - | - || см ацетон разрежда с дихлорометан ||||| | || до 100 кубически метра. виж ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 20% ацетон в дихлорометан - 20 куб.м |. - | - | - | - | + | - || см ацетон разрежда с дихлорометан ||||| | || до 100 кубически метра. виж ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + 5.2. Метода от Приготовление probOpredelyaemye микотоксини възстановени екстрагент от пробата маса prisootnoshenii проба - обем на екстрагента от 1: 5. Когато opredeleniiaflatoksina В1 и зеараленон е пречистен воден екстракт на -atsetonitrilnogo патронник Diapak A-3 на патрона kontsentriruyutmikotoksiny Diapak Р-3, суши се чрез изпаряване остатъчна вода и повторно разтваряне iposle извършва окончателното ochistkuna патронник Diapak Н (Diapak C - в случай на царевица и продукти iznee ). Получават се фракционно елуиране две фракции, soderzhaschieaflatoksin В1 и зеараленон, готови за хроматографско определяне на деоксиниваленол analizu.Pri и Т-2 токсин provodyatpredvaritelnuyu почистване вода - ацетонитрил екстракт napatrone Diapak АС-3 и се концентрират чрез изпаряване до сухо. Poslepererastvoreniya крайно пречистване се извършва на DiapakN на касетата. Фракционен елуиране се получават две фракции, soderzhaschiedezoksinivalenol и Т-2 токсин, готов за степен hromatograficheskomuanalizu.Dlya потвърждаване на получаването на пробата iutochneniya екстракция микотоксини анализира probymetodom стандартни добавки към оригиналния екстракт. подготовка Osnovnyeharakteristiki проба от твърд ekstraktsiiprivedeny в таблица. 2. Таблица 2OSNOVNYE препарат ХАРАКТЕРИСТИКИ проба + ---------------- + --------------- + --------- - + ------------------- + | Микотоксини | Времето | Степен | относителна ||| probopod- | екстракция, | среден kvadratiche- ||| готвене мин. | % | Skoe отклонение,% | + ---------------- + --------------- + --------- - + ------------------- + | афлатоксин B1 | 120 | 75 | 20 | + ---------------- + --------------- + ----------- + - ----------------- + | Зеараленон | 120 | 70 | 20 | + ---------------- + --------------- + ----------- + - ----------------- + | деоксиниваленола | 90 | 85 | 10 | + ---------------- + --------------- + ----------- + - ----------------- + | Т-2 токсин | 90 | 85 | 10 | + ---------------- + --------------- + ----------- + - ----------------- +, за да се постигне необходимата степен на екстракция tochnovypolnyat изисквания за квалификация на органични разтворители, и ihpodgotovke получаване на разтвори, изброени в т. 5.1.Algoritm търсене за евентуални загуби на целевата проби микотоксини pripodgotovke е даден в допълнение 1 към настоящото Metodicheskimukazaniyam.5.3. Получаване концентриране patronovPatrony Diapak са пластмаса колона, съдържаща 1 или 3 кубични метра. см sorbenta.5.3.1 херметически опакована. А подреждане патрон Diapak-3Vskryt изходна линия патрон Diapak А-3, премахване polimernuyuzaglushku. Задайте патрон изправено тесен kontsomvniz подходящо устройство за събиране и евакуира elyuata.Ostorozhno отворите капака полимерна патрон за формиране на горния слой от сорбента rovnyygorizontalny подслушване popatronu и го оправя с помощта на малка памук tampona.Podklyuchit вакуум апарат за отвеждане на вакуума и да obespechitpodachu патрон .Kontsentriruyuschy патрон Diapak A-3 еднократна употреба не iregeneratsii podlezhit.5.3.2. Концентрирането патрон Diapak AU-3Podgotovka концентриране патрон Diapak AU-3 provoditsyaanalogichno н. 5.3.1.Kontsentriruyuschy патрон Diapak AU-3 за еднократна употреба iregeneratsii не podlezhit.5.3.3. Концентрирането патрон Diapak P-3Set патрон Diapak Р-3 в вертикално podhodyascheeustroystvo за вакуум и отворите горния kryshku.Suspendirovat сорбент при разбъркване със стъклена пръчка в 10kub. Вижте бензол, се оставя да престои сорбент и мис в slabomvakuume, като се избягва въвличането на въздух в сорбент posledovatelnopo 10 куб. см бензол и ацетон atsetona.Sohraniv слой от около 2 cm, за въвеждане на порест polimernyyfiltr (наличен в комплекта) и запечатване това пръчка verhnemusloyusorbenta.Zatempropustit останалите ацетон и последователно с 10 мл. см екстрагент и екстрагент -вода смес (1: 1), за предотвратяване проникването на въздух в сорбента с skorostyu2 - 3 капки sekundu.Sohraniv слой елуент продължи около 2 cm, деактивиране вакуум заглуши първия патрон горния капак и след това (posleprekrascheniya капе) и долния капак. Така патрон заболяване получава могат да се съхраняват по време на работния ден, и изсъхва prisluchaynom е в работно състояние prokachivaniem10 куб. см екстрагент смес - вода (1: 1) .Kontsentriruyuschy патрон Diapak Р-3 многократна схема регенерация ipodlezhit, както е описано по-горе, след provedeniyaprobopodgotovki.5.3.4. Концентрирането Diapak NSnyat патронник с патронник Diapak Н свещи да премине през него с помощта на 5 см спринцовка. виж бензен и запечатване двата края така patrona.Podgotovlenny патрон може да се съхранява в techeniesutok при температура не по-висока от 25 ° С. C.Kontsentriruyuschy патрон Diapak Н многократна употреба ipodlezhit регенерация след схеми след provedeniyaprobopodgotovki: - след получаване на DT на пробата - последователно прескачане cherezpatron 5 мед. cm етанол, ацетон и след подготовката на пробите benzola-- Я - последователно прескачане cherezpatron 5 мед. см ацетон и benzola.5.3.5. Концентрирането Diapak SSnyat патрон с патрона С Diapak свещи да премине през него с помощта на 5 см спринцовка. виж бензен и запечатване двата края така patrona.Podgotovlenny патрон може да се съхранява в techeniesutok при температура не по-висока от 25 ° С. C.Kontsentriruyuschy патрон Diapak C не за еднократна употреба iregeneratsii podlezhit.5.4. Екстракция mikotoksinov5.4.1. Зърно и zernoprodukty25 г смлян проба се прехвърля в конична колба и zalit125 куб. Вижте екстрагент. Извършва интензивно peremeshivaniesoderzhimogo колба в продължение на 30 минути. Екстракт филтър cherezbumazhny филтър "синя панделка".5.4.2. Ядки и маслодайни семена kultur25 грама смлени проба се прехвърля в ерленмайерова колба dobavit125 куб. Вижте екстракт и 40 кубически метра. виж хексан. Извършване intensivnoeperemeshivanie съдържание колба за 30 минути. Posleperemeshivaniya добавят за извличане на 1 г натриев хлорид и prodolzhitperemeshivanie продължение на 5 минути. Филтрира се през филтърна хартия"синя панделка", Филтрирания екстракт се прехвърля към разтвора и след delitelnuyuvoronku сноп събира -atsetonitrilny Долният воден слой. екстракт ацетонитрил обезмасляване 25 мл хексан в делителна фуния с обем 250 кубически метра. sm.Ekstrakt прехвърля в делителна фуния, се добавят 25 мл хептан и се разбърква енергично. След разделяне вода sobratnizhny - ацетонитрил ekstrakt.5.4.3. Масло rastitelnoe25 г масло прехвърля в ерленмайерова колба, добавя се 40 мл. smgeksana и 125 кубически метра. Вижте екстрагент. Извършване intensivnoeperemeshivanie съдържание колба за 30 минути. Posleperemeshivaniya да екстракт 0.2 гр NaCl iprodolzhit разбъркване в продължение на 3-5 минути. Екстрактът се прехвърля vdelitelnuyu фуния и след разслояване събира долен слой от вода и ацетонитрил. екстракт ацетонитрил обезмасляване 25kub. виж хексан или хептан, или петролев етер delitelnoyvoronke капацитет от 250 куб. sm.Ekstrakt прехвърля в делителна фуния, се добавят 25 мл хептан и се разбърква енергично. След разделяне вода sobratnizhny - ацетонитрил ekstrakt.5.5. Пречистване и концентрация prob5.5.1. Пречистване и концентрация на пробата при opredeleniiaflatoksina В1 и zearalenona5.5.1.1. Предварително пречистване и концентриране proby25 куб. см обезмаслен екстракт се пропуска през patronDiapak A-3 при скорост от 2 - 3 капки в секунда и 20 см изберете elyuata.Poluchenny елуат обем от 20 кубически метра. виж разрежда равно obemomvody. Полученият разтвор се прекарва през патрон Diapak soskorostyu P-3 1 - 2 капки в секунда, след това капсулата се промива с 5 мл вода и се продухва с въздух в продължение на 1 min.Tselevuyu fraktsiyuelyuirovatspatronaDiapakP 3posledovatelno 7-куб. ацетонитрил и 7 cm куб. 33 cm protsentnogobenzola ацетонитрил - при скорост от 1 - 2 капки sekundu.Sobranny елуат се пропуска през слой от безводен натриев сулфат (10 д) от гравитацията. Колбата се изплаква с 2 см. 33 cm protsentnogobenzola в ацетонитрил и съдържанието прехвърлят в същата sloybezvodnogo натриев сулфат. Промива натриев сулфат 3 мед. sm33 процента бензен в ацетонитрил. Изсушеният uparitdosuha филтрата на ротационен изпарител при температура не по-висока от 40 grad.C и веднага се разтвори в 0.5 мл. Вижте benzola.5.5.1.2. Крайното пречистване на патрон Diapak Н (вариант 1) Бензеновият разтвор се прилага към патрон predvaritelnokonditsionirovanny Diapak N. колба, съдържаща suhoyostatok, промива още 2 пъти с 0,5 мед. виж бензен и последователно се прилагат разтвори на бобина Diapak N. Всички промивания spatrona otbrosit.Zearalenon елуират от патрона Diapak H 4 куб. cm2 процента оцетна киселина в бензол и се изпарява до сухо (doischeznoveniya мирис на оцетната киселина) на ротационен температура isparitelepri не по-висока от 50 ° С. С (Проба Н). Суха ostatoknemedlenno разтворения в разтворител sootvetstvuyuschemkonechnomu хроматографско opredeleniyu.Zatem елуира афлатоксин В1 5 см. 20 cm protsentnogoatsetonitrila в бензен патрон и се изпарява до сухо в поток от азот pritemperature не по-висока от 40 ° С. С (Проба А). Твърдите вещества nemedlennopererastvoritvrastvoritele съответните konechnomuhromatograficheskomu opredeleniyu.Ekvivalent тегло на пробата, взета за анализ на афлатоксин В1, MNR, - 4 g.Ekvivalent тегло на пробата, взета за анализ зеараленон, MNR, - 4g.5.5.1.3. Крайното пречистване на патрон Diapak С (вариант 2) Подходящ за царевица и продукти от разтвор nee.Benzolny се прилага към патрон predvaritelnokonditsionirovanny Diapak S. колба, съдържаща suhoyostatok, промива още 2 пъти с 0,5 мед. вижте бензен и nanestirastvory Diapak патрон С, когато горното ниво от предходните разтвор filtrapatrona части. Всички промивания с patronaotbrosit.Zearalenon Diapak елуират от патрона с 6 кубически метра. sm10 процента етилацетат в бензол и се изпарява до сухо (doischeznoveniya миризма бензен) в ротационен изпарител pritemperature не по-висока от 50 ° С. С (Проба Н). Твърдите вещества nemedlennopererastvoritvrastvoritele съответните konechnomuhromatograficheskomu opredeleniyu.Zatem Diapak през капсулата С 3 CC последователно липсва 5% оцетна киселина в бензен и 4 см. sm25 процента от хексан във въздуха. Всички елуати изхвърлят. AflatoksinV1 елуира от патрон 6 CU. см 10% ацетон vdihlormetane. Елуатът се изпарява до сухо в поток от азот при температура 40 ° С nevyshe. С (Проба А). Твърдите вещества веднага pererastvoritv разтворител подходящ край hromatograficheskomuopredeleniyu.Ekvivalent масата на пробата, взета при анализа на афлатоксин В1, MNR, - 4 g.Ekvivalent тегло на пробата, взета за анализ зеараленон, MNR, - 4g.5.5.2. Пречистване и концентрация на пробата при opredeleniidezoksinivalenola и T-2 toksina5.5.2.1. Предварително пречистване и концентриране proby20 куб. виж екстракт да премине през капсулата Diapak АС-3 soskorostyu 2 - 3 капки в секунда. Извлекът се събира. Изплакнете 5kub касета. см екстрагент и филтър Обединените елуати vserdtsevidnuyu колба се изплаква два филтър куб. см ацетонитрил sobirayapromyvochnuyu течността в колбата. Rotatsionnomisparitele се изпарява до сухо при температура от около 60-70 градуса. С Uparivaniepovtorit 2 - 3 пъти с добавянето на колба 3 - 5 се. smpropanola-2 или ацетонитрил до изчезването на водни капчици Nastenko колба (проба DT) .5.5.2.2. Окончателно почистване на патрон Diapak NProbu DT разтваря в 0.5 мл. см хлороформ и се прилага napredvaritelno климатизирани патрон Diapak N. obmytesche колба с 2 пъти 0,5 куб.м. см nanestirastvory хлороформ и последователно на същия патронник, като се започне събиране на фракции, съдържащи Т 2toksin в колба източване. Пълна елуиране на Т-2 токсин 2 мл хлороформ в колбата. Елуатът се изпарява до сухо на rotatsionnomisparitele при 40 - 45 ° С. С и разтворения vrastvoritele съответния край hromatograficheskomuopredeleniyu Т-2 токсин (Проба T) .Dezoksinivalenol елуира от патрона до другия топинг kolbu6 куб. виж двадесет% ацетон в хлороформ. Uparitdosuha се елуира с помощта на ротационен изпарител при температура 40 - 45 градуса. Ipererastvorit С в разтворител sootvetstvuyuschemkonechnomuhromatograficheskomu определяне на деоксиниваленол (Проба D) .Ekvivalent тегло на пробата, взета за анализ деоксиниваленол, MNR, - 4 g.Ekvivalent тегло на пробата, взета за анализ на Т-2 токсин, MNR, - 4g.6. Афлатоксин M16.1. Оборудване, материали, реагенти + -------------------------------------------- - + ----------------- + | IR ротационен изпарител или единица 1м2 | ТУ 25-1173.102-84 || да се изпари проби в азот при Отоплението | или други . || СОИ около 40 градуса. С | || TSLN Центрофугира тип 2 или подобен | W || 5-375-4171-73 апарат за създаване на вакуум от около -0.7 mm | || Hg. (Водоструйно помпа, масло вакуум | || помпа, медицински засмукване устройство) | || вакуумно устройство за приготвяне на пробата (Ва | || колектор вакуум), с приемници vmesti- процес | || мост не е по-малко от 10 кубически метра. виж | || Концентрирането патрон Diapak S16M, | ТУ 4215-002 - || Фирма "BioKhimMak CT"| 05451931-94 || Концентрирането патрон Diapak С | ТУ 4215-002 - || Фирма "BioKhimMak CT"| 05451931-94 || Медицински плоски клещи, 15 см | || Спринцовка капацитет от 10 или 20 кубически метра. Вижте Луер | || плоскодънни конични колби със запушалки | || ГОСТ 25336 с капацитет от 50 кубически метра. виж | || ostrodonnye колби с тапи, с взаимозаменяеми | ГОСТ 25336 || чрез директен конус 14/23 с капацитет от 10 или 25 кубически метра. | || Вижте | || крушовидни колби с тапи, с взаимозаменяеми | ГОСТ 25336 || чрез директен конус 14/23 с капацитет от 25 кубически метра. виж | || измерване бутилки с капацитет от 50 кубически метра. Виж, | ГОСТ 1770 || 2 клетки, или епруветка завършва vmestimos-. | || Тю 15 или 20 кубически метра. виж | || микроспринцовка с капацитет от 100 кубически метра. mm или pipet- | ГОСТ 20292 || ка завършва изпълнението на 4 или 5, клас 1 | || точност капацитет 1 куб. виж | || нестерилизирани медицински памук, с / б | || ацетонитрил за течна хроматография, | W 06/09/14 - || OP-3, OFS, отстранени или | 2167-84 || Ацетонитрил, клас 1 кооперативно "Kriohrom", | || г. Сен - Петербург | || ацетон, OFS, OP-2, отстранени | || ТУ 6-09-3513-75 хептан, хексан, XV, или петролев етер (Мар- | ТУ 6-09-3375-78 || ки 70-100) отстранена | || лимонена киселина, 1-вода, аналитичен клас | ГОСТ 3652-29 || натриев хлорид, реагент клас | || ГОСТ 4233-66 хлороформ медицински, поддържано СаСЬ | || 2 | || отстранена | || натриев сулфат, безводен, реагент клас | ГОСТ 4166-76 || дестилирана вода | | + ---------------------------------------------- + - ---------------- + 20% ацетон в хлороформ - до 20 куб. ацетон dobavithloroform cm до 100 куб. се отнасят към общото или 5% метанол vhloroforme - до 20 куб. добавете 5 см на хлороформ куб. cm метанол, за да доведе обем разтвор на 100 мл хлороформ. sm.6.2. Методът за получаване на М1 probAflatoksin отделя от течната проба мляко чрез propuskaniemee на касетата Diapak S16M. Фракцията, съдържаща aflatoksinM1, елуира се с хлороформ и касетата, след сушене iuparivaniya, крайно пречистване се извършва на патрон Diapak S.Podgotovlennaya проба готов за хроматографско analizu.Aflatoksin M1 на крем и млечни напитки ekstragiruyuthloroformom в присъствието на натриев хлорид и лимонена киселина от последователност с MU N 4082-86 <*> и, после высушивания и упаривания,проводят окончательную очистку на патроне Диапак С.--------------------------------<*> Методические указания по обнаружению, идентификации иопределению содержания афлатоксинов в продовольственном сырье ипищевых продуктах с помощью высокоэффективной жидкостнойхроматографии. Утв. МЗ СССР 20.03.86 N 4082-86.Для проверки правильности проведения пробоподготовки иуточнения степени извлечения микотоксинов проводят анализ методомстандартной добавки в исходный экстракт.Время проведения пробоподготовки - 60 мин. Степень извлечения<*> - 80%. Относительное среднее квадратическое отклонение - 10%.--------------------------------<*> При снижении степени извлечения афлатоксина М1 см.Приложение 1.6.3. Подготовка концентрирующих патронов6.3.1. Концентрирующий патрон Диапак С16МСнять с патрона Диапак С16М заглушки и пропустить через него спомощью шприца последовательно по 5 куб. см ацетонитрила и воды.Заглушить оба конца патрона. Подготовленный таким образом патронможет храниться в течение суток при температуре не выше 25 град.C.Концентрирующий патрон Диапак С16М одноразового применения ирегенерации не подлежит.6.3.2. Концентрирующий патрон Диапак ССнять с патрона Диапак С заглушки и пропустить через него спомощью шприца 5 куб. см бензола и заглушить оба конца патрона.Подготовленный таким образом патрон может храниться в течениесуток при температуре не выше 25 град. C.Концентрирующий патрон Диапак С одноразового применения ирегенерации не подлежит.6.4. Подготовка проб молочных продуктов к анализу6.4.1. Подготовка, концентрирование и очисткапроб молокаПробу молока 50 куб. см центрифугировать на подходящемоборудовании в течение 5 мин. при 1000 об./мин. Для определенияафлатоксина М1 отобрать 20 куб. см супернатанта, избегая попаданияжира.Сухое молоко растворяется в соответствии с инструкцией илисоответствующим ТУ и обрабатывается, как описано выше.20 куб. см подогретой до 40 град. C подготовленной пробымолока пропустить через предварительно подготовленный патронДиапак С16М со скоростью 3 капли в секунду. Затем патрон промыть 5куб. см дистиллированной воды и высушить продуванием воздуха втечение 1 мин. Элюаты отбросить. Патрон промыть 10 куб. см гексанаи вновь высушить воздухом в течение 1 мин.Афлатоксин М1 элюировать 6 куб. см хлороформа. Собранный элюатпропустить самотеком через слой безводного сульфата натрия (3 куб.см). Колбу обмыть 1 куб. см хлороформа, и содержимое перенести натот же слой безводного сульфата натрия. Хлороформные растворысобрать (Экстракт М).6.4.2. Подготовка проб сметаны и кисломолочныхпродуктовВ коническую колбу вместимостью 250 куб. см помещают навеску20,0 г сметаны или 40 куб. см кисломолочного напитка. Затем тудаже вносят 10,0 куб. см водного раствора 2 г хлорида натрия и 0,24г лимонной кислоты и 100 куб. см хлороформа (все составные частипредварительно подогревают до температуры 35 - 38 град. C).Содержимое колбы встряхивают 2 - 3 мин., переносят в центрифужныестаканы и центрифугируют 15 мин. при 3000 - 4000 об./мин. Отделяютнижний хлороформный слой, высушивают над 10 г безводного сульфатанатрия, отфильтровывают, измеряют объем фильтрата (V ) и упариваютфдо 5 - 6 куб. см (Экстракт М).6.5. Окончательная очистка пробыЭкстракт М нанести на патрон Диапак С со скоростью 3 - 4 каплив секунду. Промыть сульфат натрия 1 куб. см хлороформа, и растворнанести на патрон Диапак С при достижении верхнего фильтра патронауровнем предыдущей порции раствора.Афлатоксин М1 элюировать с патрона 10 куб. см 20-процентногоацетона в хлороформе или 7 куб. см 5-процентного метанола вхлороформе. Элюат собрать и упарить досуха на ротационномиспарителе или в слабом токе азота при температуре не выше 40град. C. Сухой остаток немедленно перерастворить в растворителе,соответствующем конечному хроматографическому определению (ПробаМ).Эквивалент массы пробы молока, взятой на анализ афлатоксинаМ1, М , - 20 г.прЭквивалент массы пробы сухого молока рассчитывается поформуле:mМ = --- x 20, (6.1)прVгде:М - эквивалент массы пробы, взятой на анализ, г-прm - масса пробы сухого молока, г-V - объем воды для растворения пробы сухого молока, куб. см.Эквивалент массы пробы сметаны или кисломолочных напитков,взятой на анализ, рассчитывается по формуле:VфM = --- x m ,(6.2)пр 100пргде:M - эквивалент массы пробы, взятой на анализ, г-прV - объем фильтрата, куб. см-фm - масса (объем) пробы сметаны или кисломолочных напитков,прг (куб. см).7. Патулин7.1. Оборудование, материалы, реактивы+----------------------------------------------+-----------------+|Испаритель ротационный ИР-1М2 |ТУ 25-1173.102 - || |84 или др. ||Центрифуга типа ЦЛН-2 или аналогичная |ТУ 5-375-4171-73 ||Устройство для создания вакуума около -0,7 мм | ||рт.ст. (водоструйный насос, масляный вакуумный| ||насос, медицинский отсасыватель) | ||Вакуумное устройство для подготовки проб (ва- | ||куумный манифолд), с приемниками проб вмести- | ||мостью не менее 10 куб. см| ||Устройство для упаривания проб в токе азота | ||при нагревании около 40 град. C (желательно | ||суховоздушная баня) | ||Концентрирующий патрон Диапак П-3,|ТУ 4215-002 -||ЗАО "БиоХимМак СТ"|05451931-94 ||Концентрирующий патрон Диапак С, |ТУ 4215-002 -||ЗАО "БиоХимМак СТ"|05451931-94 ||Пинцет медицинский, 15 см | ||Колбы плоскодонные конические с пробками вмес-|ГОСТ 25336 ||тимостью 50 куб. см | ||Колбы остродонные с пробками с взаимозаменяе- |ГОСТ 25336 ||мым конусом 14/23 вместимостью 5, 10 или 25 | ||куб. см | ||Колбы грушевидные с пробками с взаимозаменяе- |ГОСТ 25336 ||мым конусом 14/23 вместимостью 25 куб. см | ||Пробирка градуированная вместимостью 15 или 20|ГОСТ 1770||куб. см | ||Цилиндры мерные вместимостью 10 и 50 куб. см, |ГОСТ 1770||2 кл. | ||Микрошприц вместимостью 100 куб. мм (или пи- |ГОСТ 20292 ||петка с делениями исполнения 4 или 5, 1-го| ||класса точности вместимостью 1 куб. см) | ||Бумажные фильтры обеззоленные марки ФОМ | ||Вата медицинская нестерилизованная, х/б | ||Ацетат цинка 2-водный, чда|ГОСТ 5823||Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, |ТУ 6-09-14 - ||ОП-3 осч, ректифицированный |2167-84 ||Ацетон, осч, ректифицированный, ОП-2 |ТУ 6-09-3513-75 ||Бензол, хч, ректифицированный |ГОСТ 5955-75 ||Гексацианоферат II калия (калий железистосине-|ГОСТ 4207||родистый) 3-водный, хч| ||Гептан, гексан, хч или петролейный эфир |ТУ 6-09-3375-78 ||(фракция 70-100), хч, ректифицированный | ||Хлороформ, медицинский, выдержанный над CaCl ,| ||2 | ||ректифицированный | ||Этилацетат (этиловый эфир уксусной кислоты), |ГОСТ 22300-76||хч, выдержанный над Na CO и ректифицированный| || 2 3| ||Карбонат натрия, хч |ГОСТ 83-79 ||Сульфат натрия, безводный, хч |ГОСТ 4166-76 ||Вода бидистиллированная | |+----------------------------------------------+-----------------+1,5% карбоната натрия - 1,5 г карбоната натрия растворить в100 куб. см воды.15% этилацетата в бензоле - 15 куб. см этилацетата разбавитьбензолом до 100 куб. см.30% этилацетата в бензоле - 30 куб. см этилацетата разбавитьбензолом до 100 куб. см.Раствор Карреза I - 15,0 г гексацианоферата II калиярастворить в 100 куб. см воды.Раствор Карреза II - 30,0 г ацетата цинка растворить в 100куб. см воды.7.2. Способ подготовки пробМикотоксин патулин извлекают из проб осветленных соков инапитков пропусканием их через патрон Диапак П-3. Затем патулинэлюируют этилацетатом с патрона и после обработки растворомNa CO , высушивания, упаривания и перерастворения проводят2 3окончательную очистку на патроне Диапак С.Соки и напитки с мякотью и консистентные продукты разводятводой, осветляют растворами Карреза в соответствии с ГОСТом28038-89 <*>, фильтруют и экстрагируют патулин пропусканиемфильтрата через патрон Диапак П-3. Затем патулин элюируютэтилацетатом с патрона и после обработки раствором Na CO ,2 3высушивания, упаривания и перерастворения проводят окончательнуюочистку на патроне Диапак С.--------------------------------<*> Продукты переработки плодов и овощей. Метод определениямикотоксина патулина. ГОСТ 28038-89.Подготовленные пробы готовы к хроматографическому анализу.Для проверки правильности проведения пробоподготовки иуточнения степени извлечения патулина проводят анализ методомстандартной добавки в пробу.Время проведения пробоподготовки - 90 мин. Степень извлечения<*> - 60%. Относительное среднее квадратическое отклонение - 10%.--------------------------------<*> При снижении степени извлечения патулина см. Приложение 1.7.3. Подготовка концентрирующих патронов7.3.1. Концентрирующий патрон Диапак П-3Установить патрон Диапак П-3 вертикально в подходящееустройство для вакуумирования и открыть верхнюю крышку.Суспендировать сорбент при перемешивании стеклянной палочкой в 10куб. см бензола, дать отстояться сорбенту и пропустить при слабомвакууме, не допуская попадания воздуха, последовательно по 10 куб.см бензола и ацетона.Сохранив слой ацетона около 2 см, ввести пористый полимерныйфильтр (имеется в комплекте) и уплотнить его палочкой по верхнемуслоюсорбента.Затемпропустить оставшийся ацетон ипоследовательно по 10 куб. см экстрагента (см. п. 5.1) и смесиэкстрагент - вода (1:1), не допуская попадания воздуха на сорбентсо скоростью 2 - 3 капли в секунду.Сохранив слой последнего элюента около 2 см, отключить вакууми заглушить патрон сначала верхней крышкой, а затем (послепрекращения скапывания) и нижней заглушкой. Подготовленный такимобразом патрон может храниться в течение рабочего дня, а прислучайном пересыхании приводится в рабочее состояние прокачиванием10 куб. см смеси экстрагент - вода (1:1).Перед проведением пробоподготовки через патрон Диапак П-3пропустить 10 куб. см воды.Концентрирующий патрон Диапак П-3 многоразового применения иподлежит регенерации после проведения пробоподготовки по схеме егоподготовки, как указано выше.7.3.2. Концентрирующий патрон Диапак ССнять с патрона Диапак С заглушки и пропустить через него спомощью шприца 5 куб. см бензола и заглушить оба конца патрона.Подготовленный таким образом патрон может храниться в течениесуток при температуре не выше 25 град. C.Концентрирующий патрон Диапак С одноразового применения ирегенерации не подлежит.7.4. Подготовка проб к анализу7.4.1. Подготовка осветленных соков и напитковОтфильтровать пробу через плотный бумажный фильтр до получения20 куб. см фильтрата (Фильтрат П).7.4.2. Подготовка соков и напитков с мякотьюи консистентных продуктовНавеску пробы массой 10,0 г поместить в стеклянный стакан,смешать с небольшим количеством дистиллированной воды иколичественно перенести в мерную колбу вместимостью 50 куб. см. Вмерную колбу внести 6,0 куб. см раствора Карреза I и 6,0 куб. смраствора Карреза II. Содержание колбы довести дистиллированнойводой до метки, тщательно перемешать и отфильтровать в мерныйцилиндр через бумажный складчатый фильтр. Измерить объем фильтрата(Фильтрат П).7.5. Концентрирование и очистка пробы7.5.1. Концентрирование пробы на патроне Диапак П-3Весь объемФильтратаПнанестина предварительнокондиционированный патрон Диапак П-3 со скоростью 1 - 2 капли всекунду. Промыть патрон 5 куб. см бидистиллированной воды. Всесмывы отбросить.Патулин элюировать с патрона 10 куб. см этилацетата в колбуили мерную пробирку с пришлифованной пробкой, содержащую 5 куб. см1,5-процентного карбоната натрия, закрыть пробкой, интенсивноперемешать и дать отстояться. Декантировать верхний этилацетатныйслой, высушить его безводным сульфатом натрия (3 г) и перенести вколбу для упаривания. В колбу или пробирку, содержащую оставшийся1,5-процентный карбонат натрия, добавить еще 10 куб. смэтилацетата, перемешать и, после полного расслоения, высушиванияэтилацетатного слоя тем же сульфатом натрия, объединить его спервой порцией этилацетатного раствора в той же колбе дляупаривания. Операцию повторить с 5 куб. см этилацетата.Упарить этилацетатный раствор на ротационном испарителе притемпературе не выше 40 град. C до объема около 0,5 куб. см (неупаривать досуха!). Количественно перенести пробу в сердцевиднуюколбу вместимостью не более 5 куб. см или в полимерную пробиркутипа Эппендорф, промыв предыдущую отгонную колбу 0,5 куб. смэтилацетата, и присоединить к упариваемой пробе. Пробу упарить втоке азота при температуре не более 40 град. C в суховоздушнойбане до 0,5 куб. см и добавить к ней 2,5 куб. см бензола.7.5.2. Окончательная очистка пробы на патроне Диапак СБензол - этилацетатный раствор пропустить через патрон ДиапакC со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Обмыть колбу еще 0,5 - 1,0куб. см 15-процентного этилацетата в бензоле и нанести на патрон.Все смывы отбросить.Патулин элюировать с патрона 6 куб. см 30-процентногоэтилацетата а бензоле, собирая элюат в сердцевидную отгоннуюколбу. Элюат упарить досуха в токе азота при температуре не выше40 град. C в суховоздушной бане.Внимание! После упаривания пробу немедленно перерастворить в100 мкл хлороформа, охлажденного до 0 - 5 град. C (для ТСХ -анализа) или в 100 - 500 мкл охлажденной до 5 - 8 град. Cбидистиллированной воды, подкисленной до pH 4,0 уксусной кислотой(для ВЭЖХ - анализа) и быстро охладить до 0 - 5 град. C (Проба П).Хранить Пробу П в холодильнике не более 1 ч.Эквивалент массы пробы осветленных соков и напитков, взятой наанализ, М , - 20 г, соков и напитков с мякотью и консистентныхпрпродуктов определяется по формуле:VФр.ПМ = ----- x m , (7.1)пр 50 пргде:М - эквивалент массы пробы, взятой на анализ, г-прV - объем Фракции П, куб. см-Фр.Пm - масса пробы соков и напитков с мякотью или консистентныхпрпродуктов, г.Приложение 1РЕКОМЕНДУЕМАЯ МЕТОДИКАИСПЫТАНИЙ КОНЦЕНТРИРУЮЩИХ ПАТРОНОВ ДИАПАКВведениеКаждая партия концентрирующих патронов Диапак П-3, ДиапакС16М, Диапак Н, Диапак С, а также партии сорбентов Диасорб А иДиасорб АУ подвергаются выходному контролю в соответствии сТУ 4215-002-05451931-94 наихсоответствиетребованиям,предъявляемым к специализированным патронам для твердофазнойэкстракции микотоксинов. Этим метрологически обеспечивается ихпроизводство.Применение настоящих испытаний рекомендуется проводить вследующих случаях:- еслирезультатпроверкиправильности проведенияпробоподготовки методом стандартной добавки не соответствуетнормативу коэффициента извлечения-- если патроны Диапак подвергались неправильному хранению илинарушена целостность упаковки-- в случаях дополнительного сверхнормативного использованиярегенерируемых патронов (Диапак Н, Диапак П-3).Приведенные ниже методики проверки патронов Диапак позволяютвыявить ошибку по стадиям пробоподготовки. При соответствиихарактеристик патронов Диапак нормативным требованиям следуетискать ошибки в правильности подготовки растворителей иприготовлениирастворов,контроле условий упаривания иперерастворения анализируемых проб.Если среди стадий подготовки пробы присутствует подготовка напатроне Диапак С, рекомендуется начинать анализ возможной потерицелевого компонента именно с этого патрона. Это связано счувствительностьюсиликагеляк качеству используемыхрастворителей, и прежде всего с содержанием в них воды. Такаяспецифика сильной зависимости активности патрона Диапак С отусловий его хранения и качества используемых растворителей можетпотребовать оптимизации количества элюента, используемого приработе с этими патронами в конкретной лаборатории.Общая частьНастоящая Методикапредназначенадляметрологическогообеспечения применения патронов Диапак в анализе микотоксинов иустанавливает процедуру их испытаний. Критерием качества патроновДиапак является соответствие результатов испытаний нормативамкоэффициента извлечения, K , в модельных экспериментах вRсоответствии со схемами элюирования, приведенными в разделах 5 - 7настоящих Методических указаний.Коэффициент извлечения рассчитывают по формуле:C` x KdK = ------- x 100, (1)R Cгргде:K - коэффициент извлечения данных микотоксинов, %-RC` - концентрация данного микотоксина, найденная в результатеиспытания, мкг/куб. см (или S` площадь хроматографического пика,соответствующая концентрации C`)-C - концентрация того же микотоксина, используемая длягрградуировки хроматографической системы, мкг/см (или Sплощадьгрхроматографического пика, соответствующая концентрации C )-грK - коэффициент разведения образца.dЗа окончательное значение K принимаетсясреднееRарифметическое результатов двух параллельных испытаний, еслиабсолютное расхождение между ними не превышает 5%.Испытания проводятся относительным методом по схеме "введено -найдено", поэтому специальных требований к стандартным образцаммикотоксинов не предъявляется.1. Испытание патронов Диапак А-3 иДиапак П-3 по афлатоксину В1 и зеараленонуИспытание патронов Диапак А-3 проводится совместно с ДиапакП-3 из-за низких концентраций афлатоксина В1 и зеараленона, атакже их температурной лабильности, приводящей к невозможностиконцентрирования упариванием. Патрон Диапак П-3 может быть испытаннезависимо от Диапак А-3, что рекомендуется выполнять потребителючерез каждые 10 проб после соответствующей регенерации по п.5.3.3.Приготовить из имеющихся стандартных растворов микотоксинов1,0 куб. см испытательной смеси, содержащей 0,4 мкг афлатоксина В1и 4,0 мкг зеараленона в произвольной смеси бензола и ацетонитрила.Аликвоту смеси объемом 0,25 куб. см перенести в сердцевиднуюколбу, и упарить растворители досуха в токе азота при температуре40 град. C. Немедленно перерастворить остаток в 0,25 куб. смрастворителя, соответствующего конечному хроматографическомуопределению. Ориентировочные значения концентраций: 0,4 мкг/куб.см - для афлатоксина В1 и 4,0 мкг/куб. см - для зеараленона.Ввести раствор не менее двух раз в хроматографическую систему ирассчитать среднее арифметическое значение площадей пиков каждогоиз микотоксинов, C (S ).гр грПодготовить патроны Диапак А-3 и Диапак П-3 в соответствии сп. п. 5.3.1 и 5.3.3.Вторую аликвоту смеси объемом 0,25 куб. см упарить аналогично,перерастворить в 25 мл экстрагента (смеси ацетонитрил - вода -84:16) и нанести на патрон Диапак А-3 в соответствии с п. 5.1.1.Полученные 20 мл элюата сконцентрировать на патроне Диапак П-3 всоответствии с п. 5.1.1. Концентратперерастворитьипроанализировать аналогично градуировочному эксперименту, получивзначение C`(S`).Рассчитать значение K по формуле (1). Значение K = 1,25.R dКоэффициент извлечения, K , должен быть не менее 90% - дляRафлатоксина В1 и 85% - для зеараленона.При испытании одного патрона Диапак П-3 вторую аликвотуобъемом 0,25 куб. см после упаривания перерастворить в 40 мл смесиэкстрагент - вода (1:1) (смеси ацетонитрил - вода 42:58) исконцентрировать в соответствии с п. 5.1.1. Рассчитать значениеK , принимая K = 1,00. Коэффициент извлечения, K , должен быть неRd Rменее 95% - для афлатоксина В1 и 95% - зеараленона.2. Испытание патронов Диапак АУ-3по дезоксиниваленолу и Т-2 токсинуПриготовить из имеющихся стандартных растворов микотоксинов1,0 см испытательной смеси, содержащей по 20 мкг дезоксиниваленолаи Т-2 токсина в произвольной смеси бензола и ацетонитрила.Аликвоту смеси объемом 0,25 куб. см перенести в сердцевиднуюотгонную колбу и упарить досуха на ротационном испарителе притемпературе 40 - 50 град. C. Перерастворить остаток в 0,25 куб. смрастворителя, соответствующего конечному хроматографическомуопределению. Ориентировочное значение концентраций: 20 мкг/куб. см- для дезоксиниваленола и Т-2 токсина. Для градуировкихроматографической системы ввести раствор не менее двух раз ирассчитать среднее арифметическое значение площадей пиков каждогоиз микотоксинов, C (S ).гр грПодготовить патрон Диапак АУ-3 по п. 5.3.2.Вторую аликвоту смеси объемом 0,25 куб. см упарить аналогично,перерастворить в 20 мл экстрагента (смеси ацетонитрил - вода84:16) и нанести на патрон Диапак АУ-3, в соответствии с п. 5.5.2.После упаривания досуха остаток перерастворить и проанализироватьаналогично градуировочному эксперименту, получив значение C` (S`).Рассчитать значение K по формуле 1. Значение K = 1,00.R dКоэффициент извлечения K должен быть не менее 95% - дляRдезоксиниваленола и Т-2 токсина.3. Испытания патрона Диапак НКонцентрирующие патроны Диапак Н являются универсальнымирегенерируемыми патронами для окончательной очистки афлатоксинаВ1), зеараленона, дезоксиниваленола и Т-2 токсина, поэтомуиспытание рекомендуется выполнять через каждые 10 проб послеочередной регенерации по п. 5.3.4. Патроны Диапак Н обеспечиваюттонкую очистку указанных микотоксинов с высокими метрологическимихарактеристиками (K не менее 90%), поэтому значения K менее 90%R Rчаще всего свидетельствуют об ошибках в приготовлении элюентов илио недостаточной чистоте растворителей.3.1. Испытание по афлатоксину В1 и зеараленонуСухой остаток упаренной второй аликвоты испытательной смеси поп. 1 немедленно перерастворить в 0,5 мл бензола и нанести поусловиям п. 5.1.2 на подготовленный (см. п. 5.3.4) патрон ДиапакН. После элюирования и упаривания Пробы З и Пробы А немедленноперерастворить их в 0,25 куб. см растворителя, соответствующегоконечному хроматографическому определению, и проанализироватьаналогично градуировочному эксперименту по п. 1, получив значениеC (S ) и C`(S`) по каждому из микотоксинов.гр грРассчитать значение K по формуле (1). Значение K = 1,00.R dКоэффициент извлечения K должен быть не менее 90% - дляRафлатоксина В1 и зеараленона.3.2. Испытания по дезоксиниваленолу и Т-2 токсинуСухой остаток упаренной второй аликвоты испытательной смеси поп. 2 перерастворить в 0,5 мл хлороформа и нанести по условиям п.5.1.2 на подготовленный патрон Диапак Н. После элюирования иупаривания Пробу Д и Пробу Т перерастворить в 0,25 куб. смрастворителя, соответствующего конечному хроматографическомуопределению, и проанализировать аналогично градуировочномуэксперименту по п. 2, получив значения C (S ) и C`(S`) погр гркаждому из микотоксинов.Рассчитать значения K по формуле (1). Значение K = 1,00.R dКоэффициент извлечения Kдолжен быть не менее 90% дляRдезоксиниваленола и Т-2 токсина.4. Испытания патрона Диапак СКонцентрирующие патроны Диапак С являются одноразовымипатронами для окончательной очистки афлатоксина В1 и зеараленона,а также афлатоксина М1 и патулина. Патроны Диапак С обеспечиваюттонкую очистку указанных микотоксинов с хорошими метрологическимихарактеристиками (K = 75 - 90%). Для достижения указанныхRхарактеристик необходимо установить оптимальный объем элюированиямоделированием порционного элюирования (1 - 3 порции по 3 мл)целевых фракций в ходе настоящих испытаний.Оптимальную схему элюирования, т.е. необходимое число порцийпо 3 мл, потребитель устанавливает по достижению суммарногокоэффициентаизвлечениянениже указанного норматива.Установленный объем элюирования подлежит проверке при смене партиирастворителей и их смесей, используемых для тонкой очисткимикотоксинов.4.1. Испытания по афлатоксину В1 и зеараленонуПодготовить патрон Диапак С в соответствии с п. 5.3.5.Сухой остаток упаренной второй аликвоты испытательной смеси поп. 1 немедленно перерастворить в 0,5 мл бензола и нанести напатрон Диапак С в соответствии с п. 5.1.3. После элюирования ираздельного упаривания трех фракций Пробы З и трех фракций Пробы Анемедленно перерастворить их в 0,25 куб. см растворителя,соответствующего конечному хроматографическому определению, ипроанализировать аналогично градуировочному эксперименту по п. 1,получив по три значения Sи одному S` по каждому изгрмикотоксинов.Рассчитать K по формуле (1) для каждой из трех фракций Проб ЗRи А K = 1,00. Суммарный коэффициент извлечения K должен быть неdRменее 90% - для афлатоксина В1 и 85% - для зеараленона. Определитьминимальновозможноечисло последовательных фракций,обеспечивающее суммарный K не ниже норматива. Найденное числоRфракций (от 1 до 3) и определяет оптимальный объем элюированияданных микотоксинов с патрона Диапак С данной партии сприготовленными растворителями.Если значение суммарного K меньше нормативного значения, тоRэто свидетельствует об ошибках в приготовлении элюирующих смесейи/или о недостаточной чистоте растворителей, в особенности с точкизрения содержания в них воды.4.2. Испытание по афлатоксину М1Приготовить из имеющегося стандартного раствора 1,0 куб. смиспытательной смеси, содержащей 0,1 мкг афлатоксина М1 впроизвольной смеси бензола и ацетонитрила. Аликвоту смеси объемом0,25 куб. см перенести в сердцевидную колбу и упарить раствор втоке азота при температуре 40 град. C. Немедленно перерастворитьостаток в 0,25 - 1,0 куб. см растворителя, соответствующегоконечному хроматографическомуопределению.Ориентировочныезначения концентраций афлатоксина М1 0,025 - 0,1 мкг/куб. смсоответственно. Для проведения градуировочного эксперимента ввестираствор не менее двух раз в хроматографическую систему ирассчитать среднее арифметическое значение площадей пиковафлатоксина М1, C (S ).гр грВторую аликвоту смеси объемом 0,25 куб. см упарить, какописано выше, перерастворить в 6 мл хлороформа и нанести вусловиях п. 6.5 на подготовленный (см. п. 6.3.2) патрон Диапак С.После элюирования и раздельного упаривания трех последовательныхфракций Пробы М немедленно перерастворить их в 0,25 - 1,0 куб. смрастворителя, соответствующего конечному хроматографическомуопределению, и проанализировать аналогично градуировочномуэксперименту, получив три значения C`(S`) по афлатоксину М1.Рассчитать K по формуле (1) для каждой их трех фракций ПробыRМ K = 1,00. Суммарный коэффициент извлечения K для афлатоксинаdRМ1 должен быть не менее 85%. Найти оптимальный объем элюированияафлатоксина М1 с патрона Диапак С по алгоритму, приведенному в п.4.1. Там же приведен алгоритм поиска ошибок.4.3. Испытание по патулинуПриготовить из имеющегося стандартного раствора 1,0 куб. смиспытательной смеси, содержащей 4,0 мкг патулина в произвольнойсмеси бензола и ацетонитрила. Аликвоту смеси объемом 0,25 куб. смперенести в сердцевидную колбу и упарить растворитель в токе азотапри температуре 35 - 40 град. C. Немедленно перерастворить остатокв 0,25 куб. см растворителя, соответствующего конечномухроматографическомуопределению.Ориентировочноезначениеконцентрации патулина: 4,0 мкг/куб. см. Для проведенияградуировочного эксперимента ввести раствор не менее двух раз вхроматографическую систему и рассчитать среднее арифметическоезначение площади пика патулина, C (S ).гр грВторую аликвоту смеси объемом 0,25 куб. см упарить аналогично,перерастворить в 3 мл 15-процентного этилацетата в бензоле инанести в условиях п. 7.5.2 на подготовленный (см. п. 7.3.2)патрон Диапак С. После элюирования и раздельного упаривания трехпоследовательных фракций Пробы П немедленно перерастворить их в0,25 куб. смрастворителя,соответствующегоконечномухроматографическому определению, и проанализировать аналогичноградуировочному эксперименту по п. 4.3, получив три значенияC`(S`) по патулину.Рассчитать значение K по формуле (1) для каждой из трехRфракций Пробы П. K = 1,00. Суммарный коэффициент извлечения KdRдля патулина должен быть не менее 75%. Найти оптимальный объемэлюирования патулина с патрона Диапак С по алгоритму, приведенномув п. 4.1. Там же приведен алгоритм поиска ошибок.5. Испытание патрона Диапак П-3 по патулинуВторую аликвоту испытательной смеси по п. 4.3 объемом 0,25куб. см после упаривания перерастворить в охлажденной до 5 - 8град. C воде, подкисленной уксусной кислотой до pH 4,0, исконцентрировать в условиях п. 7.5.1 на подготовленном (см. п.7.3.1) патроне Диапак П-3. После элюирования и высушивания упаритьэтилацетатный экстракт досуха в токе азота при температуре 35 - 40град. C, немедленно перерастворить в 0,25 куб. см растворителя,соответствующего конечному хроматографическому определению, ипроанализировать аналогично градуировочному эксперименту по п.4.3, получив значения C (S ) и C`(S`).гр грРассчитать значение K по формуле (1). Значение K = 1,00.R dКоэффициент извлечения K для патулина должен быть не менее 80%.R6. Испытание патрона Диапак С16М по афлатоксину М1Вторую аликвоту испытательной смеси по п. 4.2 объемом 0,25куб. см после упаривания перерастворить в 20 мл 5-процентногоацетонитрила в воде и нанести в соответствии с п. 6.4.1 наподготовленный по п. 6.3.1 патрон Диапак С16М. После элюирования ивысушивания упарить хлороформный экстракт М на ротационномиспарителе при температуре не выше 40 град. C, немедленноперерастворить его в 0,25 - 1,0 куб. см растворителя,соответствующего конечному хроматографическому определению, ипроанализировать аналогично градуировочному эксперименту по п.4.2, получив значения C (S ) и C`(S`) для афлатоксина М1.гр грРассчитать K по формуле (1) K = 1,00. Коэффициент извлечения,R dK , по афлатоксину М1 должен быть не менее 95%.
здравно законодателство



Москва, Федерален център за санитарна инспекция Министерството на здравеопазването на Русия, 1999UtverzhdayuGlavny gosudarstvennyysanitarny vrachRossiyskoy FederatsiiG.G.ONISchENKO23 Октомври 1999 въведение godaData през януари 2000 г. goda4.1 -1. Методи за контрол. ХИМИЧЕСКИ FAKTORYOPREDELENIE MASS KONTSENTRATSIIMIKOTOKSINOV в хранителни суровини и PRODUKTAHPITANIYA. ПОДГОТОВКА НА ПРОБИТЕ METODOMTVERDOFAZNOY EKSTRAKTSIIMETODICHESKIE UKAZANIYAMUK 4.1.787-991. Разработено от Федералния център на Държавния санитарен и епидемиологичен MinzdravaRossii (VB Скачков, IV Bragin, кралица NV) и ЗАО"BioKhimMak CT" (Водещ изследовател Vasiyarov GG, GS starshiynauchny служител Алексеев, старши изследовател OsokinD.M., Доктор на химическите науки Staroverov см.). 2. Одобрени и въведени в действие главен gosudarstvennymsanitarnym лекар на Руската федерация от 23 октомври 1999 Г.3. Vpervye.1 въведена. Цел и обхват primeneniyaNastoyaschie Metodicheskieukazaniyaustanavlivayutsposobypodgotovki проби от хранителни суровини и храни produktovmetodom твърда фаза извличане posleduyuschegohromatograficheskogo за микотоксини анализ и безопасност Проучванията са dlyaprovedeniyalaboratornyh pischevoyproduktsii gossanepidsluzhby институции на Руската федерация, както и dlyapredpriyaty и институции, занимаващи се с контрол на качеството iissledovaniya хранителни суровини и хранителни продукти за съгласуваност с SanPiN 2.3.2.560-96 "Kkachestvu хигиенните изисквания и безопасността на хранителните суровини и pischevyhproduktov" и акредитирани в съответствие с установената poryadke.2. Метода от Приготовление probPodgotovka проби включва следните части: - екстракция тест цел осигуряване екстракт poluchenieedinogo съдържащ всички микотоксини нормализирана vdannom обект на SanPin препарат 2.3.2.560-96-- екстракт чрез екстрахиране vklyuchayuschayapredvaritelnuyuochistku твърда фаза, kontsentrirovanieiokonchatelnuyu пречистване на концентриране касети Diapak.3 , Изисквания bezopasnostiPri на реагенти, разтворители и veschestvamineobhodimo отговарят на изискванията за безопасност, установени dlyaraboty токсични, корозивни и запалими вещества POGOST 12.1.005-88.4. Условия за получаване probProtsessy извършващи получаване и обработка на проби разтвор проведени vnormalnyh условия при температура на околната среда 18 - 22grad. В.5. Афлатоксин В1 (AP-В1), зеараленон (ЗОН), деоксиниваленол (DON) и Т-2 токсин (T-2) 5.1. Машини, съоръжения и материали, reaktivyTablitsa 1 + ------------------------------------ + ------ --- + --------- + --- + --- + | Оборудване, материали, реагенти | AT-B1 | ЗОН | DON | 2 || T и решения + ---- + ---- + ---- + ---- + | ||| 1 | 2 | 1 | 2 | | ||| Var |. Var |. Var |. Var. | | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | тип шейкър проби | + || AVU-6C ТУ 64-1-2451-78 или магнитен | || -magnetic или механична бъркалка | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | аналитична везна с точност | + || претегля 0.01 гр +/- | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | тип Mill "циклон" QC-114 | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | ротационен изпарител (TS-1м2, | + || W или 25-1173.102-84 др.) | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | устройство за вакуум | + || около -0.7 мм живачен стълб (Водоструйни | || помпа, вакуумна помпа масло, | || Медицински аспиратор) | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | вакуумно устройство за обучение | + || проби (вакуумни системи), с приемници | || прякори изпитание капацитета на не по-малко от | || 10 куб. виж | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | устройство за изпаряване на проби | + | + | - | - | - | - || поток от азот при нагряване около ||||| | || 40 градуса. С (сух въздух е желателно ||||| | || Bath) ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Концентрирането патрон Diapak А-3, | + | + | + | + | + | + || ТУ 4215-002-05451931-94, ||||| | фирма || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Концентрирането патрон Diapak АС-3, | - | - | - | - | + | + || ТУ 4215-002-05451931-94, ||||| | фирма || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Концентрирането патрон Diapak Р-3, | + | + | + | + | - | - || ТУ 4215-002-05451931-94, ||||| | фирма || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Концентрирането патрон Diapak Н | + | - | + | - | + | + || ТУ 4215-002-05451931-94, ZAO ||||| | ||"BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Концентрирането патрон Diapak С, | - | + | - | + | - | - || ТУ 4215-002-05451931-94, ||||| | фирма || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | медицински плоски клещи, 15 см | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | метална шпатула или порцелан | + || лъжица | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | плоскодънни колби с конична | + | + | + | + | - | - || запушалките с капацитет от 50 кубически метра. см ||||| | || ГОСТ 25336 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | плоско дъно конични колби | + || (ерленмайерова) vmestimos- задръстванията | || Тю 250 или 300 см. см | || ГОСТ 25336 | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | на Бюхнер колба с капацитет от 500 кубически метра. | + || Вижте | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | фуния Бунзен капацитет | + || 200 мед. виж | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | фуния разделителен капацитет | + || 250 мед. виж ГОСТ 25336 | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | ostrodonnye колби с тапи за | + || ГОСТ 25336 с взаимозаменяеми konu- | || сом 14/23 капацитет от 5, 10 | || 25 куб. виж | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | крушовидни колби с тапи за | + | + | + | + | - | - || ГОСТ 25336 с взаимозаменяеми konu- ||||| | || сом 14/23 капацитет от 10 и 25 кубически метра. ||||| | || видите ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | измерване цилиндри с капацитет от 25, 50, | + || 100 мед. см 2 клетки, в съответствие с ГОСТ 1770 | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | микроспринцовка с капацитет от 100 кубически метра. mm | + || (или пипета завършва ГОСТ | || 20292 изпълнение на 4 или 5, първи кла |. || SA капацитет точност до 1 см) | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | филтърна хартия (плътен, тясна || - || - | + | + || koporistaya бавно филтриране ||||| | | | тип тънък седимент "синя ||||| | || Feed") ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | нестерилизирани медицински памук, | + || х / б | | + ------------------------------------ + ----------- ---------------- + | ацетонитрил за течна хроматография | + || графия, ОП-3 OFS ТУ | || 6-09-14-2167-84 отстранена | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | ацетон, с висока чистота, съгласно ТУ 6-09-3513-75 | - | + | - | - | - | - || ОП-2, поправено ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | бензен, реагент степен, в съответствие с ГОСТ 5955-75, vyder- | + | + | + | + | - | - || zhanny над Na SO, отстранени ||||| | || 02 април ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | хептан, хексан, XQ, ТУ | + | + | + | + | - | - || 6-09-3375-78 или петролев етер ||||| | || (фракция 70-100), реагент клас, ||||| | Ректифицираната || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 2-пропанол (изопропилов алкохол), | - | - | - | - | + | + || XQ, ТУ 6-09-402-75, ||||| | Ректифицираната || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | ледена оцетна киселина, XV, в | + | + | + | + | - | - || ГОСТ 61-75 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | хлороформ, медицински, претърпени | - | - | - | - | + | + || над калциев хлорид, поправено ||||| | || 2 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | метиленхлорид (дихлорометан), | + | + | - | - | - | - || поддържано калциев хлорид, ||||| | || 2 ||||| | Ректифицираната || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | етер диетил, поддържано | - | + | - | - | - | - || NaOH, отстранени ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | етил ацетат (етил ацетат || + || - || - || киселина), реагент степен, в съответствие с ГОСТ 22300-76, || ||| | || поддържа над натриев карбонат и rektifitsi- ||||| | || 03 февруари ||||| | Rowan || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | натриев сулфат, безводен, реагент степен, на | + | + | + | + | - | - || ГОСТ 4166-76 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | натриев хлорид, реагент степен, в съответствие с ГОСТ 4233-77 | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | дестилирана вода | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | екстрагент - 84% ацетонитрил във во | + || де, 840 кубически метра. Вижте ацетонитрил dovo- | || dyatsya до 1 литър вода или polucha- | || etsya чрез дестилация с вода воден | || но - ацетонитрил смес (1: 4) | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 33% бензен в ацетонитрил - смесват | + | + | + | + | - | - || 30 куб. Вижте бензен и 60 кубически метра. Виж ацетон ||||| | || tonitrila (1: 2) ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 20% ацетонитрил в бензол - 20 куб.м |. + | - | - | - | - | - || cm ацетонитрил се разрежда бензен ||||| | || до 100 кубически метра. виж ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 2% оцетна киселина в бензен - 2 | - | - | + | - | - | - || мед. виж разредена оцетна киселина ||||| | || бензен до 100 кубически метра. виж ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 5% оцетна киселина в бензен - 5 | - | + | - | - | - | - || мед. виж разредена оцетна киселина ||||| | || бензен до 100 кубически метра. виж ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 10% етил ацетат в бензол - 10 куб.м. | - | + | - | + | - | - || cm ацетат разрежда с бензол до ||||| | || 100 куб. виж ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 25% хексан в въздух - 25 CU. виж | - | + | - | - | - | - || хексан разрежда с диетилов етер ||||| | || до 100 кубически метра. виж ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 10% ацетон в дихлорометан - 10 куб. | - | + | - | - | - | - || разрежда ацетон cm 
Споделяне в социалните мрежи: 

сроден

© 2011—2022 GuruHealthInfo.com