Синтез на имуноглобулин с тежка и лека верига. Uniform синтез на тежки и леки вериги на антителата

Специално проучване на тези въпроси е извършвал експерименти с клетки лимфни възли на имунизирани зайците (Fleischman, 1967) и миши миеломни клетки (Knopf напр. A., 1967), импулсно белязани аминокиселина маркер. След различни периоди от инкубиране на клетки с 3H-левцин са изолирани Н верига, се смила в фрагменти (в случая на цианоген бромид-заешки имуноглобулин с папаин или в случай на миелом имуноглобулин) и радиоактивността се определя чрез съотношението на тези фрагменти.

Показано е, че съотношението на радиоактивността NH2-краен фрагмент (Fd) и СООН-терминален фрагмент (Fc), е относително ниска в 1-2-та минута, се увеличава до 80% на 8 минути. Подобни резултати са получени при сравняване на активността NH2- и СООН-крайни пептиди на заешко Н вериги. Наблюдаваната разпределението на етикет импулс в молекулата синтеза на Н верига съответства на поемането на един от отправна точка.

В този случай, на първо място трябва да бъдат етикетирани dostraivalos верига порции, т. е. пептиди СООН kontsa- постепенно радиоактивност NH2- и СООН-крайни пептиди да бъдат приведени в съответствие, както е установено в експерименти.

Данните в подкрепа на хипотезата синтеза на всяка верига като цяло са получени при изследвания и други методи на синтез на Н и L вериги в система без клетки (Vassalli напр. а., 1971). [Трябва да се отбележи, че този извод не е сигурно. По този начин, наблюдавано неравномерното разпределение на етикета може да се обясни като се приеме, че клетката има малък басейн на V-област СООН-краен участък на който бързо се свързва с NH2-край, свързани с polyribosomes С област.

Такава възможност е, по-специално, Тя течеше от Шуберт и Cohn експериментии който намери в миеломни клетки половини Синтез на L-вериги (Schubert, Cohn, 1970). Въпреки това, данните за извънредно лекотата на хидролиза на L-веригата под влиянието на протеолитични ензими (Соломон, McLaughlin, 1969) и дори в присъствието на слаби киселини (Fraser напр. A., 1972) показват, че наблюдаваното а разпад L-вериги в тези експерименти от неговия синтез на двете половини].

През последните години, на изхода започване на синтеза на Н и L вериги от една точка се потвърждава от редица косвени данни. Те включват откриване на кръв в урината и миеломни пациенти с "дефектни" Н вериги консерванти само 17-18 HN2-терминал, но над 200 СООН-крайни аминокиселини (Frangione, 1976). По този начин, в тези схеми 100 остатъка липсват VH област на 100 остатъци и S-област. Това е невероятно, че двете делеции настъпили преди комбиниране V- и С-гени, кодиращи Н-веригата, във всеки един от тях независимо.
Следователно, наличието на такива "дефектен'H-вериги потвърждава предположението за техния синтез като цяло от една отправна точка.

Следващият аргумент е откриване на иницииращия метионин само в NH2-края на прекурсорни L-вериги (Schechter, Burstein, 1976) и в отсъствието на метионило остатъци 107-109 позиции L-вериги (Wu, Kabat, 1970).

И накрая, данните могат да доведат до потвърждение на тази гледна точка, от размера на тРНК, кодираща синтеза на Н и L вериги, получени през последните години, присъствието на тези иРНК в нуклеотиди, съответстващи на аминокиселинните последователности като V-, и С-региони на Н и L вериги, както и възможността за изолиране на кодираща иРНК L-верига от polyribosomes антитяло специфично утаява както V-, и към с-домени (Schechter, 1974b).