Onkologiya-

KP Hanson

Институт по онкология. проф. NN Петров, Министерство на здравеопазването, Санкт Петербург

източник RosOncoWeb.Ru

Oncogene ERBB2 (HER2 / Neu) е на второ място след supressornogogena р53 на броя на публикации, посветени на индивидуалните geneticheskomuelementu. Подобна ситуация е разбираемо, тъй като ERBB2 ген yavlyaetsyaidealnym например за доказване на успеха Molecular онкология в разбирането на основните механизми на рак, и vrazrabotke принципно нови диагностични методи onkologicheskihzabolevany и накрая намери патогенетична podhodovk туморна терапия. От съществено значение е, че prakticheskoeprimenenie познаване на онкогенни опасенията ERBB2 onkologicheskogozabolevaniya най-често при жените - рак на гърдата (Британска Колумбия) (Imyanitov Князев, 1991- Ю, Hung, 2000).

Gene ERBB2 (HER2 / Neu) е клетъчен хомолог на V-егЬВ onkogenavirusa eritroblastomy птици. Нейният размер е 4,5 кб иРНК кодирана информация в него за синтез на протеин р185 (1225 аминокиселини) .Тази протеин има 44% хомология с рецептора на epidermalnogofaktora растеж (EGF) (Coussens и сътр., 1985). Широка izvestnostgen ERBB2 придобит след публикуването, което се инсталира само на факта на неговото активиране на тумори на гърдата, Noi аргументи в полза асоциация на ERBB2 усилване splohim прогноза (Slamon и др., 1987). Blagodaryadannoy и редица други публикации, клинични изследвания aspektovaktivatsii ERBB2 включително много научни групи, с хиляди пациенти подложени etomtestirovaniyu (Piccart и сътр., 2000) .В нашата лаборатория е в състояние да докаже osnovnyezakonomernosti активиран ERBB2 ген в човешки тумори, kotoryi допълнително потвърдена при сборен анализ mezhlaboratornyhdannyh (Imyanitov, Prince, 1991 Imyanitov и сътр., 1992- Imyanitovet др., 1992, 1993 Knyazev и сътр., 1992).

В момента, основният фокус на изследователи sosredotochenona клинично приложение на моноклонални антитела (моноклонални антитела), за да genuERBB2 (Herceptin) и търсенето на нови перспективни средства vozdeystviyana патологичната му активиране основно при рак на гърдата (Baselga, 2001- Ю, Hung, 2000).

Молекулните механизми на активиране на ген егЬВ2

ERBB2 е член на семейството на тирозин киназа рецептори ERBB състоящи се от четири функционално взаимосвързани retseptornyhmolekul, които играят важна роля в клетъчната пролиферация, диференциация и апоптоза. Това семейство включва растеж epidermalnyyfaktor (EGF или ErbB1), ERBB-2, ERBB-3 и ERBB-4. Съгласно deystviemligandov ERBB2 образува хетеродимери с други рецептори dannogosemeystva че очевидно има мощен усилвател effektomna работни съответните сигнални пътища (Harari, Yarden, 2000).

ERBB2 Ефект може драстично да се увеличи, когато gena.Superekspressiya ERBB2 свръхекспресия повишава клетъчната туморогенност в kulturevsledstvie спонтанни фосфорилиране хетеродимери obrazuemyhretseptorami и включващи съответните сигнални пътища, като например PI3K и МАРК (Harari, Yarden, 2000). Обикновено сигнали от рецепторите са бързо инактивирани поради dissotsiatsiiligand-рецепторни комплекси и разграждане в лизозоми. Odnakoeti защитни механизми не успяват при superekspressiiERBB2 (Klapper и сътр., 2000). Специално място в иницииране и signalovprinadlezhit ErbB3, както Тази киназа-дефектен aktivnostiretseptor широко представени в повечето епителни клетки, и ко-експресия с ERBB2 има силно transformiruyuschimpotentsialom.

Установено, че онкопротеин ERBB-2 свръхекспресиран в 20-30% от тумори на гърдата, и в случай на интрадуктален (неинвазивни) форми на рак на гърдата, тази стойност достига 90% (Slamon и др., 1987 г. Придобита Knyazevet др., 1992- Imyanitov и др., 1993). Установено е, че лиганд-zavisimoyaktivatsii ERBB2 важната роля също принадлежи към други semeystvaetih членовете рецептори. Оказа се, че ERBB-1 е в състояние obratnoykorrelyatsii с нивото на естроген-рецептор (ER) и assotsiirovans неблагоприятна курс на рак на гърдата (Harari, Yarden, 1999). В otnosheniisuperekspressii ERBB-3 и ERBB-4, са получени противоречиви резултати, въпреки че определена тенденция към маркирани korrelyatsiis положителни тумори и ER-големи статус (Srinivasan и сътр., 2000).

Един важен аспект на ERBB2-рецепторни клетки действие е ihsposobnost даде независимост от faktorovrosta собственост. И накрая, ние трябва да се подчертае връзката между superekspressieyERBB2 и нивото на циклин D-тип клетка. Нетипично superekspressiyatsiklinov D-тип (D1, D2 и D3) активира CDK4 и CDK6, vklyuchaetkletochny цикъл и насърчава туморогенно превръщане на клетки (Harari, Yarden, 2000).

Симптоматичен значение на активиране ERBB-2 онкопротеин

Въпреки наличието на противоречия в първата честота rezultatahopredeleniya ERBB2 усилването, към днешна дата etisvedeniya са доста герой (Piccart и др., 2000). Както бе споменато по-горе, ERBB2 онкоген активиране nablyudaetsyaprimerno в 20-30% от рак на гърдата. Трудно е случаят с оценката на нивото на ERBB2 ген ekspressiiprodukta - р185 протеин. Първо, обширни проучвания chislosootvetstvuyuschih извършени чрез имунохистохимия, който е полу-количествен в природата. Zachastuyupredstavlyaetsya доста трудно да се направи разграничение между ген patologicheskoyaktivatsiey (рязко увеличаване на неговата експресия) и "физиологически"ERBB2 протеинови количества. На второ място, най-immunogistohimicheskihrabot извършва на архивно патологично srezah- въпреки че теоретично такъв материал е идеална мишена проучвания dlyaretrospektivnyh, използването на парафин blokovsopryazheno с допълнителни технически трудности като мишена kakdegradatsiya антигенни поради неправилна konservatsiiobraztsov, различна чувствителност на различните антитела, и т.н. На трето място, в началото на строителните работи не винаги правят разлика между мембраната и tsitoplazmaticheskimokrashivaniem ERBB2- явно клинично значение predstavlyaettolko рецепторен протеин форма (ван де Vijver, 2001). Като цяло, внимателно проведени изследвания показват високи urovenkonkordantnosti между ERBB2 генна амплификация и остър uvelicheniemkolichestva мембрана р185 продукт.

По-голямата част от учените са съгласни, че aktivatsiyaonkogena ERBB2 е свързано с лоша прогноза. Често, ролята на щетите изглежда ERBB2-медиирана, така kakamplifikatsiya и свръхекспресия на този ген е свързан с "класически"прогностични параметри, като края на заболяване етап, метастази в лимфните възли differentsirovkiopuholi ниско ниво, висок митотичен индекс, анеуплоидни, otsutstvieestrogenovyh рецептори и т.н. Въпреки това, много ukazyvayuttakzhe работа сами по себе си, независимо от други фактори prognosticheskoeznachenie активира ERBB2. Същественото че като zakonomernostispravedlivy и руски пациенти: по-специално, нашата sobstvennyeraboty показва силна корелация между амплификация на ERBB2 повторната поява на рак на гърдата карамел (Imyanitov сътр, 1992- Imyanitov и др, 1993).

Трябва да се подчертае, че въпреки че самият факт, прогностична znachimostigena ERBB2 и други молекулярни маркери за да nastoyaschemumomentu никакво съмнение, при избора на стратегия лечение reshayuscheeznachenie е даден след като всички традиционни маркери на прогноза. Така заболяване, информация за състоянието на ERBB2 може да участва само в zatrudnitelnyhsluchayah и се разглежда като допълнителен. По-специално, изследването привлечени bolshoevnimanie специален значение ERBB2pri началото (особено не-метастатични) форми на рак на гърдата. Те откриват, че данните за активиране на ERBB2 ген могат да показват neobhodimostiintensifitsirovat постоперативно наблюдение, и може би modifitsirovatskhemu лечение. Още по-интересен е въпросът на ERBB2 amplifikatsiigena неинвазивна форма на рак на гърдата. Разкри, че aktivatsiyaERBB2 корелира с неблагоприятни характеристики на рак на гърдата в място, по-специално с комедони тип и ниска степен differentsirovki.Odnako, все още остава неясно дали асоцииране съществува mezhduamplifikatsiey ERBB2 и риска от дегенерация на карцином ин ситу форма на рак на гърдата vinvazivnuyu, т.е. дали да се вземе предвид състоянието на обем ERBB2 privybore хирургия.

Друг важен аспект на проблема - prognozirovanieeffektivnosti тумор терапия се основава на оценката на ERBB2-statusa.Dannoy тема обект на множество изследвания, rezultatykotoryh праволинеен. Въпреки това, основният извод, че svoditsyak с високо тумор на млечната жлеза ERBB2-retseptoraokazyvayutsya по-устойчиви на всички видове protivoopuholevyhvozdeystvy (химио- и лъчетерапия gomono-) (Mass, 2000).

Техники за определяне на ERBB2

Той е разработил няколко техники за инструктаж оцени ERBB2 statusaopuholey, сред които има техники, подходящи само dlyaissledovatelskih цели, както и тези, които са били използвани ежедневно клиничната практика (ван де Vijver, 2001). В kachestvemolekulyarnyh цели в различни случаи на ДНК, РНК, протеини iliretseptornye. Може ли да се счита за общоприето, че най-приложими в situgibridizatsiya флуоресцентно (FISH) за otsenkiamplifikatsii ERBB2 ген. Въпреки това, не всички практически laboratoriiispolzuyut риба, главно поради неговата сложност и dlitelnostivypolneniya. Sauzern- и Northern блот и различни изпълнения polimeraznoytsepnoy реакция, които служат за насочване на ДНК и РНК primenyayutpreimuschestvenno за изследователски цели (Даусет и сътр., 2000).

На практика досега доминиращата prinadlezhitimmunogistohimicheskomu (IHC), определящи ERBB2. Това metodikadostatochno специфично, бързо и лесно осъществимо, и е на разположение за по-голямата част от лаборатории. Тъй като чувствителността IHC zavisitot моноклонално антитяло се използва, се препоръчва да се работи със стандартна naboramiantitel, в частност компанията HercepTestTM "DAKO" (Еспиноза, Anguiano, 1999). Възможно е, обаче, че автоматизацията Fishi сближаване PCR процедури към практическите проблеми могат да izmenitsituatsiyu, и тези техники ще замени по-малко специфично ОНС.

ERBB2 - мишена противоракова терапия

ERBB2 рецептор-се превърна през последните години, основната таргетна молекула, която има за цел да търсят нови модерни методи за лечение на редица начини RMZh.Izvesten специфично потискане на ERBB2 активност първо място сред тях със сигурност принадлежи към МКС ekstrakletochnomudomenu рецепторен протеин (Ю, Hung, 2000). Първоначално byloustanovleno че миши моноклонално антитяло 4D5 Способността да инхибират растежа kletokRMZh с повишена експресия на ERBB2. Въпреки myshinyhMKA имуногенност ограничава тяхната клинична употреба (Baselga, 2001). Poetomumyshinye моноклонално антитяло 4D5 се подлага на процедурата на така наречените хуманизация, т.е. soediniliih области, определящи комплементарността за ERBB2 рецептор SG1-човешки имуноглобулин. Получената моноклонално антитяло появи vysokoeffektivnymsredstvom потискане на растежа на туморни клетки и придобити shirokuyuizvestnost наречен лекарство Herceptin (трастузумаб). Oniproshli подробни предклинични и клинични изпитвания и при лечението на метастатичен uspeshnoispolzuyutsya ERBB2-позитивен рак на гърдата (Baselga, 2001). Herceptin има ясно изразен условия protivoopuholevoyaktivnostyu в монотерапия или в комбинация с izvestnymihimiopreparatami (таксани, антрациклинови антибиотици iproizvodnymi платина).

Много по-малко се знае до момента и други подходи към modifikatsiiekspressii ERBB2. По този начин, например, е доказано vozmozhnostinaktivatsii ERBB2 ген на транскрипционно ниво чрез adenovirusnogobelka Е1А. Този протеин инхибира растежа на експериментално и metastazirovanieopuholey характеризира с свръхекспресия ERBB2. Тя pokazaltakzhe тяхната ефективност във фаза I на клинични изпитвания (Ю, Hung, 2000).

Свръхекспресия на ERBB2 неизбежно се комбинира с високи urovnemaktivnosti съответните тирозин киназа. Следователно dannogofermenta инхибитори могат да притежават антитуморна активност че nashlopolnoe потвърдено в проведените тестове. Най podrobnoizuchen тирозин киназа инхибитор ERBB2-Емодин потискане fosforiliruyuschuyuaktivnost ензим и туморния растеж (Zhang и сътр., 1995).

Описани успешни опити да потискат ERBB2-рецептор pomoschyugennyh структури, кодиращи вътреклетъчния анти-ЕгЬВ2 odnospiralnyeantitela (Ю, Hung, 2000). Подобни ефекти са takzhegeneticheski инженерство анти-ЕгЬВ2 миметичен пептид.

Инхибиторен ефект на ERBB2 свръхекспресия obladayutproizvodnye ретиноева киселина рецептор, особено в комбинация с himiopreparatami.V наскоро привлече вниманието създаване на ваксини срещу тумори proyavlyayuscheyaktivnost свръхекспресиращи ERBB2 (Murrayet др., 2000). Чрез използване на протеин и ДНК ваксини управлява dostichingibirovaniya ERBB2 свръхекспресия и гърдата потискане на растежа spontannyhopuholey в мишки.

Накрая, специфично блокиране на генна транскрипция на ERBB2 vozmozhnodostich използване на антисенс олигонуклеотид (AO) (Ро и сътр., 2000). Свързването на SA до допълваща иРНК води до неговата деградация, като следствие, синтез блокиране ERBB2 рецептор. Предполага се, че АД може да бъде по-ефективни инхибитори на ERBB2.

Така че, постигнато до този момент разбиране biologicheskoyroli ERBB2 в нормална физиология и в туморните клетки rostestalo от ключово значение за един рационален избор на терапевтични стратегии, основани на специфичните ефекти върху подходяща metabolicheskieputi. Терапия на тумори намерено ново качество поради vnedreniemtumorspetsificheskih антитела, насочени срещу ERBB2. Naryadus те се предлагат и много други нови противотуморни средства, сред които са инхибитори на тирозин киназната активност на свързване лиганд и транскрипционни блокери на. Vedetsyaintensivny търсене на други средства за влияние върху различни zvenyasignalnyh каскади, свързани с ERBB2. Въпреки sereznyeuspehi да използва постиженията на фундаменталната наука в klinicheskoypraktike, все още има много неясноти funktsionirovaniyaERBB2, която не позволява един за оценка на нейната diagnosticheskoei и взаимоотношения с хормонални сигнали прогностична стойност.

Освен това, нашите познания за молекулно характер vzaimodeystviymezhdu растежни фактори и рецептори като ERBB2 nedostatochny.Eto предотвратява търсене специфични антагонисти данни молекули, които могат да имат анти-туморна активност. Очевидно е, че жизнените функции на клетките, включително и на епитела, nahoditsyapod контролират не една, а много системи за сигнализация. Vyyasnenievzaimodeystvy между ERBB2 протеин и G1-протеин рецептори, рецептори на цитокини, адхезионни молекули и т.н. novyegorizonty отвори както за фундаментални изследвания и за poiskanovyh помощта на противотуморното лечение.

Остава неясно и някои аспекти deystviyaanti-егЬВ2 механизъм антитела, в частност способността им да се подобри kardiotoksichnosthimiopreparatov. Може би тайната ще бъде решен, kogdastanet ясно като егЬВ2 рецептори засягат апоптоза. Nesomnennoodno: по-трудните практическите задачи, които си поставяме за себе си, възникват повече въпроси, генерирани vzaimoproniknoveniemfundamentalnyh и клинични проучвания.

Литература:

1. Imyanitov EN Князев PG Oncogene активиране ERBB-2 онкопротеин prognoztecheniya и рак на гърдата при хора // проблеми. Oncol. - 1991.- Т. 37? 5 - С 527-534.

2. Imyanitov EN, Черница OI Иванова ОА др Amplifikatsiyaonkogena ERBB-2 (/ Ной-2 HER) в тумори на млечната жлеза -. prognosticheskiymarker вероятност за рецидив // Exper. Oncol. - 1992 - Т. 14,? 4. - С 25-29.

3. Baselga J. Клинични проучвания на Herceptin (трастузумаб) // Eur.J. Рак. - 2001 - Vol. 37, Suppl 1 - П. S18 - S24.

4. Coussens L., Yang-Feng T.L., Liao Y.-C. и др. Тирозин kinasereceptor с богат хомология с EGF рецепторни акция chromosomallocation с Neu онкогенен // науката. - 1985 - Vol. 230. - P.1132 - 1139.

5. Даусет М., Cooke Т., Ellis I. et. Ал. Оценка на HER2status при рак на гърдата: защо, кога и как? // Eur. J. Cancer.- 2000 - Vol. 36. - стр 170-176.

6. Espinoza F., Anguiano А. HercepTest анализ: друга гледна точка // J. Clin. Oncol. - 1999 - Vol. 17. - П. 2293-2294.

7. Harari D, Yarden Y. Molecular механизми в основата ErbB2 / HER2action при рак на гърдата // Oncogene. - 2000 - Vol. 19. - П. 6102- 6114.

8. Imyanitov E.N., Черница O.I., Serova O.M., Knyazev P.G.Rare възникване на амплификация на HER-2 (егЬВ-2 / пеи) oncogenein пациенти с рак на яйчниците // Eur. J. Cancer. - 1992 - Vol. 28A.- P. 1300.

9. Imyanitov E.N., Черница O.I., Serova O.M. и др. Amplificationof HER-2 онкоген (егЬВ-2 / пеи) като най-значителен prognosticfactor в група от пациенти с рак на гърдата руски // Neoplasma.- 1993 - В. 40. - П. 35-39.

10. Klapper L.N., Waterman Н., Sela М., J. Yarden тумор inhibitoryantibodies на HER-2 / ErbB-2 може да действа чрез набиране на с-Cbl и enhancingubiquitination на HER-2 // Cancer Res. - 2000 - Vol. 60. - P.3384 - 3388.

11. Knyazev P.G., Imyanitov E.N., Черница O.I. и др. Amplificationof ERBB-2 (HER-2 / NEU) онкоген в различни неоплазми на patientsfrom СССР // онкология. - 1992 - Vol. 49. - стр 162-165.

12. Мас R. Ролята на HER-2 експресията в предсказване responseto терапия при рак на гърдата // Semin. Oncol. - 2000 - Vol. 27, Suppl 11. - П. 46-52.

13. Мъри JL, Przepiorka D, Ioannides CG. Клинични проучвания ofHER-2 / пеи-специфични ваксини // Semin. Oncol. - 2000 - Vol. 27, Suppl 11. - П. 71-75.

14. Piccart М. J., Ди Лео А., Хамилтън А. HER2: а `predictivefactor` готов за употреба в ежедневното управление на cancerpatients на гърдата? // Eur. J. Cancer. - 2000 - Vol. 36. - П. 1755-1761.

15. Ро H., Пипин J.A., Green D.W. и др. HER2 / Neu antisensetargeting на карцином на гърдата при човек // Oncogene. - 2000 г. - vol.19. - на стр 6138-6143.

16. Slamon D.J., Glarn G.M., Wong S.G. и др. рак на гърдата при човек: корелация на рецидив и оцеляване с усилване на theHER-2 / Neu онкогенен // науката. - 1987 - Vol. 235. - П. 177 -182.

17. Srinivasan R., Gillett C.E., Barnes D.M., Гилик W.J. Nuclearexpression на с-егЬВ-4 / HER-4 рецептор на растежен фактор в invasivebreast рак // Cancer Res. - 2000 - Vol. 60. - П. 1483-1487.

18. ван де Vijver M.J. Оценка на необходимостта и appropriatemethod за тестване за човешки епидермален растежен фактор рецептор-2 (HER2) // Eur. J. Cancer. - 2001 - Vol. 37, Suppl 1 - П. S11- S17.

19. Yu D., Hung М.С. Свръхекспресия на ЕгЬВ2 в рак и ErbB2-targetingstrategies // Oncogene. - 2000 - Vol. 19. - П. 6115-6121.

20. Zhang L., Chang C.J., Bacus S.S., Hung М.С. Потиснати transformationand индуцирана диференциация на HER-2 / пеи-свръхекспресиращи клетки рак на гърдата от Емодин // Cancer Res. - 1995 - Vol. 55. - P.3890 - 3896.