Onkologiya-

EV Fleishman

Съдържание

Ev fleishman

Руската онкологичен научен център кръстен nn ram памети, Москва

източник rosoncoweb.ru

Руската онкологичен научен център кръстен NN RAM памети, Москва

източник RosOncoWeb.Ru

Обратно в края на 80-- началото на 90-те години, бе направено заключението, че chtohromosomny анализ е един от най-важните прогностичен metodovpri nelimfoblastnyh остра левкемия (ONLL). Това заключение podtverzhdendannymi големи многоцентрови проучвания последните години (Grimwade и др., 1998- Kern и др, 2000 словашки и др, 2000, Visaniet др., 2001).

Настоящият доклад е посветен на tsitogeneticheskogoanaliza на възможности и мястото му сред другите прогностични критерии. Predstavlenobzor литература и нашите собствени данни, poluchennyev цитогенетика лаборатория РЦОИ на РАМИ тясно svrachami хематологични двете отделения Cancer Center и други клиники на Москва (355 случаи ONLL).

Промени кариотип характеристика ONLL, могат да бъдат разделени в три групи, в зависимост от тяхното прогностична стойност. Pervayagruppa включват хромозомни аномалии, предсказване добър отговор към лечението, то съотношението на пациенти с болест без 5 години vyzhivaemostyusostavlyaet 60-70%. В групата с лоша прогноза е показателно, че да надвишава 10-15%. Други промени кариотипни acsotsiirovanys "междинен" отговор на лечението (Grimwade и сътр., 1998). Прогностична стойност на единична хромозома anomaliymozhno определя само чрез сравняване на групи от пациенти, лекувани poluchavshihodinakovoe. Например, се третират съгласно протокола на Министерството на detskoygematologii ни център, 16 деца с prognostically blagopriyatnoyhromosomnoy транслокация т 1991 (8-21)"7 + 3"И след 1991 г., 12 деца с един и същ anomalieypoluchili лечение на модифициран протокол BFM-87. При пациенти podavlyayuschegobolshinstva получена пълна ремисия. Bezretsidivnaya5 години преживяемост в първата група е 15.3 + 10%, и от друга - 58,3 + 20% (р = 0.03).

Разделяне на голям хетерогенна група на остра миелоидна leykozovna три прогностични групи съгласно osobennosteykariotipa предложен преди около 20 години (Heim et Mitelman, 1995) .За последните години, класификация е променила и продължава да menyatsya.Eto поради натрупването на нови знания за аномалии клиничните znacheniinesluchaynyh хромозомни.

В момента да променят кариотипът, като blagopriyatnoeprognosticheskoe стойност включва хромозомна транслокация т (8-21) (q22-q22), т (15-17) (q22-Q21), т (16-16) (р13-q22) и инверсия на хромозома 16 -inv (16) (р13-q22). цитогене на група променя imeyuschihneblagopriyatnoe прогностично значение включват промени dlinnogoplecha хромозома 3 засяга региони 3q21 и / или 3q26, utratyhromosom петата и седмата двойки, делеции на hromosomy5 дългото рамо, транслокация т (6-9) (P23-q34) и т (9 -22) (q34-Q13), razlichnyeperestroyki късото рамо на хромозома 17, и сложни промени кариотипни, т.е. левкемия с три или повече хромозомни аномалии. случаи Vseostalnye попадат в междинна прогноза група. Ostanovimsyana някои нови данни, които са от значение за клиничната практика.

Повечето чуждестранни клиники и многоцентрови промени issledovaniyahvse в хромозомен район 11q23 посочени prognosticheskineblagopriyatnym. Известно е, че промените в тази област са изключително разнообразни, описан по-специално хромозомна област 11q23 транслокация boleechem 40 различни региони на кариотипът. Всяка от тези аномалии, въпреки че е цитогенетично хомогенна група може zatragivatraznye гени, и това води до разлики в khimiopreparatam чувствителност.

Цитогенетичен изменения, търси в светлината mikroskopiiabsolyutno идентични, са различни, когато се установи тяхната izucheniyaispolzuyutsya за молекулярно-генетични техники, като fluorestsentnayain ситу хибридизация (FISH) и полимеразна верижна реакция (PCR) .С тези методи, които, когато има ONLL разнообразие eschebolee генетична вариация, отколкото obnaruzhenopri стандартен анализ хромозома. Към днешна дата nakopilisfakty, които не позволяват да се включат всички промени в 11q23 gruppuprognosticheski аномалии региона неблагоприятна кариотипни. Вече serediny90 на публикувани серия от наблюдения показват horoshemeffekte лечение на левкемия с транслокация т (9-11) (Mrozek и др, 1997, Swansbury сътр, 1998- Pui и др, 2000 ..): петгодишният vyzhivaemostsostavila 60-70 %, т.е. е същият, както в групата с анормална кариотип prognosticheskiblagopriyatnymi.

Последните международни проучвания в няколко центъра, vklyuchayuschiebolshie серия (стотици случаи) третират еднакво ONLL, pozvolilipridti заключили, че прогнозата на ONLL с пренареждане vovlekayuschimirayon 11q23, се определя не само от гените локализирани vetom област, но също така и на втория член на преместването.

Друг пример - транслокация т (10-11) (p12-13-q23). Тази аномалия ochenredkaya (1-2% ONLL). По-голямата част от patsientovs транслокации т (9-11) (Р22-q23) и т (10-11) (p12-13-q23) едно от: ген участващи MLL ген. Когато транслокация т (9-11) е известен само един възможен партньор MLL ген, включващ kotorogovoznikaet кондензиран (химерно, хибрид) ген. В същото време молекулно geneticheskoeizuchenie транслокация T (10-11) (p12-13-q23) намерено за 4 gena.Eto гени MLL и спокоен, локализиран в областта на 11q23 и гени AF10i ABI1, в 10p12-13 локализирани област. Данни за dlitelnostizhizni левкемия с хромозомна транслокация т (10-11), докато vesmanemnogochislenny. В литературата има данни за по-малко от около 100 пациенти, които са получили различно третиране. Интересно голям оцеляване variabelnostpokazateley: някои пациенти рецидив настъпили navtorom месец от началото на ремисия, докато други оцелели 5 години. Молекулно не винаги geneticheskieissledovaniya извършва, обаче, изглежда, че химерния ген ABI1-MLL свързани с blagopriyatnymprognozom значително повече от останалите химерни гени, произтичащи от translokatsiit (10-11) (Shibuya и сътр., 2001).

Следващият въпрос, който трябва да бъде обсъден, притеснения geterogennostiprognosticheskih групи, избрани въз основа на характеристиките на кариотипа, и по-специално, една група с благоприятна прогноза. Известно е, че 5-годишната преживяемост при тази група пациенти е 60-70% .Преди началото на лечението или през периода на клинична и хематологична remissiinevozmozhno предскаже кой точно ще падне в 60-70%, а в началото на kogorazovetsya рецидив. Въпреки това, много известен klinicheskihpokazateley свързано с по-лоша прогноза, а именно boleechastym развитие на ранен рецидив в ONLL. Сред такива pokazateleysleduet отбележи CD56 антиген експресия в бластни клетки, недостатъчно намаляване на броя на бластни клетки в kostnommozge на 14-21 дни на лечение, допълнителни нарушения кариотипни, високо левкоцитоза при диагностицирането (Schoch Etal, 1996- Baer и сътр., 1997 Daniels et др., 1999- Peniket Etal., 1999- Ferrara и сътр., 2000). Също така има съобщения, че признаци на остатъчен дисплазия (neleykoznogo) клетки от костен мозък eritroidnogoi мегакариоцитни микроби преди лечението predveschayutnevysokuyu ONLL ефикасност при де ново (Tamura и сътр., 1998- Lemez и сътр., 2000). Дали това се отнася за левкемия blagopriyatnoyprognosticheskoy на групата все още не е ясно. Идентифицира всеки sluchaeOML prognostically нежелани симптоми postanovkidiagnoza на етап може да бъде полезна за оптимизиране на протоколи за лечение.

Индивидуални прогноза, съществува риск от рецидив и поява vremyaego отделния пациент ONLL невъзможно да се оцени без провеждане молекулно мониторинг на минимално остатъчно заболяване (MRD). Левкемия клетки, оцелели въпреки primenenietsitostaticheskoy терапия и устойчиви по време на пълна клинична и gematologicheskoyremissii представляват биологичен минимум субстрат rezidualnoybolezni. Тези клетки не се откриват в клинични изследвания на костен мозък, кръв, но откриват при използване на chuvstvitelnyhmetodov, сред които на първо място е tsepnayareaktsiya полимераза с обратна транскрипция (RT-PCR). Задайте tesnayasvyaz MRD с прогноза. Показано е, че честотата retsidivovznachitelno по-висока при пациенти, при които не откриват minimalnuyurezidualnuyu заболяване в сравнение с пациенти, при които MRBne открити. Освен това беше установено, че по-kolichestvoostavshihsya левкемични клетки, по-малко време от самото начало на появата на рецидив remissiido (Radich, 2000). Нови количествени metodikiPTsR позволяват мониторинг MRD е по-добре от kachestvennyemodifikatsii (Tobal и др, 2000). Нови концепции "molekulyarnayaremissiya" и "молекулна рецидив", Показани chtopri постигане на ремисия се случва znachitelnoesnizhenie ниво на химеричния ген препис. През gematologicheskoyremissii определят постоянна ниска експресия на химерното transkriptaili PCR-негативизъм, т.е. има молекулно remissiya.Za 4-6 месеца преди истинската честота на повторение suschestvennopovyshaetsya транскрипт, т.е., има молекулно рецидив.

Транслокация т (8-21) (q22-q22) - един от най-често кариотип spetsificheskihanomaly в ONLL. То се наблюдава при 20% от случаите в vzroslyhi 40% от децата с M2 опция. В тази транслокация rezultatesliyaniya фрагменти от два гена - AML1 и ETO образува himernyygen AML1-ETO. Химерният ген или транскрипт може да бъде obnaruzhens чрез PCR или FISH всички пациенти с т (8-21). В някои sluchayahtranslokatsiya е скрита: той може да бъде открит не в анализ standartnomtsitogeneticheskom, но само чрез PCR или FISH (Krauteret др, 1998). Химерният транскрипт време транслокация т (8-21) obnaruzhivaetsyau повечето пациенти дори по време на продължителна ремисия (Nuciforaet др, 1993 Kusek и сътр., 1994). Следователно kachestvennayaPTsR не е подходящ за наблюдение MRD при пациенти с т (8-21). KolichestvennayaPTsR позволява да се оцени и прогнозиране на ефективността на лечението gematologicheskiyretsidiv които задължително следва молекулно рецидив (Tobal и сътр., 1998). Наскоро публикувани проучвания, при които privodyatsyadannye, че изчезването на химерен транскрипт AML1-ETOv резултат лечение предвещава дълга стабилна ремисия (Morschauseret др, 2000).

Остра промиелоцитна левкемия (APL, М3) skhromosomnoy тясно свързани транслокация т (15-17) (q22-Q21), който yavlyaetsyavazhneyshim диагностичен маркер на остро белодробно увреждане. В резултат на това translokatsiivoznikayut химерни гени PML-RARA и RARA -RML. Химерни transkriptyPML-RARA и RARA -RML са важни маркери за наблюдение molekulyarnogodiagnoza и RFI (Grimwade и сътр., 1997 Kräuter Etal., 1998). Ха огромен материал (стотици пациенти), като беше доказано, че изчезването на химерно препис konsolidatsionnyhkursov след лечението беше съпроводено с появата на хематологични remissii.Pri поддържане препис, въпреки постигането на пълни gematologicheskoyremissii, като последният се оказа кратко: retsidivy.V наблюдаваното по-ранни случаи, когато след период на PCR негативност ( молекулна ремисия) химерен транскрипт се открива отново (молекулно рецидив), почти винаги не по-късно от шест месеца разработени gematol ogicheskiyretsidiv (Diverio и сътр., 1998- Burnett и др, 1999). Opublikovanyneskolko успешни опити за предотвратяване на хематологично retsidivOPL, започване на лечение по време на молекулно рецидив (Grimwade Etal., 1997 Diverio и сътр., 1998). Последният от тези publikatsiy- много обнадеждаващи: многократно молекулно ремисия bylidostignuty в 12 от 14 пациенти в резултат на засилването на terapiivo време на молекулно рецидив.

Групата с благоприятна прогноза ONLL също включени leykozys pericentric инверсия на хромозома 16 - инв (16) (р13-q22) ilitranslokatsiey т (16-16) (р13-q22), което доведе до voznikaethimerny ген CBFb-MYH11. Тези аномалии се наблюдават във всички bolnyhs морфологичен вариант на AML-М4Ео, те също така, 40% от случаите на AML-М4. Сред всички случаи, когато детектира himernyygen CBFb-MYH11, само половината са миеломоноцитна левкемия, в други случаи е диагностицирани М2, най-малко - М1 или M5.Himerny транскрипт CBFb-MYH11 слят ген се открива в vsehbolnyh чрез PCR (Langabeer др ,. 1997). Кинетика himernogotranskripta CBFb-MYH11 в хода на проучваното заболяване е по-лошо от drugihtranskriptov пациенти в групата с относително ONLL blagopriyatnymprognozom. В повечето случаи, пълна офанзива molekulyarnoyremissii изостава значително за създаване на пълни gematologicheskoyremissii. Химерична стенограмата може да се определи до 24месеца от началото на ремисия. Рецидивите nablyudayutsyau повечето пациенти, чиито транскрипт се открива повече от 6 monthsa от началото на ремисия (Мартин и др, 2000). Появата след himernogotranskripta период PCR негативизъм по време на ремисия predveschaetpriblizhenie хематологично рецидив (Laczika и сътр., 1998).

Нашият екип провежда пациенти молекулярни monitoring26 с prognostically благоприятен хромозомна anomaliyami.Rabota започна преди около две години. В един случай, 21 udalosprovesti от два до шест PCR анализи. В този доклад, ние ostanovimsyatolko на група от пациенти с транслокация данни т (8-21) (10sluchaev). В шест от тях по същия начин, както в повечето opublikovannyhnablyudeny, намери опазването на химерно препис fonepolnoy прощаване с продължителност от 3 до 24 месеца. 4 пациенти vyyavlenaPTsR-негативизъм: в две от три пациенти, разгледани по време dlitelnoyremissii (mBFM-87 протокол), и при 2 от 4 - в ранните етапи на програмата за лечение otnachala AML 2000. Може би причината за началото (в рамките на 6 месеца от началото на ремисия) изчезване transkriptayavlyaetsya намаляване на броя на левкемични клетки obuslovlennoevesma агресивна терапия. Освен това наблюдение показва kakoeprognosticheskoe значение изчезване препис AML1-ETOu нашите пациенти.

Сега ние правим първите си стъпки в използването на един от modifikatsiytak нарича конкурентна RT-PCR за определяне на нивото himernogotranskripta AML1-ETO в костния мозък и кръвта на пациенти (kolichestvennyymetod). 6 души анкетираните. Потвърдено literaturnyedannye за намаляване на химерно препис след първата terapevticheskihkursov (индукция и консолидация). В двама пациенти, obsledovannyhneskolko пъти по време на ремисия, zafiksirovanopostepennoe намаляване на нивата на препис. Наблюдение prodolzhaetsya.Planiruetsya интензификация терапия при molekulyarnogoretsidiva откриване.

Тези данни показват необходимостта да се продължи с tsitogeneticheskihissledovany ONLL да се изяснят прогностични аномалии znacheniyaotdelnyh хромозомни, по-специално, редки izmeneniykariotipa. Тези изследвания не са възможни без използването на молекулно geneticheskihmetodik. Се възлагат големи надежди забодени върху наблюдението на MRD като perspektivnyymetod индивидуална прогноза.

Литература:

1. Baer MR, Stewart CC, Lawrence D и сътр. Blood 1997, 90: 1643-1648.

2. Burnett AK, Grimwade D, E Соломон и сътр. Кръв, 1999, 93: 4131-4143.

3. Creutzig U, Zimmerman М, Kitter J и др. Br J Haematol. 1999.104: 630-639.

4. Diverio D, Rossi V, Avvisati G и др. Blood, 1998, 92: 784-789.

5. Grimwade D, Gorman P, Duprez Е и сътр. Blood 1997, 90: 4876-4875.

6. Grimwade D, Walker Н, F Oliver и др. Blood 1998, 92: 2322-2333.

7. Ferrara F, Morabito F, Martino B.J и сътр. Clin Oncol. 2000,18: 1295-1300.

8. Heim S, Mitelman Е. рак цитогенетика. Второ издание., Wiley-Liss, 1995.

9. Kern W, Schoch С, Haferlach Т и др. Левкемия 2000 г., 14: 226-231.

10. Kräuter J, Paschberg В, Хайнце B и сътр. Br J Haematol.1998,103: 72.

11. Kusek R, Laczika К, Knobl P и др. Левкемия 1994 г., 8: 735-739.