Изследването на стволови клетки. Основните методи на изследванията на стволови клетки

Диференциацията на хематопоетични клетки

Видео: Shukhrat Mitalip, нашият учен в САЩ успешно клониран стволови клетки

Последната по дефиниция трябва притежават най-малко два основни свойства: способност за самостоятелно поднови, сравнима с живота на целия организъм, както и способността да се диференцират в по-зрели клетъчни елементи.

За дълго време, проблемът изследване стволови клетки носеше спекулативен. Експериментално изследване става възможно само след създаването на метод за клониране на хематопоетични клетки в далака на облъчени мишки.

Костния мозък клетки инжектирани смъртоносно облъчени мишки в малко количество, за да попаднат в различни кръвообразуващите органи, и по-специално в далака. Пролиферацията на хематопоетични клетки, въведени в него води до образуване на огнища (колонии) на хематопоезата, дискретно разположени на цялата далака и добре видими макроскопски под формата на възли, съдържащи 7-10 дни след трансплантацията няколко милиона на хематопоетични клетки.

Като цяло, 104 клетки трансплантация сингенни костен мозък образува един - три колонии. Това повдига ключова за всеки метод за клониране на въпроса дали колония се формира от хематопоетични клетки, или в създаването му са участвали клетъчна популация, компонент на трансплантирания населението. Резултати (до, McCulloch, 1961), че с увеличаване на броя на трансплантирани клетки линейно нараства броят на колониите. Този факт е сериозен аргумент в полза на клонова произхода на колониите.

Видео: TV Show Marina Astvatsaturyan "Медицина в контекст", тема: "стволови клетки"

Въпреки това, само факта на има линейна зависимост между броя на приложените клетки и броя на възникващите колонии, не е достатъчно, за да докаже произхода на клонови колонии. Всъщност, ако образуването на колония сътрудничат две или повече клетъчни типове, само един от които е ограничено в суспензията на хематопоетични клетки, и в този случай ще се наблюдава линейна зависимост между броя на инжектираните клетки и броя на възникващите колонии.

Клонираните характер на колониите в далака се доказва чрез метода на радиация маркери (Becker напр. с., 1963). За тази цел, мишките се облъчва при доза от 250 рад, те бяха трансплантирани голяма доза сингенни костния мозък и след това се облъчва с втора доза от 650 рад. При тези условия, за поставяне на мишката върху получателите са получили обща доза от 900 рада, която е почти напълно инактивира собствените образуващи колонии клетки, докато трансплантираните клетки получават по-малко доза облъчване (650 рада) и някои от тях са оцелели.

В същото време голям вероятност че облъчване при тази доза клетка въпреки оцелява, но носи всяка стабилна хромозомни аберации (хромозома маркер), което позволява да го и неговите потомци идентифицират. Karyological анализ показва, че повечето от колониите разгледани в която откриваем маркер хромозомата, същото аберация извършва всички делящи се клетки от тази колония. Тъй като независима поява на същия аберация дори само в две клетки е статистически много малко вероятно тези факти показват, че колонията (или поне повечето от тях) са потомци на колония клонинг клетки. Така колония произведен източник клетки (образуващи колония единица в selezenke- КОЕ).