Получаване osteoprogenitornogo присадка ин витро

Изследвания цел: да проектират триизмерни остеопрогениторни трансплантация ин витро.

Материали и методи. Тъй като скелета на различни клетъчни линии, използвани проби от хидроксиапатит, стъклокерамика, порести и кортикална деминерализирана костна матрица, biotmate риал «Osteomatryks» ( «Konektbyofarm», Русия). Методът на култивиране на клетки се използва за изолиране и разширение на различните потенциални мезенхимни стромален cellss (MMSC) култури и надкостница, извлечени от клетки (PDC). Преди cell`s засяване на превозвачите MMSC се предизвикват да се направи разграничение на разработена и патентована от нас технология. Методът за етикетиране плазмените мембрани от интравитална бои Fluoreccent Green PKH67 и Червения РКН26 ( «Сигма», САЩ) е използван за подобряване на визуалното грижа за местоположението клетки на повърхността на scaffold`s. Цитохимични метод се използва за откриване на алкален fosfatase активност с използване на на BCIP / NBT Течен Субстрат система ( «Sigma», САЩ).

Резултати. При специфични условия на култивиране MMSC беше въведен на остеогенен линия, която е потвърдено от положителното алкална фосфатаза оцветяване. Хистологичен препарат напомня костната тъкан.

Заключения. Тази технология позволява получаване на 3D-osteoprogenitive трансплантация екс виво.


Целта на проучването.

За да се изработи триизмерен ин витро osteoprogenitorny присадка.

Материали и методи.

Като носители на различни клетъчни линии, използвайки хидроксиапатит проби, стъклокерамика, деминерализирана кортикална и порестата костна матрица, биоматериал "Osteomatrix" ( "Konektbiofarm", Русия). метод за клетъчно култивиране се прилага за изолиране и мащаба на културите мултипотентни мезенхимни стромални клетки (MMSC), периоста и прогениторни клетки (PKN). Преди засяване клетки на превозвача бе извършена от bioosteoinduktsiyu ITCs разработени и патентовани от нас технология. За да се подобри визуално наблюдение на местоположението на клетките на skafoldov плазма на повърхността се използва за етикетиране мембрана на жизнените бои RKN67 RKN26 зелено и червено Fluoreccent ( «Сигма», САЩ). За откриване на алкалната фосфатаза се използва цитохимични метод използва субстрат BCIP / NBT Течен Субстрат система ( «Sigma», USA).

резултати.

ITCs при специфични условия на култивиране, индуцирани от остеогенен начин, което беше потвърдено чрез положително оцветяване за алкална фосфатаза. Хистологично лекарството прилича на костите.

данни.

Тази технология осигурява 3D-osteoprogenitorny присадка на екс виво.


¹Papadopoulos AG, ²Oksimets VM, ¹Оберемко AV, ²Магомедов YA
¹Държавна институция "Институт за спешна и реконструктивна хирургия. VK Gusak Медицински науките на Украйна "²Научноизследователски институт по травматология и ортопедия на Донецк Националния медицински университет. М. Горки, Донецк, Украйна