Цитогенетичен анализ на хорионбиопсията клетки на плацентата.

Клетките хорион влакнеста

Видео: Цитогенетичните изследователски методи

за хромозомен анализ на клетки, залепващи или плацента се използват два основни метода.

1. Дългосрочна култивиране в монослойна култура. Както в случая на анализ AF клетки, има голям брой модификации култивиране хорионбиопсията клетки. За повече информация за тях може да бъде в съответната литература. Отбелязваме, само че растящите първични култури са хетерогенни клетъчни състав с преобладаващ растеж на фибробластоподобни мезенхимни стромални клетки на въси. образуване на колонии или насипно монослой обикновено се случва в 10 до 12-тия ден на култивиране. Основните принципи на клетка анализ култури на хорион въси и тълкуване на резултатите са подобни на тези на клетки култури AF.

2. "Директно" лекарства хорион VILLI. Анализ Метод "директни" формулировки Въз основа на проучване на спонтанно делящи бластоциста клетки без предварително отглеждане. Първи лекарства хорион влакнеста тъкан, съдържащ метафаза плоча на задоволително качество, без използване на група от клетъчната култура бяха получени Milanese изследователи начело G. Simoiii. През следващите години той е бил предложен на различни модификации на метода, които zatragshzayut всички етапи на обработка на въси. Същество всички от вариантите на метода могат да бъдат разделени на две групи:
- действителната "Директно", въз основа на краткосрочни (2-3 часа) преди инкубиране роден въси хипотонична обработка и фиксиране;
- "semidirect"Ако приемем увеличаване инкубиране време на нативния въси в културална среда с хранителни добавки, за да 24,48 или 72 часа.

Въпреки привидната простота, тези методи рядко осигуряват постоянни резултати и, следователно, са склонни да бъдат използвани във връзка с култивирането. Типични недостатъци на директния метод, описани изпълнения са малък брой метафазните плочи артефакт загуба на хромозомите по време на накисване проба в оцетна киселина и малка фитнес на хромозомите по време на референтния диференциална оцветяване с Giemsa петно. Преброяване на броя на митози на "директни" и "половин линии» препарати показа, че при инкубиране въси за 2- 3 дни митотичната активност на бластоциста клетки е по-висока, отколкото в 2- или 24-часова инкубация. Това предполага, че по време на биопсия клетки изпитват "шок", което пречи на параметрите на клетъчния цикъл и vstupayutv митоза.

ние сме разработили собствен метод директно модификация - метод на "разклаща-оф-релефен" и бързо напред метод. Използването на големи дози колхицин с едновременна обработка в хипотоничен разтвор позволява да се получат лекарства от CVS / плацента по време на бременност от 10 до 20ned, че отговарят на всички кариотипиране на критериите. Във връзка с флуоресцентни методи диференциално оцветяване на хромозомите ефективност на тези методи е повече от 99%.

Видео: Vision Цито - Традиционните методи за цитологичен анализ

Трябва да се подчертае, че те са подходящи за модификация Храни хромозомни препарати на тъкани с висока митотичен естествена активност, включително всички тъкани и органи на ембриона. Интерфазата ядра, третирани по този начин, са много подходящи за FISH-метод със специфични ДНК сонди, което е важно при проверката на пренатална диагноза цитогенетичен. Подробни методи за формулиране и диференциална оцветяване изпълнения, описани по-рано.

висока ефективност, скорост и надеждност при най-ниски разходи при условие, че бързото въвеждане на тези промени в различни пренатални диагностични центрове в Русия и страните от ОНД.