Превод на иРНК. Характеристики на иРНК превод по синтеза на антитялото

биологична активност иРНК, изолирана препарати

За транслацията на иРНК Свободните от клетки системи използват три вида Кребс асцит хематом (Swan д а, 1972- Шехтер, 1973 ..). заешки ретикулоцитни (Stavnezer, Huang, 1971 Mach напр. с., 1973 Cowan напр. с., 1976) и пшеница разсад (Schechter, Burstein, 1976 г. Storb, Марвин, 1976). Най-удобният, както изглежда, е последната система. Добивът на белязаното прекурсор в него е 0,1 пикомола или 2.6 нг до 0,007 единици въведени A2vo иРНК (Schechter, Burstein, 1976).

Тъй като на този етап предизвикателство описан изследване е да проучи потенциал транслационно способността на иРНК, и свободна от клетки система растителен и животински по принцип се държат в това отношение същия (Schechter, Burstein, 1976), степента на годност и предимства на система очевидно зависи от следните три параметри: размер на ендогенен протеин синтез (по-ниска по-добре), наличието и простотата на необходимите съставки и количеството на иРНК, които трябва да бъдат направени в системата за получаване на надеждна изследва слят протеин.

Видео: Broadcast процес за пластмаса обмен

аналог с безклетъчна система понякога послужи като жабешки яйцеклетки. Показано е (Smith напр. A., 1973), че въвеждането в ооцити на веригите на иРНК, кодираща имуноглобулин., Води до синтеза на тези вериги. Този метод, обаче, е по-сложно и изисква значителни количества иРНК.

Видео: Лекция 3. транскрипция, транслация

Повечето експерименти извършва чрез предаването с тРНК, която кодира синтезата на L-верига (L-иРНК), тъй като отделянето им е много по-лесно от изолиране на иРНК, кодираща синтеза на H-вериги (Н-иРНК). Обучението транслационни продукти на иРНК, кодираща миеломни имуноглобулини на L-верига е довело до неочакван резултат. Установено е, че иРНК в свободни от клетки системи кодират полипептиди синтез (прекурсор) по-голям размер от зрелия L-верига. Образуване на първата тежка продукт под действието на 41 клетки 13S иРНК плазмоцитоми МОРС описани Swann сътр (Swan Д а, 1972.), Под действието на 10-14S иРНК от клетките плазмоцитоми МОРС 21 -. Milstein et Al (Milstein и F,. 1972). Молекулното тегло на получения продукт е по-голямо от молекулното тегло на съответните L-вериги (1500), от което се заключава, че тя съдържа 15 допълнителни аминокиселинни остатъци.

като когато се добавя към свободен клетъчна система 355-формил-тРНК като единствен източник тагове 355-метионил открива в тежка компонент, беше заключено, че поне част от тези допълнителни аминокиселини, разположени в NH2-koitse молекула L-верига (в еукариоти синтез на полипептидни вериги започва с включване метионин) , По-късно синтез прекурсор данни са потвърдени при експерименти с иРНК ", кодираща синтеза XL-вериги МОРС 70E (Toncgawa, Baldi, 1973), MPC" (Storb, Марвин, 1976), МОРС 41 (Mach д, 1973), МОРС 321 ( Schechter, Burstein, 1976), МОРС 63 (Schechter напр. с., 1976) и L вериги МОРС 104Е (Burstein напр. с., 1976).