Микробиологичен метод за лабораторна диагностика на инфекциозни заболявания

След получаване на резултатите от проверката и като се вземат предвид епидемиологичните данни, определени окончателна диагноза. В диагнозата посочва нозологична форма шифър ICD-10, методът за потвърждаване на диагнозата, остротата и хода на заболяването, стадия на заболяването, наличието на съпътстващи заболявания и усложнения, като например "коремен (кръвна култура), тежестта на заболяването, период razgara- усложнение на - чревния krovotechenie- придружаващи заболявания - диабет ". Като точна и подробна диагноза определя терапевтичната стратегия.

В някои случаи, когато клиничните данни са недостатъчни, и лабораторни тестове, не позволяват да се установи етиологията на заболяването, могат да бъдат постановка на синдромите, диагноза (например, хранителни отравяния, остри респираторни заболявания, ТОРС).

Лабораторните изследвания играят важна роля при диагностицирането на инфекциозни заболявания, назначаване на причинна лечение, извършване на мониторинг на ефективността на лечението. процес специфична лабораторна диагностика Тя се основава на определянето на патогена и отговора на човешкото тяло по време на инфекциозния процес. Тя се състои от три етапа: събиране на материали, транспорт и научните изследвания в лабораторията. С провеждане на всеки етап от пускането на специфични изисквания за съответствие, която определя ефективността на лабораторната диагностика. Задачата на лекаря правилния избор на метод на научните изследвания и правилна оценка на своите резултати.

методи Laboratory Диагностични различават чувствителност и специфичност. Чувствителността на метода отразява вероятността, че резултатът от теста е положителен, заразени пациента и се определя от съотношението на общия брой на положителни резултати в общия брой на заразените пациенти. Колкото по-висока чувствителност, по-малко вероятността от фалшиво-отрицателни резултати. Критерият за специфичност отразява вероятността, че резултатите от теста ще бъде положително в здрави пациенти, и се изчислява като съотношение на общия брой отрицателни резултати на общия брой на не-инфектирани пациенти. Колкото по-малко специфично, толкова по-голяма вероятността от фалшиво-положителни резултати. И двете цифри са изразени като процент.

Микробиологично диагностичен метод, базиран на засичането на патогени в биологичен материал. Използвайте лек оптичен и електронен микроскоп.

Микробиологичен метод се използва широко при диагностицирането на инфекциозни заболявания на бактериални, протозойни етиология и рядко на вирусни заболявания.

В практиката на бактериологичното лаборатория микроскопско изследване в повечето случаи е на стойност показателно бързо диагностициране. Основните задачи са микроскопия за откриване на патогена в клинични проби, приблизително определяне въз основа на определяне на характерните признаци на морфологични и багрилни бактерии, и изследване на оцветени петна на чисти култури от колониите.

Материалът за микроскопско изследване може да бъде кръв, костен мозък, цереброспинална течност, точковидна лимфни възли, изпражнения, дванадесетопръстника съдържание и жлъчката, урина, слюнка, секрети на урогениталния тракт, тъканни биопсии, намазки от лигавицата на устата, сливиците, назален и други.

За откриване на "кръвни паразити", например протозойни (Plasmodium малария, трипанозоми, Leishmania, Babesia) и хелминти (microfilaria), тествани лекарства "тънка намазка" и / или "дебела капка" кръв.

Drug "дебела капка" подготвени по два начина:

Изсъхне "дебела капка" трябва постепенно във въздуха, без отопление, под тяхната защита срещу насекоми. оцветени с кръвни продукти без предварително фиксиране с Романовски-Giemsa.

да се подготвят тънка намазка направи кръв отпечатък близо до ръба на плъзгача и след това под ъгъл ръб на 45 ° се подава капка и кристал след кръв разпространява по протежение на ръба на непрекъснато движение разпределя кръв по повърхността на плъзгача. Полученият препарат се фиксира и оцветява.

Спинална течност за микробиологично изследване са взети в стерилна епруветка време на лумбална пункция. За получаване на състава се използва утайка спонтанно или чрез центрофугиране.

Намазки от устната кухина лигавицата приема на празен стомах или 2 часа след хранене стерилен памучен тампон, намазка-отпечатък се получават върху стъклен слайд. Когато последният филм запасите се отстранява със стерилни пинсети. Материал от носната кухина вземат със стерилна памучен тампон, който се въвежда дълбоко в носната кухина. NP тампон взети zadneglotochnym стерилен тампон това въвеждане внимателно през отвора на назален в назофаринкса. За анализ на дифтерия проучи филм, така и слуз от носа и гърлото. Материал от носа и фаринкса предприемат различни тампони.

Събира се урина за микроскопско изследване в стерилен съд след внимателен тоалет на външните полови органи. За получаване на състава се използва утайката на урината.

микроскопско изследване подлага роден (нефиксирана, неоцветени) и оцветени препарати. В първия случай се разкрие живи микроорганизми в продукта "висящи капка" или "Спадът смачкани", като се оценява подвижност и морфологични характеристики на създателя им. Например, тъмно поле микроскопия на нативни препарати, използвани за диагностика spirochetosis (първична сифилис, лептоспироза, епидемия (vshinogo) пристъпно треска), кандидоза или други гъбични заболявания. В тези случаи, в резултат на микроскопско изследване дава основание да се постави диагноза.

Най-широко използваните микроорганизми в микроскопия оцветени състояние, по-специално за диагностика на паразитни болести (малария, амебиаза, ламблиаза, лейшманиоза, хелминтоза). За оцветители използвани за справка, специални и диференциращи методи. Приблизителен оцветяване ни позволява да се оцени цялостно морфологията на микроорганизма. За тази цел се използват стандартни багрила - фуксин или метиленово синьо.

Сред конкретните методи, използвани най-често оцветяване по Грам. Този метод показва способността на бактериите да запази багрило кристал виолет (или тинтява) или обезцвети в алкохол. Грам-положителни бактерии са оцветени пурпурни и Грам - в червено, тъй като обезцветяване в алкохол и допълнително оцветени червено. Оцветители на Грам позволява да се определи основната избор на средства за антибиотична терапия.

специални методи за боядисване включват Ziehl-Nielsen, който подчертава киселинно алкохол-пръчки, по-специално Mycobacterium туберкулоза, които са оцветени в червено, и останалите микроорганизми - в синьо.

разграничаване повикване методи оцветяване отделните елементи на бактериалната клетка. Например, оцветител metahromatinovyh (volyutinovyh) включвания в бактерии (като Neisseria, Mayer), оцветители капсули (Giessen Leyfsonu Anthony), спори, камшичета (по Leffler, Bailey, Грей и др.), Cell стена хроматин (ядрено) елементи (Romanowsky-Giemsa и Pekarsky).

Чрез микроскопски методи за разследване включват имунофлуоресценция (Флуоресцентна микроскопия) се използва за диагностициране на бактериални и вирусни инфекции, и се основава на използването на антитела, белязани с флуоресцентно багрило.

Ефективността на микроскопски метод се определя от неговата чувствителност и специфичност. Специфична ограничава възможно погрешно идентифициране на агент поради артефакти. В допълнение, по време на техниката за микроскопско изследване има стойност изследване е например в диагностициране на малария кръвни тестове чувствителността на метода на "дебел филм" 20-40 пъти по-високи, отколкото в проучването на тънка намазка защото това лекарство позволява да видите по-голям обем кръв, и в допълнение на плазмодий в продукта се намират извън клетката, за да се улесни тяхното откриване и количествено определяне.

Независимо от това, чувствителността на метода на "дебел филм", проведено от стандарти на СЗО (изучаването на най-малко 100 зрително поле в продължение на поне 5 минути), но все пак не трябва да надвишава 95%, поради неравномерното разпределение на кръвта на маларийни плазмодии, особено при ниски нива на parasitaemia.

Важен начин за подобряване на чувствителността на метода е използването на микробиологичните методи различни концентрации на патогени, като например утаяване или флотация на проби от изпражнения по време на изследването, и филтруване през филтър Millipore кръвни проби, урина, гръбначно-мозъчната течност.

Подобряване на ефективността на микроскопско изследване разкри улеснява количествено определяне на паразита в областта на оглед или единица обем на материала. По-специално, малария (особено когато откриване R.Gakpragit) важно определяне интензитет parasitaemia.

Количествено определяне на микрофлората в намазка, и идентифициране на микробни асоциации са важни при определяне, когато е необходимо етиологична роля условно патогенни микроорганизми. Известно е, че максималната откриваема концентрация на бактерии в намазка на нативния материал е 10  клетки в 1 мл. За повечето от материала се счита за значителен етиологично откриване опортюнистични бактерии определен вид в концентрация от най-малко 10 -10  клетки в 1 мл, така че чувствителността на микроскопски метод в повечето случаи задоволява нуждите на клиничната микробиология.

Yushchuk ND, Венгеров YY

Споделяне в социалните мрежи: