Фагоцитната активност на дендритните клетки. Имунофенотипът на дендритни клетки

дендритни клетки, получени от костен мозък на мишки бяха тествани за способността да фагоцитоза. Фагоцитната активност на DC в различни етапи на диференциация, активиран Immunovac-PE-4, и класически индуктор на АСО съзряване TNF-а, се оценява за поглъщането срещу щамове на S. Aureus и S. Typhimurium. Като контрола бяха използвани макрофаги, които бяха получени от същите клетки от костен мозък от тях култивиране с GM-CSF в продължение на 7 дни.
Незрели дендритни клетки по-активно фагоцитирани бактерии разлика DC лекувани Immunovac-VP-4, АСО и TNF-а.

Фагоцитната активност на макрофагите и дендритните клетки е проучен в динамика срещу S. Aureus и S. Typhimurium.
Най-активни са макрофаги, фагоцитна индекс им по отношение на S. Aureus след 30 минути инкубиране беше 86.0 ± 4.8% и остава на високо ниво за наблюдение на три часа.

фагоцитарната активност незрелите дендритни клетки стимулира и имуномодулатори от микробен произход се различават значително.
При добавяне към сряда култивиране на TNF-а или Immunovac-VI-4 (групи 2 и 3), фагоцитната активност е значително по-ниска, с добавянето на Immunovac-VP-4 индекс фагоцитната е малко по-висока, отколкото в случая под влияние DC съзряване TNF-а на. Под влияние на SOA също показват намаление на фагоцитозни DCs, но ниво е по-високо от Immunovac-VP-4, което може да показва наличието в културата на незрели DCs и макрофаги. При сравняване на степента на фагоцитоза на S. Aureus и S. Тай-phimurium значителни разлики са открити.

добре вероятно, че по-високата активност на дендритните клетки абсорбционните бактерии стимулирани Immunovac-VP-4 и АСО експресионни поради Toll-подобни рецептори върху DCs и макрофаги, които имат афинитет към патогени, свързани структури на бактерии. След взаимодействие с бактериални продукти, DC прехвърля в нова функционална състояние, отразено в намаляването на фагоцитната активност и способност за по-мощни антиген представяне в сравнение с макрофаги.

проучване имунофенотипни характеристики на дендритни клетки на различни етапи от съзряването са извършени с помощта flyuorestseinizotiotsianat и PE-белязани моноклонални антитела компания, САЩ «Caltag».

Степен на диференциация и зрели дендритни клетки, получени от чернодробните клетки ембрионална мишка се определя от промяната в нивото на експресия на диференциация молекули CD34, CD38, CD40, CD80, CD86, CD83, F4 / 80, МНС I, МНС II след 3 дни след добавяне на незрели дендритни клетки Immunovac-VP-4, бактериален лизат К. пневмония, или TNF-а.

данни шоу че TNF-а и Immunovac-VP-4 в изследваните концентрации стимулирани DC съзряване. Въпреки това, ако се съди по експресията на маркери за диференциация, TNF-а активирани DC съзряване в по-голяма степен, отколкото Immunovac-VP-4 и лизатът К. пневмония. Концентрацията от 25 мкг / мл Immunovac-PE-4 е оптимална за индуциране DK-зреене при тези условия нивото на експресия на ко-стимулиращи молекули е по-висока. Въпреки това, експресия на F4 / 80 молекули върху DCs стимулирани Immunovac-VP-4 и лизат К. пневмония, остава повишена (23,8 ± 2,6% и 21,2 ± 3,4%, съответно) в сравнение с DC, лекувани с TNF-а (0,6 ± 0,2%).

Също така беше изследвано имунофенотипа на дендритни клетки, получени от костен мозък на мишки. Както съзряване индуктори използвани имуномодулатори на бактериален произход - Immunovac-VP-4 GMDP, АСО, и като контрола - лизат LPS и К. пневмония, и TNF-а.

Активирането на клетки чрез Immunovac-VI-4 GMDP и води до узряването на клетките. Увеличава експресията на ко-стимулиращи молекули, CD38 адхезионна молекула. Така концентрациите използвани Immunovac-PE-4 имат различни ефекти върху нивото на МНС. При доза от 25 мкг / мл на МНС I експресия I е 2.7 пъти по-голяма, отколкото в концентрация от 50 мкг / мл. МНС II експресия е високо при двете дози и няма значими разлики. GMDP повишено съдържание на DC експресираща МНС клас II.

използването на лизат К. пневмония и LPS засилено нивата на експресиране на съ-стимулиращи молекули МНС молекули, представляващи антигенен I и II на.

При използване на ACO като индуктор на DC съзряване маркер CD34 експресията е претърпял значителни промени като функция на дозата. Динамиката му наблюдават само при най-високите дози. При прилагането на ARF в доза от 0.3 EU / мл повишено съдържание CD80, CD86, МНС I-експресиращи клетки. Въпреки това, нивото на CD86 е по-ниска, отколкото с други индуктори на съзряване. Експресия на F4 маркер / 80 до DC стимулирани Immunovac-VI-4 може да бъде свързано с наличието на бактериални LPS във ваксина. Тези резултати се потвърждават от способността на DCs получени предварително третирани с LPS, експресират антигени не само зрели DC, но също така и рецептори за LPS.

По-долу експерименти Изследвахме експресията на тези маркери в комбинация immmunomodulyatorov микробен произход (IMMP) с TNF-а. Култивиране на DC в присъствието на GM-CSF и IL-4 с добавянето на шестия ден от 2,5 нг / мл TNF-а и IMMP DC узряването стимулиран в по-голяма степен, отколкото дозата TNF-а, и понижено поддържане в култура от макрофаги. Сама по себе си, на TNF-а при концентрация от 2,5 нг / мл (група 3) не индуцира DC съзряване в сравнение с контрола (група 2), CD34 незрели маркер е 5 пъти по-висока, F4 / 80 - 11,4 пъти, Тя се предполага, че е налице значителен интерес към културата на макрофаги. Въпреки това, когато koinkubatsii 2.5 нг / мл TNF-а експресия се наблюдава с имуномодулатори увеличават CD38 адхезионна молекула, костимулаторни молекули CD40, CD80, CD86 и МНС I и II клас.

особено това се отнася за АСО, koinkubatsiya защото с TNF-а стимулира експресията на повърхностни маркери, специфични за DC. Това намалява CD34 маркер в сравнение с незрели DC (група 1) с 3.4 пъти, повишена експресия на адхезионни молекули CD38 3.2 пъти, костимулаторни молекули CD40 38 пъти, CD80 и CD86 почти 9 пъти, МНС I 2 7 и МНС II 1.5 пъти, нивото на макрофаг маркер намаляват с 3.6 пъти. При влизане в културата, в среда на TNF-а и Immunovac-VI-4 е също така, стимулиране ефект, експресиращи че значително повишава експресията на МНС I и II и намалено съдържание на F4 / 80 в сравнение с действието Immunovac-VI-4 в същата доза (Таблица. 7). Подобни резултати са получени с комбинация на TNF-а (2,5 нг / мл) и GMDP, но експресията на CD40, CD80, CD86 и МНС II е по-голяма в случая на комбинация на TNF-а и Immunovac-VP-4.
данни шоу, че въвеждането на културалната среда малко количество TNF-а увеличава потенциала на DC съзряване под влиянието на имуномодулатори на микробен произход.