Методи за микроскопско изследване на микроорганизмите

Видео: микробиология. Получаване фиксирани препарати (Е. Zvonaryova)

Съдържание

Видео: микробиология. Получаване фиксирани препарати (Е. zvonaryova)
микроскопия с осветено поле
Darkfield микроскопия
Фазово-контрастен микроскоп
флуоресцентна микроскопия
електронна микроскопия

Най-малкият размер на микроорганизмите, са отговорни за използването на бактерии за изучаване на морфологията на прецизни оптични инструменти - микроскопи. Най-често използваният микроскопия с осветено поле, тъмно поле микроскопия, фазов контраст и флуоресцентна микроскопия. За специални микробиологични изследвания с използване на електронен микроскоп.

микроскопия с осветено поле

Bright поле микроскопия се провежда при използване на конвенционален светлинен микроскоп, основната част от които е лещата. На ръба на лещи Обозначена увеличение: 8, 10, 20, 40, 90.

В проучването на микроби, използвани потапяне система (леща). Immersion обектив се потапя в една капка от маслото от кедър, приложена към лекарството. Cedar масло има същото пречупване като стъклото, и това се постига чрез най-малките разпръсна светлинните лъчи (фиг. 1.12).

Фиг. 1.12. лъчи на курса в обектива на потапяне

Изображението, получено през призмата увеличава окуляр, състояща се от две лещи. В домашни микроскоп окуляри се използват с увеличаване на 7, 10, 15 (фиг. 1.13). Общото увеличение на микроскопа се определя от произведението на обектива, за да се повиши степента на увеличение на окуляра. В микробиология обикновено се използва за увеличаване на 900-1000 пъти. Качеството на микроскопа не зависи от степента на увеличение, но на неговата резолюция.

Фиг. 1.13. Схема на комплекс светлинен микроскоп за наблюдение при ярка област, коригирани за осветление Кьолер

С това ние трябва да разберем най-късото разстояние между две точки е препарат, в който те ясно се разграничават под микроскоп. Резолюцията на конвенционалните леки микроскопи с потапяне система е 0.2 микрона.

Darkfield микроскопия

Микроскопия в тъмно поле на видимост, се основава на следния принцип (фиг. 1.14). Лъчи осветяват обекта не е на дъното, а отстрани и не попадат в окото на наблюдателя: зрителното поле остава тъмна и обектът е осветен на неговия фон. Това се постига чрез специална хладник (параболоид) или конвенционален хладник, обхванати в центъра на кръга на черна хартия.

Фиг. 1.14. Шофиране микроскоп за наблюдение на тъмно поле.

Подготовката за Darkfield микроскопия се приготвят от типа на "висящи" и "смачкани" капка. При изготвянето на лекарство "смачкани" тест капка материал (бактериална култура, във физиологичен разтвор) се прилага върху предметно стъкло, която е покрита със стъклен капак. Капка материал запълва цялото пространство между капака и плъзгача за да се образува равномерен слой. За да се подготви "висящи" пада необходимо да се използват специални стъклени плочки с вдлъбнатина в чашите на центъра и да се обхванат.

В средата на покритие стъкло покритие изпитвания материал. Ръбовете на каналите на стъклото на слайд намазани с вазелин, и те покрит капак стъкло, така че намалението е против задълбочаването център. След обърнати препарат покривно нагоре. Darkfield микроскопия се използва за изследване на живите организми небоядисана.

Фазово-контрастен микроскоп

При преминаване на светлинния лъч през ахроматично обект само променя колебанията фаза на светлина вълна, която не се възприема от човешкото око. До изображението е контраста, е необходимо да се трансформират фазовата промяна в видима светлина амплитудата на вълната. Това се постига чрез фазово-контрастен хладник леща и фаза (фиг. 1.15).

Фиг. 1.15. Схема фаза контрастен микроскоп.

Фазово-контрастен кондензатор е конвенционален обектив с револвер и комплект от пръстеновидни диафрагми за всяка леща. А леща фаза е фаза плоча, която се получава чрез прилагане на редкоземни сол на лещата. Изображение пръстеновидна диафрагма пръстен съвпада с фазата на съответната цел плоча.

Фаза контрастна микроскопия значително подобрява контраста на обекта, и се използва за изучаване на родния препарати.

флуоресцентна микроскопия

Флуоресцентен микроскоп се основава на способността на някои вещества под влиянието на падащата светлина BEAMing от дължината на вълната, различна (обикновено по-висока) (флуоресцират). Такива вещества се наричат флуорохром (акридин жълт, родамин, и т.н.). Обект третира флуорохромът от ултравиолетовите лъчи получава ярък цвят на тъмно зрително поле.

Основната част на флуоресцентен микроскоп е осветител с ултравиолетова система цветен филтър към нея (фиг. 1.16) лампа и. Важно е да се използва не-флуоресцентен потапяне масло.
Флуоресцентна микроскопия се използва в практическата микробиология за да се посочи и идентификация на инфекциозни агенти.

Фиг. 1.16. Схематично представяне на флуоресцентен микроскоп: 1 - 2 дъга lampa- - Кварцов колектор 3 - кювета изпълнен с medi- сулфат разтвор на 4 - Front kollektora- 5 - UV филтър за 6-7 prizma- - плоча от уран stekla- 8 - очно филтър увлекателен
ултравиолетови лъчи.

електронна микроскопия

Разполага с оптични микроскопи ограничават твърде голяма дължина на вълната на видимата светлина (6000 A). Обектите, които са по-малки от тази стойност са извън разрешаването на светлинен микроскоп. В електронен микроскоп, вместо светлинни вълни използване електронни лъчи, които имат изключително малка дължина на вълната и висока резолюция (фиг. 1.17).

Фиг. 1.17. Схема трансмисионен електронен микроскоп.

Като източник на електрон греди електрон пистолет използва, основата е волфрамов проводник нагрява от електрически ток. Между волфрам и анод в пътя на електрони е електрическо поле с високо напрежение. Електронно-лъчево причинява сиянието на екрана с фосфоресциращ. Преминавайки през обекта, чиито части са с различни дебелини, електроните ще бъдат съответно забавени, което ще се прояви на частите на екрана потъмняване. Обект придобива контраст.

Формулировките приготвени за електронна микроскопия на най-добрите колоидни филмите се изследват след сушене обекти ( "нативни лекарства"), разпрашване с помощта на тежки метали, ултратънки части от метода на реплика, и др.

Електронна микроскопия може да открие най-малката структура, за да се получи увеличение до 200 000 или вижте обекти размер 0,002 микрона.

LV Тимошенко, MV Chubik

Споделяне в социалните мрежи:

сроден