Плазмените мишки тумори. Polyribosomes роля в биосинтезата на имуноглобулини

1. плазмоцитом много по-хомогенна в състава си, съответно, и протеини, произведени от тях са по-хомогенни от нормални имуноглобулини или антитела. Трябва да се отбележи, че идеята за хомогенността на клетките на миелома не се нуждаят от абсолютно. В действителност, всеки плазмоцитома (както и всеки клетъчен клонинг) е колекция от клетки на различни етапи на диференциация, и изпълняват различни функции. Очевидно е, че и техните творби не са същите.

Например, имуноглобулините могат да бъдат открити само в 50% от клетките плазмоцитом H5563 (Рифкинд напр. A., 1962). Antiidiotypic серум към протеина МОРС 315 управлява утаяване не повече от 50% от имуноглобулин, секретиран от клетки (Sirisinha, Eisen, 1971). Човешките моноклонални макроглобулин компоненти установени различия в първичната структура на Н и L вериги (Hannestad, Sletten, 1971). Накрая, наскоро открити фенотипни промени миеломни протеини (Хаусман, Rosma, 1975).

2. Независимо от факта, че относителен имуноглобулин синтез в миеломни клетки не е по-голяма от тази, в далака, и по-специално в лимфните възли на имунизираното животно (Becker напр. с., 1970) трансплантиран миелом позволява да се получи много по-големи количества материал за анализ (тегло на тумора трансплантират под кожата на мишки може да достигне до 1 / 3 от теглото на животното, докато теглото на слезката не надвишава 0,2 гр).

3. И накрая, в редица случаи в клетките плазмоцитоми нуклеазна активност е по-ниска, отколкото в далак или лимфни възли на имунизирани животни, и някои от тях дори очевидно съдържа RNase инхибитор, който е известен предимства при фракционирани клетки и ги изолира от polyribosomes. Всичко това прави основен предмет плазмоцитом в изучаването на механизмите на синтез и монтаж на полипептидните вериги на имуноглобулини.

Polyribosomes роля в биосинтезата на имуноглобулини

изследване биосинтеза на имуноглобулини Той започна с обяснение на ролята на отделните субклетъчни фракции в този процес. Подробна история на проблема е ние обхванати по-рано (Сидоров, 1974), така че сега ние само накратко върху основните резултати, получени тук.

В средата на 60-те години на имунохистохимия и проучвания електрон микроскопия показва, че клетките, произвеждащи активно имуноглобулини (включително антитяло) е силно развита ендоплазмения ретикулум и рибозоми съдържат клъстери (до 18-25 всеки). Наличието на имуноглобулини в микрозоми лимфни възли на имунизирани животни и миеломни клетки се потвърждава и от експерименти върху директно тъкан фракциониране (Svvenson, Kern, 1967a).

Въпреки това, polyribosomes Гвоздеят на лимфоидни клетки и да се демонстрира способността си да синтезира антитела ин витро при неуспешен за доста дълго време.

А сериозно изследване на механизмите синтез имуноглобулин стана възможно само след получаване на родния polyribosomes техника е разработена. Основните усилия в този случай, насочени към намаляване на разграждане polyribosomes от ендогенен RNAse.

В някои случаи, успял драстично намаляване на неговото въздействие поради изключително меките тъкани условия хомогенизация, които не предизвикват разрушаване и освобождаване на лизозомни ензими в хомогената (Becker, Rich, 1966). Въпреки това, в повечето случаи действието на РНК-аза се опитват да забавят добавяне на инхибитори. Последното включва цитоплазмени екстракти на чернодробните клетки, или HeLa, polysulfates и сорбенти - (. Виж Сидоров, 1974) makaloid и бентонит. През последните години, като инхибитор на RNase все повече се използва хепарин (Schechter, 1974a, б).

оптимално постигнатите резултати комбинация от меки условия разрушаване на тъканите с добавяне на инхибитори и възможно най-бързо извършване на фракциониране хомогенат при 0 ° С