Pediatrics инфрачервен спектрален анализ на кръвен серум като отражение на нивото на метаболитни разстройства в инфекциозни заболявания сред децата част 1

В основата на измерване е спектроскопски методи zavisimostiintensivnosti абсорбция, емисия или разсейване на светлината veschestvomot светлина честота (или дължина на вълната). В spektroskopiiispolzuyutsya оптичен абсорбционни спектри в инфрачервения и ultrafioletovoyoblastyah и Raman спектрите и spektrylyuminestsentsii. Всеки спектър съответства на някои oblastdlin вълни. В различни области на поглъщане на светлина razlichnuyuprirodu. След поглъщане на енергия в оптичен spektramozhet варира въртене, вибрационна енергия molekulyili външно възбуждане на енергия, валентните електрони. За povysheniyavraschatelnoy молекула достатъчно енергия относителна nebolshieenergii - съответстващ абсорбция е в инфрачервени (IR), - областта (дълги дължини на вълните). За да се увеличи kolebatelnoyenergii молекула (възбуждане otnositelnodrug други атоми трептене) изискват кванти на висока степен и абсорбция lezhitv близката инфрачервена област. Дори по-голяма кванти енергия, необходима dlyavozbuzhdeniya външните електрони на молекула - абсорбцията vidimoyi в UV регион.

метод спектроскопски анализ за определяне kolichestvotogo или друго вещество. право на Beer - един от osnovopolagayuschihzakonov спектроскопия, предвижда: "Поглъщане на светлина proportsionalnochislu молекули абсорбиращи материали по пътя",

Инфрачервеният спектър разграничат четири области: 1. видими, близо 2. 3. 4. фундаментални и досега. За да се изследва organicheskihveschestv най-важната основна infrakrasnayaoblast лежи в диапазона от 5000 до 200 см^-1. Liniiv област 600-1300 см^-1 различни и дори dlyarodstvennyh специфични молекули, следователно се нарича региона "отпечатъкът" молекула. В тази област попадат kolebaniyaodinarnyh разтягане на С-О, C-N, N-O. В контраст, абсорбция честота dvoynyhsvyazey С, = С, С = О, N = О са характеристика, т.е. dlyaraznyh малко различни молекули са в диапазона 1500-1950 см^-1. Pogloschenietroynyh връзки е по-къси дължини на вълните (дори dlyaS = С при 2100-2250 см^-1). IR е absolyutnospetsificheskim собственост на всеки химични изомери съединение poetomudazhe позиция, геометрични изомери и молекули soderzhaschieprotony имат различни спектри. В тази връзка, IR spektrkazhdogo вещество има идентичност (пръстов отпечатък).

IR спектрите са използвани за идентифициране на съединенията и ustanovleniyastepeni (качествено) тяхната чистота, и те могат да бъдат ispolzovanydlya качествен анализ на смеси при контрол люлка reaktsii.Odnako най-разпространената и важно приложение на предполагаем идентификация IR spektroveto и потвърждение на структурата на почти всяка функционална soedineniy.Nalichie група в молекулата може ustanovits него. Освен това, възможността вече беше споменато provedeniyametodom IR спектроскопия и количествен анализ.

съвременни инструменти "пиша" автоматично спектър и IR спектрофотометри "Спекорд 80/85 IR" obespechivayutfotometricheskuyu точност от ± 0,2%. vstroennogokompyutera контролната програма предотвратява нередовни и несъвместими параметри grafikopostroenie и осигурява линейна корелация между bazisnoylinii 10 вълнови числа. Тези фактори obespechivayutobektivnost и висока точност спектроскопски analizov.Soglasno основа на съвременни концепции на клетъчната membranysostavlyaet двоен слой от фосфолипиди, prisuschiemembrane кондициониране свойства на течния кристал. Увреждане на структурата и funktsiikletochnyh мембраните на всички етапи на заболяването са предимно vyrazheniempatologii за състояния, включващи токсичност. мембрани роля patologiikletochnyh и метаболизма като съставляващи единици токсичност, отразени в голям брой документи. Както е известно generalizovannyerasstroystva микроциркулацията присъщи в патогенезата на заболявания, свързани с токсичност, да причини хипоксия. Narastayuschayatkanevaya хипоксия води до промени в вътреклетъчни veschestvai клетъчните мембрани. От друга страна, развитието на механизми за patologiimembran изигра водеща роля на хипоксия нарушения metabolizmakletok. В резултат на прекомерното натрупване на кининови, biogennyhaminov, протеази и липази, лизозомни хидролази продукти perekisnogookisleniya липиди, свободни мастни киселини, както и patologicheskihmiokardio-депресивно вещества образува кръвообращението nedostatochnost.Chrezmernoe агенти натрупване изброени определя sindromtoksemii и причинява увреждане на почти всички функции и системи, включително контрактилитет инфаркт, съдов тонус, реологично svoystvakrovi т.н. В крайна сметка, тъканна хипоксия нарушава putibiologicheskogo окисление. Оставете цикъла на Кребс и окислението на глюкоза пентоза система шунт. Основният начин на получаване на енергия stanovitsyaanaerobny гликолиза да произвежда млечна киселина като konechnogoprodukta. Лактатна ацидоза, стимулира натрупване на NADH инхибира fermentyglikoliza (фосфорилаза, фосфофруктокиназа) aktivnostetogo път и намалява окисляването се случва с тежка енергийни macroergs istoscheniemzapasov дефицит.

Една от последиците от недостига на енергия е натрупването на частици от молекулярни йони (ОН^-, Н + + LEO и др.), Kotoryeprivodyat за окислително увреждане полиненаситени zhirnyhkislot включени в липидните мембрани [1, 2, 3]. Perekisilipidov на свой ред упражняват тяхното разрушително действие върху основна енергия богати съединение АТР podvergayuschegosyausilennomu разпад на ADP, AMP и аденозин.

Съществуващото ниво на знания в областта на спектроскопията pozvolyaetopredelyat появата на нов ("патологичен") И изчезването на"нормален" Химикали (ATP, GTP, UTP, и др.), Които са в различни патологични състояния bystromumetabolizmu изложени, за да образуват съответните продукти gidroliza- монофосфати. Също така е възможно да се определи belkovyhmolekul на концентрация и фосфатиди в процеса на разпадане на клетъчните структури. IR спектър Vissleduemuyu зона и попадат svobodnyhradikalov валентните връзки.

Така инфрачервена спектроскопия за определяне ryadametabolitov ниво, образувана по време на патологични промени, инициирани токсикоза и съответно за оценка на процесите на степен narusheniyametabolicheskih.

По наше мнение, най-важното не е определението за kolichestvatogo вещество (включително голям брой от тях), nahodyaschegosyav кръв детето на пациента, както и съотношението на интегративен анализ pokazateleyIK спектроскопски с тежест toksikozai следователно нивото на метаболитни нарушения. В protsesseissledovaniya под наблюдение имало 183 деца vozrasteot 1 година до 14 години с различни инфекциозни заболявания. В 113detey диагностицирани с токсични дифтерия орофаринкса (TDS), Y14 - локализиран дифтерия орофаринкса (LDR), 44 деца vystavlendiagnoz - ангина (фоликуларен или лакунарен) и 12 - infektsionnyymononukleoz (IMN). В допълнение, за сравняване на gruppazdorovyh деца бе взето, състоящ се от 30 души. По възраст и polovomusostavu тези групи деца съвпадащи.

Като субстрат за проучванията използвани syvorotkukrovi пациенти (здрави) деца provedeniyaspektralnogo подготвени за анализ. Серумът се суши при стайна температура половин петриевата паничка. Твърдите вещества се поставят в суспензия добив vazelinovoemaslo който след това се подлага на IR - spektroskopiis абсорбционни спектри регистрация в област 1200-1000 см^-1.При получаване спектограма определена височина за усвояване на максимума на пика на групата при 1170, 1165, 1150, 1140, 1130, 1100, 1070, 1025sm^-1 и средната стойност на всички височина pikov- С и след това определя за всяка предходна връх съотношение за следващите: 1170/1165, 1165/1150, 1150/1140, 1140/1130, 1130/1100, 1100 / 1070,1070 / 1025. Информационни показатели обозначени с референтни символи (М, М, D, C, R, X, S). индикатор М predstavlyaetsoboy голямото получава коефициент, и индекса m - naimenshee.Krome, който беше въведен допълнителен компонент - D, yavlyayuschiysyaraznostyu М и m. Средната стойност на всички частни определен като показател - с. Също така изчислена стойност R -връх съотношение височина връх в 1165 cm^-1 kvysote връх с максимум при 1170 cm^-1, стойност х- връх съотношение височина връх в 1130 cm^-1до средната стойност на височините на пиковете (C) И стойността наS - връх съотношение височина връх в 1100 cm^-1към средната стойност на височина (C).

Първоначално ние спрямо изпълнението на IR spektroskopicheskogoanaliza кръвния серум на здрави деца и деца с различни infektsionnoypatologiey текат синдром на ангина (таблица. 1). Eslirassmatrivat Даденият нозологична форма по отношение kstepeni на интоксикация, е необходимо да се споразумеят chtonaimenee изразен токсичен синдром трябва да се отбележи priLDR. Освен това, с увеличаване на нивото на интоксикация, zabolevaniyaraspolozhatsya в следния ред: IMN, болки в гърлото, и TDS. По наше мнение, това се дължи на градация Clinicopathogenetic svedeniyamio всяка от болестите. Разбира се, отделните bolnogos IMN ниво на интоксикация може да бъде по-ясно изразен отколкото ukonkretnogo ангина пациент, но пациентите vyrazhennostivseh степен на симптоми и синдроми са осреднени. Съответно, синдром zdorovyhdetey интоксикация отсъства. Известно е, че narusheniemetabolicheskih процеси в увеличението на тялото като uglubleniyatoksikoza и тези две променливи са ясно polozhitelnuyukorrelyatsionnuyu връзка.

При разглеждането на маса тенденция postepennogosnizheniya числени стойности на индекса М като vozniknoveniyai натрупване на токсичност (от здрави деца към TDS). Свържи (uvelicheniechislovogo стойност параметър), по-ясно изразена тенденция се наблюдава в цифри S и х. Predpolozhitelnonazvannye параметри - S, х и в по-малка stepeniM отразява връзката метаболитните процеси променя нивото nahodyaschiysyavo степента на интоксикация.

В допълнение, таблица. 1 показва, че за TDS и ангина, pokazateliIK спектроскопия имат подобни стойности на подобно място situatsiyaimeet LDR и медицински устройства, а именно по такъв начин, zabolevaniyabolee сравнима степен на тежест интоксикация.

За да се определи границите на нормата инфрачервени параметри спектроскопски определят своята гама от здрави деца. За тази minimalnoei избрана максимална стойност на всеки от индикаторите (таблица. 2).

След това, определяне на броя на децата (%) на всеки nozologicheskoyforme в който числени стойности на параметри са извън правилата predelyprinyatoy (за всеки параметър). Това predstavlenyna Таблица 3. Следва да се отбележи, че ако числовите стойности на детето IR spektroskopicheskihparametrov ще надхвърлят информацията в таблицата 2, можем спокойно да го приписват на група от пациенти, тъй като zdorovyhtakie има числови стойности не са фиксирани.

Както се вижда от таблицата, индикаторите D, М, mи R когато намаляване на инфекциозни заболявания имат tendentsiyuk (предимно при пациенти, разположени под мин), в сравнение със здрави деца, и S и х, naoborotpreimuschestvenno повишен в сравнение с нормална (preimuschestvennovyshe макс). Както е отбелязано по-горе, поведението на тенденция на IR parametrovskhodny TDS и ангина, от една страна, и с фоторезистора и infektsionnommononukleoze друга. Се потвърждава и от друга zamechennayatendentsiya - увеличаване на броя на пациенти с повишени стойности на otnosheniyuk здрави деца, числените стойности на параметрите S и х,повишаване нивото на интоксикация (р<0.05-0.01). Имеетсяи некоторая тенденция увеличения количества больных с пониженнымзначением показателя М, до 28.6% при до 40.8-45.5% LDR priTDR и ангина. Разкрити връзката променя цифров znacheniyparametrov IR и тежестта на интоксикация, prisuscheytomu или други инфекциозни заболявания, води до извода, че този анализ е неразделна индекс otrazhayuschimuroven метаболитни нарушения. Но, разбира се, да се разгледа в детайли поведението на neobhodimobolee IR spektroskopiipri TDS параметри. Таблица 4 показва числени стойности на IR spektroskopiipri различни клинични параметри изпълнения TDS. Както се вижда от таблицата, самите числовите стойности не се различават при различните степени TDR.Danny факт може да се обясни с факта, че нивото на TDS vystavlyaetsyana основа на официално знак - тежест OPKSH не vsegdasootvetstvuet истинската тежест на патологичния процес. В svyazis е препоръчително да се помисли за числовите стойности pokazateleyv в зависимост от резултата от AD (Таблица 5).

корелационен анализ разкри, че ако мярката - сс увеличаването на прогноза на влошаване, цифрите - m их намалена, ако е възможно смъртта. Tendentsiyupokazatelya с максимална стойност по-малка корелация zavisimostipovtoryaet (М). показатели за ниво korrelyatsiietih автентичен (р<0,05-0,001). Показатели Sи R повтаряща се тенденция минимална стойност (m) и х. По този начин, когато TDS се поддържа същите zakonomernostkorrelyatsionnyh отношения, които се определят от RIM, IMNi ангина. В този случай - съотношението параметри IR spektroskopiis резултат заболяване - също се наблюдава поведението merenarastaniya степен на токсичност, но в рамките на групата на пациенти с БА.

Така, развитието на цифровите стойности на IR spektroskopiipri TDS параметри потвърждава заключението, че те отразяват степента vyrazhennostitoksikoza, и следователно на нивото на метаболитни нарушения protsessov.Iskhodya гореизложеното следва да се приеме, че IR spektrysyvorotki кръв отразява нивото на метаболитни нарушения в тялото, причинено от действието инфекциозен агент. Ponyatnymprichinam за тези промени не са специфични за всяка libootdelnogo заболяване, но отразява общите закони patogenezainfektsionnogo процес.


литература

1. Владимиров YA, Archakov AI Lipidovv пероксидация на биологични мембрани. //M.-Nauka.-1972.- S. 179.
2. FZ Meyerson и др. Ролята на липидната пероксидация в патогенезата на исхемично сърце povrezhdeniyai антиоксидантна защита .// Kardiologiya.-N.2.-1982-S.81-92.
3. Papayan AV Tsybulkin EK Остра токсикоза в началото detskomvozraste. // -А. Медицина, -1984. -232 с.