Имунизация срещу инфекция от дендритни клетки. Ефективността на активирането на вродения имунитет

Следваща е проучен способността на сингенни дендритни клетки индуцира специфична защита срещу инфекция в модел К. пневмония К2. DC бяха получени от костен мозък на мишки по метода, описан по-горе в ден 7 културата се прибавят към DC лизат К. пневмония К2 (50 мкл / мл) и 20 нг / мл TNF-а. На 9-ти ден на DC бяха измити и имунизират СВА мишки.

мишки имунизиран в различни експерименти, 4-, 3- и 2-кратно с интервал от 2 седмици. В 1-експеримента DCs бяха инжектирани подкожно на 2,5-3,0h106 клетки в 0,5 мл, в втори експеримент и след това - същия брой клетки се прилага 3 пъти подкожно или интраперитонеално. Имуногенният активност на дендритни клетки, натоварени К. пневмония лизат К2 се определя чрез интраперитонеална инфекция на мишки К. пневмония К2 вирулентен щам при доза от 100 микробни клетки в обем от 0.5 мл от 0.9% разтвор на натриев хлорид. Мишките са изправени пред предизвикателството на 14 дни след последната ваксинация, DC Опитът ескортиран контрол на инфекциите доза за неваксинирани мишки. Наблюдение на животните се извършва в продължение на 10 дни (смъртта на мишките се спира в ден 7 след инфекция).

зрели РК, К. пневмония лизат импулсирани с този начин на имунизация и заразени мишки 14 дни предупредени смърт от летална доза на хомоложна инфекция 83,3-100% от случаите с 100% контрол убиват животни, докато незрели DC със същата експериментална настройка не притежават защитни данни за дейността, получени показват възможността за образуване на адаптивна (специфични) имунен отговор под влиянието на DC третира с хомоложна антиген.

По-долу експерименти за изследване на специфичен ефект Прото voinfektsionnogo зрели дендритни клетки под влияние на различни антигени: лизат К. пневмония K2 (50 мкл / мл), TNF-а (20 нг / мл) и Immunovac-VI-4 (25 мкг / мл) схема DC имунизация бе намален до две приложения на 14 дни и се справи с К. пневмония K2 мишки при доза от 25-50 микробни клетки.

зрели РК, К. пневмония лизат натоварени К2 (с TNF-а и без TNF-а), с двойно имунизация осигури защита на мишки в 100% от случаите, в сравнение с 20% от оцелелите мишки в контролата. Докато DC зрял под влияние само на TNF-а, не защитават мишки от летални дози на инфекция като DCs зрели чрез действието Immunovac-VP-4, предвидени protektivnyi ефект в 33.3% от случаите. В този тест, също е получил данни, че само DC заредени хомоложни антигени, имаше значителен ефект protektivnyi определени от нас в 14-дневен срок след имунизация. Това показва способността на DCs представящи антигени на Т-лимфоцити, които диференцират в специфични ефекторни клетки.

Обобщавайки по-горе, следва да се отбележи, че антиген-представящата функцията на РК също е инсталирана в миши модел на инфекции. Особеното защитна активност срещу К. пневмония К2, изследваните 14 дни след прилагане на 2-4 пъти на DC образувани само DC заредена с хомоложна антиген. Възрастни DCs използване узряване като индуктор Immunovac-VP-4, но не са натоварени с антигена да се осигури малко защита на този период, вероятно се дължи на присъствието на кръстосано взаимодействие антигени в състава на антигенни компоненти Immunovac VP-4.

Активирането на вродения имунитет и възможността за създаване на защита срещу неизвестни патогени е показан за едновременно приложение на мишки на зрели и незрели DC, и като неизвестно патоген К. пневмония К2.

Експерименталните факти, потвърждава хипотезата, че активиране вродения имунитет имуномодулатори от бактериален произход, са агонисти на TLRs, това води до бързо развитие на резистентност към хетероложни патогени. Когато S Typhimurium инфекция на имунизирани еднократно Immunovac-VP-4 мишки показа значително увеличение на продължителността на живота в сравнение с интактни животни.

Изследване на цитокини профил ваксинираните Immunovac-VP-4 мишки показват вече след 0.5 часа след прилагане на ЕР 4-увеличение в експресията на IL-10, IL-6, 4 часа след увеличаването на производството на IL-12, IFN-у. При инфекция тези мишки S. Typhimurium показва пълно съпротивление за четири дни (по това време до смъртта на 85% от интактен мишки) и слабо в същото време експресията на цитокини.