Съдържание офталмология-глутаминова киселина в камерата за влажност при пациенти с първично отворена глаукома

От много автори глутамат прави neurotoxiceffect на ганглийните клетки на ретината. Възможно е glutamicacid увеличение концентрация в очните тъкани с първичен отворен angleglaucoma (POAG) играе важна роля в зрителния нерв glaucomaatrophy патогенеза.

Воден хумор на 10 пациенти с POAG бяха взети по време на cataractextraction и изследвани. Количествата на глутаминова киселина weredetermined чрез хроматографски метод.

концентрация глутаминова киселина във воден хумор на контрол groupwas 28.6 ± 1.6 MKG / мл и в група с POAG - 84.9 ± 28.7 MKG / ml.The разлика не беше статистически достоверна. По този начин има atendency до глутаминова киселина увеличение концентрация в очите withPOAG.

PPerforman изследвания poslednihlet значително да повлияе на представянето на патогенезата на зрителния нерв glaukomatoznoyatrofii - глаукоматозна оптична невропатия.

Установено е, че характеристиката е проява на невропатия glaukomatoznoyopticheskoy апоптозата - смъртта на ганглий kletoksetchatki. Quigley [6] счита, че може да повреди vsledstvievysokogo ВОН аксон на ганглийните клетки на ретината не може да се проведе dostatochnoyinformatsii, което води до активиране на механизма на природен gibelikletki. Вероятно тези процеси се активират nedostatochnostyukrovotoka съдове в окото при повишена ВОН. Доказано е, chtoodnovremenno с това е налице значително увеличение soderzhaniyaglutaminovoy киселина (глутамат) в стъкловидното тяло на пациенти pervichnoyotkrytougolnoy глаукома (POAG). Глутаматът е основните neyromediatoromTsNS и ретината. В същото време се увеличава glutamatavyshe физиологични нива на концентрация в ретината причинява блокада mezhneyronalnoyperedachi нервните импулси и се смесва с селективни apoptozomganglioznyh ретинални клетки поради невротоксичните ефекти на глутамат [5]. Брукс Д.Е. и др. [7] намерени в кучета очи с глаукома eksperimentalnovyzvannoy повишено съдържание на витреалната глутамат, триптофан, и ниско съдържание на глицин в сравнение с kontrolem.Po Според авторите, високата концентрация на глутамат е токсичен dlyagangliev ретината исхемична механизъм доказва разстройства настъпващи в клетки на ретината.

Самата идея на невротоксичен ефект на глутамат на nervnuyutkan, по-специално, ганглийните клетки на ретината, zaimstvovanaiz неврологично практика. Невролози 20 години znacheniebolshim дават концентрации на предавателя в развитието на такива заболявания като болестта на Алцхаймер, множествена склероза, деменция, amiotroficheskiybokovoy склероза и други [4]. Повишени нива на glutamatav стъкловидното тяло на пациенти с глаукома, смъртта на ганглий kletoksetchatki под влиянието си в експериментите върху плъхове право E.B.Dreyer сътр. [6] показва, че механизмът на тяхното място и gibeliimeet POAG. Въпреки това, причината за вътреклетъчната не vypuskaglutamata напълно ясно. E.B. Dreyer и сътр. [6] вярваме, че може би високо вътреочно налягане причинява vyhoduglutamata във вътреклетъчната пространство, индуциране на клетъчна смърт, което е токсично за ганглийни клетки. Вторият вероятни prichinoygibeli клетки, според авторите, е липсата на ензимни системи, отговорни за разрушаването на невротрансмитер от синапса след vyhodaego. Трудността да потвърди тези възгледи zaklyuchaetsyav, че е много трудно да се проверят фактите на "на живо" око, обаче, няма съмнение, че големи концентрации gutamata toksichnydlya нервна тъкан.

Предвид гореизложеното, целта на нашето проучване е obnaruzhenieglutamata при пациенти с POAG.

Материали и методи

Експериментална група се състои от 10 пациенти с POAG (6 мъже, 4 жени, средна възраст - 74 години), които zabiralaskamernaya влага по време на екстракция на извличане kataraktys antiglaukomatoznyh компонент. 8 пациенти са развили stadieyPOUG 2 с далеч по-напреднали. Контролната група се състои bolnyeso сенилна катаракта - 14 пациенти (11 мъже, 3 жени, средна възраст - 68 години). Основните и контролните групи bylisopostavimy възраст и свързаните соматични заболявания.

В основата на метода, описан от Боде и пуснати методи Giri kolichestvennogoopredeleniya аминокиселинни производни под формата на мед с ningidridinomposle тяхното хроматографско разделяне на хартия в тази модификация [1].

1. Подготовка на проби за анализ. обем от 0.1-0.2 мл Пробите kamernoyzhidkosti се претегля на аналитична везна и се изпарява до сухо на водна баня при 40 ° С в стъклен микроплаки използване плаващ статив. Сухият остатък се разтваря в 0.05 mldistillirovannoy вода.

2. Получаване на размерите хроматограми zhidkostiglaza камера. 20 л от получения разтвор на порции от 5 L с помощта на автоматична пипета се нанася върху хроматографска bumagumarki "бързо" размер 2 х 27 cm. Метод хроматография provodyatniskhodyaschim два пъти, първо в една посока smesirastvoriteley I, след това два пъти на смес II. Сместа I: н-butilovyyspirt, ледена оцетна киселина, дестилирана вода (4: 1: 5). Смес от II: п-бутилов алкохол, ледена оцетна киселина, distillirovannayavoda (40: 15: 5). След всяко предаване bumaguvysushivayut разтворител във въздуха и след това се поставя в хроматографска разтворител преминаване kameru.Vremya в една посока на 7 часа. Vysushennuyuhromatogrammu потапя в продължение на няколко секунди в разтвор на 0.5% ningidrinav ацетон, изсушава, за да станат по-ясни след ден poetomuopredelenie количествено определяне на аминокиселини в рамките на няколко минути на въздух при 50 ° С за развитие амино okraski.Pyatna ipodogrevayut 10 минути в пещ за следващия provoditna ден.

3. количествено определяне на глутаминова киселина в kamernoyzhidkosti око. Морави петна, отговарящи glutaminovoykislote се изрязват, нарязани на малки парчета и се поставя в микроепруветка, съдържащ 0.25 мл алкохолен разтвор на меден сулфат. Fioletovayaokraska става оранжево-червен obrazovaniyamednogo получената амино производно с нинхидрин. екстракция Prodolzhayutv продължение на един час при стайна температура. Intensivnostokraski измерва на photoelectrocolorimeter Humalyzer 2000 pridline дължина на вълната 505 нм в микрокюветки nabumagu срещу контролна проба. Изчисления въз основа на съдържанието на аминокиселини се осъществява kalibrovochnomugrafiku получени от стандартните разтвори на глутаминова киселина.

4. Изграждане на крива. Gotovyatrastvory глутаминова киселина 0.001 М, М 0.00075, 0.0005 М, 0,000375M, 0.00025 М. В статията се прилага до 20 ул решения. Proizvodyatpo формула изчисление:

К = (С х 5 х 10^-2) / V

А - концентрацията на глутаминова киселина в камера влага (мкг / мл) -С - съдържание глутаминова киселина намерен kalibrovochnomugrafiku (мкг / мл) - V - обем на пробата (мл).

Резултати и обсъждане

Глутаматът съдържание на влага в kontrolnoygruppe на камерата е 28.6 ± 1.6 мкг / мл, с POAG - 84.9 ± 28.7 микрограма / мл (разликата не е статистически значима, стр>0.05).

Въпреки че не се получават и статистически значими разлики vsoderzhanii пациенти глутаматни POAG и на катаракта odnakoimeetsya ясна тенденция към по-висока концентрация на влага neyromediatorav пациенти камера POAG. В 5 от 10 пациенти с POAG soderzhanieglutamata е значително по-висока в камера влага, отколкото в kontrolnoygruppe и варира от 37.6 пг / мл до 260.3 микрограма / мл.

При пациенти с сенилни катаракта glutaminovoykisloty високата концентрация е само 33 мг / мл.

Участие на някои невротрансмитери в oftalmotonusapokazano регулиране в произведения А. Myagkova [2,3], който се оказа vliyanieopioidnyh пептиди за повишаване на ЮР, в качеството elektricheskimikolebaniyami и химични стимули на амигдалоиден kompleks.V данни полученият резултат не може да се съгласи с gipotezoyusileniya апоптоза на ретинални ганглийни клетки в POAG vsledstvienakopleniya него глутаминова киселина. Все пак, това gipotezatrebuet по-нататъшно проучване.

Според някои проучвания за първи път в влага камерата glutaminovuyukislotu при пациенти с POAG. Съдържание glutamatau пациенти POAG отколкото в контролната група.

1. Медицинска лаборатория технология и диагностика: Meditsinskielaboratornye технология. Референтен в 2 обема / Ed. A.M.Karpischenko // микрометод определяне на свободни аминокиселини в syvorotkekrovi използват хартиена хроматография. V.2. - Санкт Петербург, "Intermedika", 1999 г. - С. 106-109

2. Мека AV въздействието пробиване очни въздействия, предизвикани от електрическо и химична стимулация mindalevidnogokompleksa: Avoref. Дис. на soisk. учени. стъпка. СТАНИСАВЛЕВИЧ. мед. nauk.- Казан, 1997-21.

3. Soft AV Участие на опиоидни пептиди в централната налягане regulyatsiivnutriglaznogo и хидродинамични очите // Proc. Dokladov7sezda офталмолози Русия. - М., 2000.- S.175-176.

4. Plyahin IV Биохимични основа удължен до kletochnoysmerti. // междурегионалните колекциите на научно. Труда / биохимия narubezhe XXI век. - 2000.- Рязан. - S.173-177.

5. Shamshinova AM Зуева MV, Tsapenko IV, Яковлев AA Neyrofiziologicheskieosobennosti ретината и възможната клинична електроретинография .// Vestn. Oftalmol. - 1996.- №2.- S.52-55.

6. Случаи на глаукома в документа // slackinc.com), очна хирургия News International Edition 15 декември 1996 г.

7. концентрация Vitreousbody глутамат при кучета с глаукома / Brooks D.E., Garcia G.A., Dreyer E.B. изобщо // Am. J. Vet. Res. - 1997.- Vol.58, N8.- P.864-867