Onkologiya-

IA Baldueva

VCO Институт по онкология. проф. NN Петров, Министерство на здравеопазването, Санкт Петербург

източник RosOncoWeb.Ru

"Ваксина - метод, основан на използването на комплекс antigenaili антиген с или без отговор адюванти modulyatsiiimmunnogo" (Restifo Н., Sznol М., 1997). Този метод aktivnoyspetsificheskoy имунотерапия, която се основава на стимулиране на immunnogootveta пациентите на тяхната собствена тумор. Ваксинацията (тумор ваксинация) с рак може да се използва с адювант (след hirurgicheskogolecheniya в отсъствие на клинично установима далечни метастази) и медицински цели (в случай на разпространение на тумора).

Множество работи през последните десетилетия показват, chtopri злокачествени тумори имат адекватен имунен otveta.Eto може да се дължи на няколко причини:

1) липса на имуногенност на тумор / opuholeasotsiirovannogoantigena;
2) способността да индуцира туморна локално или системно имуносупресия (IL-10, трансформиращ растежен фактор rosta-? Фактор rostaendoteliya съдове и т.н.), с намаляване на активност на Т-лимфоцити .;
3) механизъм за нарушение opuholeasotsiirovannogo антиген.
През 70-те години на миналия век, Хюит и др. (1976), че е vyskazanopredpolozhenie че експериментални тумори в линеен zhivotnyhv повечето случаи да се окажат не-имуногенен. Rezultatyklinicheskih изследвания също показаха, че тумори в chelovekamalo различни от нормалните тъкани. Последно obstoyatelstvomozhet отчасти да обясни липсата на ефективен immunnoysistemy активиране. Следователно, заключението е формулирана, че имунологичната намеса в неопластичен процес yavlyayutsyamaloperspektivnymi на. Впоследствие в проучвания ван Pel и Boon (1982) в миши модели са показали, че защитен имунен otvetmozhet се индуцира срещу "неимуногенни тумори"И липса на имуногенност чийто падеж наближава nesposobnostyuopuholi активират имунната система от неговите липса poverhnostiopuholevyh антигени. Тези наблюдения са впоследствие podtverzhdenyna неимуногенни тумори в експериментални животни от други видове, където чрез манипулиране на имунната система (с други думи -vaktsinatsy) е показано, че туморни антигени prisutstvuyuti на неимуногенни тумори и могат ефективно да stimulirovatimmunnuyu система за елиминиране на тумори. Тези данни, както изглежда, могат да бъдат екстраполирани човешките тумори. По този начин, всички тумора може да бъде чувствителна към immunologicheskomuvmeshatelstvu (Boon, 1996- ван дер Bruggen, 1996- Rosenberg S., 1999).

Клинични изследвания за активното специфичен immunoterapiibolnyh с тумори с различни локализации се провеждат в nastoyascheevremya във всички ракови центрове. Обекти issledovaniyayavlyayutsya ваксина на базата на автоложна или алогенна не modifitsirovannyhi модифицирани туморни клетки polivalentnyevaktsiny синтетични ваксини, базирани на дендритни клетки и други.

Известно е, че свободен (несвързан) антиген не се разпознава от В-лимфоцити, дори ако тези клетки ekspressiruyutretseptory съответните антиген. За initsiirovatimmunny отговор, антигенът трябва да се представи poverhnostiantigen-представяща клетка в контекста на HLA молекулите и друга повърхност vassotsiatsii с молекулни структури (костимулаторен, адхезионни и др.). Това събитие е opredelyayuschimkak в стимулирането на Т-клетки и в образуването на ефективно immunnogootveta (Guinan Е., 1994). Т клетки "памет" initsiirovatimmunny може да отговори за кратко време във взаимодействие с razlichnymiantigen-представящи клетки (В-клетки, макрофаги, dendritnyekletki), от които дендритни клетки (DC) са в състояние да induktsiipervichnogo nepraymirovannymi отговор на Т-клетки. Основните svoystvamDK включват:

1) уникалната способност да събира Т клетки в своя най-висок резултат poverhnostiza собствена експресия glavnogokompleksa хистосъвместими молекули клас II (HLA-DR, -DP и -DQ) и molekulI клас;
2) способността да експресира по време на зреенето CD80 молекула CD86i CD40, които активират съответни лиганди на Т kletkah- CD28, CTLA-4 и CD40L;
3) способността да произвежда редица цитокини, включително интерлевкин-12, който подобрява имунологичен отговор поради "инструкции"Т клетъчна диференциация пътища на Т-хелперни първи тип;
4) способността да улови разтворими антигени чрез ендоцитоза;
5) наличието на ефективни механизми за обработка (обработка) сложни протеини имуногенни пептиди;
6) способност да изпълнява роля диференцирани в тимуса на: индуцира толерантност към антигени тъкан със собствен pomoschyuudaleniya развиващите автореактивни Т-клетъчни клонове, и др.
Проучванията показват, че броят на DC в организма на пациентите zlokachestvennymiopuholyami намалява, а те са функционално дефектен. DC изолирана от периферни лимфоидни и не-лимфоидни периферна кръв tkaneyi двете експериментални животни с тумори и ракови пациенти не са в състояние да стимулират spetsificheskiyotvet цитотоксични Т лимфоцити (CTLs) и слабо стимулиране на Т-хелперни клетки (Bernard, J. и сътр., 1997 Gabrilovich D . и др., 1996- ZitvogelL. и др., 1996). Освен това на повърхността им е vyyavlenosnizhenie експресия на адхезионни и костимулаторни молекули и подтискане takzhekriticheskoe HLA молекули, особено I klassa.Predpolagaetsya че намаляването на броя на DC и загубата на ryadafunktsy може да бъде една от основните причини за липсата polnotsennogoimmunnogo отговор на развитие на тумор.

Култивирането на периферните DCs ин витро при условия pozvolyayuschihpoluchit максимална техния растеж и активиране, води до uvelicheniyuekspressii повърхностни молекули, но тяхното ниво често okazyvalsyanedostatochnym да индуцира специфичен CTL отговор забавено (Gabrilovich D. и др., 1996). Най-голяма способност на DCs да comparisonwith периферна представяне opuholevogoantigena специфични Т лимфоцити имат predshestvennikiDK костен мозък, както и сингенни или алогенни DCs от периферните krovizdorovyh индивиди, активен ин витро тумор assotsiirovannymiantigenami (Palmer Е. и сътр., 1997 Reid С, 1997) , Само takieDK в повечето случаи нормално стимулира CTL отговор. Etopozvolyaet счита активирани DCs обещаващи kandidatamidlya активна специфична имунотерапия при пациенти с rasprostranennymiformami злокачествени тумори, включително лечение на резистентна kstandartnomu.

Образуване на ефективна антитуморна имунна otvetana vaccinotherapy обикновено изисква няколко седмици doneskolkih месеца. Следователно spetsificheskoyimmunoterapii активен клиничен ефект се забави (Jefford М. и др., 2001) .Ponyatno че този метод трябва да бъде по-ефективен в адювант primeneniis цел в случай на така наречената остатъчна opuholevoybolezni. Когато голяма туморна маса ефективност vaktsinoterapiia априори значително по-ниска, тъй като в тези случаи често nablyudaetsyanedostatochnoe проникване в тумор ефекторни клетки generirovannyhv резултат на ваксинацията.

Ваксина може да бъде неефективно при пациенти с bystrymopuholevym растеж, тъй като zlokachestvennyeopuholi на прогресия генетично нестабилен (в резултат на мутации), и тя може да разпръсне и "избягване" нови туморни клонове otraspoznavaniya имунната система на гостоприемника. Ето защо, много klinicheskieissledovaniya-DC терапия ваксина проведено при пациенти с minimalnoyostatochnoy заболяване. Това се дължи на решението на такъв важен zadachkak увеличение на оцеляване период и без рецидиви. Заедно теми за използването на съвременни методи за имунотерапия при пациенти с disseminirovannymiopuholyami устойчиви на традиционните лечения, pomogayutbolee разбере напълно ефективността на имунната реакция, растеж biologiyuopuholevogo, както и да се определи мястото на имунотерапия при рак пациенти kompleksnomlechenii.

При разработването на важни методи за тестове на ваксини imeyutlaboratornye, резултатите от които могат да предскажат klinicheskoetechenie заболяване. Те включват: изследване spetsificheskihpeptid-HLA-тетрамери, интрацитоплазмено интерферон -, ELISPOT тест (ензимно-свързан имуноспот), полимеразната верига reaktsiyas обратна транскриптаза (Sznol М.? & MarincolaF., 2000). Тези тестове позволяват да се определи количеството на антиген-spetsificheskihT клетки в периферната кръв и способността на Т клетки povrezhdatkletki цел експресия на чужд антиген.

Голям спор поставя въпроса за избора на материал за laboratornogoissledovaniya при оценката отговор на vaccinotherapy: perifericheskayakrov, туморната тъкан или лимфен изцедени съдържание uzly.Opredelenie на антиген-специфични ефекторни kletokv циркулираща кръв се маркира като най-значимите. Заедно теми за е важно да се изследва свързването на лабораторни параметри iotsrochennogo туморна регресия. От практическа гледна точка методи naibolsheeznachenie имат клинична оценка на терапевтичния ефект (пълен, частичен регресия, процеса на стабилизиране и продължителност).

Понастоящем ние обсъждат различни видове миелоидни DCs, които могат да бъдат подходящи за клинична употреба: DC изолирани от периферна кръв, izih отглеждат екс виво прогениторни костен мозък (CD34 + -gemopoeticheskie stvolovyekletki), получени от периферните кръвни моноцити. Тип DK- определен етап на съзряване на хематопоетични клетки от костния мозък Farlands, които играят важна роля tipuantigennoy стимулация. Среща с имуногенни антиген допринасят за узряването или активиране и функцията може да се променя (например, миграция, Т стимулиране на клетките, цитокин производство, и т.н.).

Едновременно се измерва различни методи за доставяне dlyaDK екс виво антиген. DC се използва за активиране на специфични пептиди, но тяхното използване е ограничено поради зависимост от HLA fenotipapatsienta (Nestle Е., 2000). В някои тумори opuholeassotsiirovannyeantigeny остават неизвестни, обаче tselnyhopuholevyh използва клетъчен лизат (Ashley D. и др., 1997), пептиди, elyuirovannyes повърхностно автоложни туморни клетки, конюгатите "DK-opuholevayakletka" (Hart I. & Colaco С, 1997). Opuholevoykletki РНК и ДНК може да се трансфектира в DC за целите antigennogoopuholevogo синтеза на протеини и / или представянето на повърхността immunogennyhpeptidov (Nair S. и сътр., 1998- Philip R. и сътр., 1998). Protivoopuholevymeffektom също притежават екзозоми, които са "антиген-predstavlyayuschiepuzyrki"Получава се от туморна клетка или DC (ZitvogelL. И сътр., 1999).

Наскоро открихме, че изборът на тип DC да klinicheskogoprimeneniya зависи от вида на антиген (Serody J. и сътр., 2000) .dk процес на антигена, които могат да бъдат доставени като пептид, протеин или генетичен ваксина. Незрелите DC че ispolzuyutendotsitoz активно и ефективно улавяне екзозоми може да бъде naiboleepodhodyaschimi за доставяне на имуногенен или антигенен протеин kompleksov.V разлика зрели DC с висока експресия HLAmolekul може да бъде най-подходяща за използване peptidov.Korotkie пептиди (от 8 до 10 аминокиселинни остатъци) може napryamuyusvyazyvatsya с HLA молекули (главни хистосъвместими комплексни молекули) на повърхността на DCs и не се нуждаят от улавяне на антигена и неговата клинична protsessinge.V issled vaniyah оценява молекулно biologicheskiemetody, които допринасят за повишаване на функционалната aktivnostiDK. Генетична манипулация на DCs екс виво насърчаване на експресията на повърхностни молекули naih цитокини или имуностимулаторни молекули, които могат да засилят ДИК-клетъчна взаимодействие и като резултат, антитуморен имунен отговор (Philip R. и сътр., 1998).

Също така търси оптималната доза DC razrabatyvaetsyagrafik ваксинацията, оценява начина на прилагане на DC ваксина. Установено е, че DC трябва да притежава следните качества:

1) след култивиране екс виво в vivov бъде жизнеспособна за дълго време, тъй като те не могат да отговорят на уникален dostatochnodolgo (рядко) antigenspetsificheskieT клетки в лимфните възли;
2) ефективно мигрират в лимфните uzlam-
3) улесняване на ин виво ефекторната функция на Т клетки.
В допълнение, степента на преживяемост ин виво ефекторни Т клетъчни generirovannyhs от ваксинация, изисква непрекъснато стимулиране, което се осигурява оптимално и стабилна ориентация на тумора.

Важно е клинично оценяване подкожно, интрадермално, интравенозно vnutrilimfaticheskoei DC ваксини. Въвеждането на ваксината в perifericheskielimfaticheskie възли изисква заредени DCs мигрират към limfoidnuyutkan и дългосрочна поддръжка има оспорване на способността на клетките. Когато се прилагат интравенозно, DK, депозиран в белите дробове, черния дроб, далака и костния мозък, но те не се откриват в туморни или limfaticheskihuzlah образувания (Morse М. и др., 1999). В protivopolozhnostetomu, изследвания, използващи интрадермално приложение на DCh, получени от моноцити, DCs показват миграция limfaticheskieuzly. Тези проучвания се използват незрели РК и тяхното kolichestvobylo незначително. Най-DC остане на мястото на инжектиране (Томас Р. и др., 1999). Това показва, че населението nezrelyeDK са под оптималните за постигане vaktsinoylimfoidnoy тъкан. Въпреки това, Schuler-Thurner Б. и др. (2000), използван DCh, получени от моноцити екс виво, които effektivnostimulirovali антитуморен имунен отговор. Без директни sravneniyaeti данни могат да бъдат приписани на ефективна миграция и predstavleniemopuholespetsificheskogo антиген на Т-лимфоцити, активирани exvivo DC.

Обещаващ е използването на DC-ваксини gemopoeticheskimifaktorami, провъзпалителни агенти, Т-клетки или drugimitsitokinami (Flt-3 лиганд, гранулоцит-макрофаг koloniestimuliruyuschiyfaktor, CD40 лиганд, интерлевкин-2, -12, интерферони?,? И т.н.). Това рекомбинантна клетка могат да бъдат използвани по време на фактори kakadyuvanty DK-vaccinotherapy (Pulendran Б. и др., 1998- Williamson Е. и сътр., 1999- Nestle Е. и сътр., 2001).

По този начин, преглед на литературни данни, представени показва, че методите на ваксина на базата на DC onkologicheskihbolnyh лечение могат да бъдат много разнообразни. Развитие perspektivnyhmetodov терапия DC ваксина, да допринесе за напредъка, постигнат в oblastimolekulyarnoy биология, хибридомна технология, rekombinantnyeformy различни биологично активни вещества и много drugiedostizheniya.

Въпросът за ефективността на противоракови ваксини, терапевтични и цели адювантна primenyaemyhs ще се основава на все obektivnyhdannyh увеличаване на продължителността на живота на болни от рак, не съществува риск от усложнения, свързани с ваксината и sootnosheniistoimost / ефективност.