Гените, синтезиращи антитяло. Броят на гени, участващи в синтеза на имуноглобулини

първични изследвания структура и генетика имуноглобулини Това води до заключението, че всеки nolipeptidnaya верига се кодира от поне два гена: V-ген, отговорен за променлив регион и С-gepami отговорен за постоянни региони на молекули. Броят на двата гена в генома на клетките е от основно значение. Фактът, че наблюдаваната разнообразието на антитела от различни автори обяснено или по отношение на "зародиши" теория на гени, съгласно който в генома на набор от гени за всички известни V-области, т.е.. Е. Много хиляди V-ген, или от гледна точка на теорията на соматична мутация при което набор от V-гени в генома е ограничено, и различни структури на имуноглобулини (антитела) се появява в резултат на соматична мутация. Налице е също така компромис гледна точка. Всички тези идеи подробно обсъдени, за да се превърне в лидер и съавтори (Leder д. А., 1974), така че по-подробно ние няма да ги спре.

Забележете, че е направена AE Gurvitch и R. S. Nezlin (1965) оригинален предположение че отделните секции на генома кодират антителата и активни центрове и че L-II- и ДИ "събира" на по-малки, независимо синтезирани вериги. Това е изключително интересно, че след пет години, тези идеи отново изплува под формата на хипотезата за "изпълнение" ( «вмъкване») кодирана информация от полинуклеотиди на малките (около 30-45 нуклеотиди), като се гарантира наличието на CDR, в часа и L-вериги (на Wu, Kabat, 1970).

окончателен отговорът на тези въпроси, Очевидно е, че може да предостави само директно определяне на V-и С-гени в генома. Изолиране на тРНК препарати с висока степен на чистота съответното оставя начални експерименти. Подходът разработен от няколко години, е да се определи броят на гени от РНК-ДНК хибридизация. Тъй като структурата на иРНК транскрибира структура напълно комплементарна ДНК част, то този метод може да се определи броят на гени и да се определи дали тяхното усилване се появява (размножаването) за индуциране на синтеза на имуноглобулин.

В момента, научните изследвания този вид се извършва с иРНК-, кодираща синтеза на L-вериги като достатъчно чисти препарати от N-иРНК, все още не е получено. Съществено условие за извършването на тези експерименти е, на първо място, чистотата на получаването на иРНК и висока специфична активност и, от друга страна, наличието на много голям излишък на ДНК. Вземи vysokomechenye иРНК наркотици е трудно. Обикновено това се прави с помощта на иРНК, изолирана NT клетки, култивирани в присъствието на високи дози или 32Р-3H- predshsstvennikov или повече - иРНК маркирани с 125I ин витро (Farace д, 1976 г. Matthyssens Д а, 1976 ....). Налице е също така косвено версия на метода. Състои се с това, че първият от обратната транскриптаза на РНК получава матрица vysokomechenuyu комплементарна ДНК (кДНК), и вече се използва за хибридизация на клетъчната ДНК (Schechter напр. A., 1976 г. Storb напр. A., 1976).

Пречистеният тРНК или сДНК хибридизира с денатурирани определени условия (обработване с ултразвук) или ДНК от черния дроб на миши миеломни клетки NS и процентът на свързания РНК (или сДНК) като функция на времето за хибридизация. (Определянето се основава върху стабилността на хибриди на RNase ефект.) При тези условия, процентът на хибридизира РНК (сДНК) (е) зависи от концентрацията на РНК (сДНК) (Ro), ДНК концентрация (С) и инкубационни времена (е). С много голям излишък на ДНК не зависи е R0, и зависи само от С "и т (Cot). Cot количеството, при което хибридизация е 50%, очевидно зависи от степента на комплементарност на ДНК и РНК (сДНК).

степен на хомология на две иРНК (И следователно тяхното V- или S-ген) се определя в конкурентни експерименти за инхибиране на хибридизация на белязан подготовка иРНК небелязани лекарства хомоложен и хетероложен иРНК, или чрез изолиране на ДНК от образуваната хибрид, и хибридизация с други белязани хомоложен и хетероложен иРНК. Сравняване на тези резултати с данни за първичната структура на тези полипептиди, които са кодирани от тРНК изследвани, може да се види дали кривата определя от честотата на повторение на хибридизация на гени с приблизително от данни на хомоложност V- и С-домени.