Основните принципи на цитогенетичен пренатална диагностика.

В момента проблемните цитогенетичен диагностика

Предимства и недостатъци на цитогенетичен анализ при използване на различни методи за получаване на хромозомни препарати от фетални проби от материала са показани в таблица.

Използвайте в повечето центрове комплекс цитогенетичен и молекулни цитогенетичен диагностични методи осигурява най-пълна информация за фетален кариотип в различни етапи от развитието на плода.

Видео: Цитогенетичните проучвания. Биопсия на хорион въси на мисед аборт

Когато пренатална кариотипиране Тя трябва да се ръководи от принципите на анализа на хромозоми лекарства международно приетите клинични цитогенетика и одобрени от Министерството на здравеопазването, както и норми на международното номенклатура, описващ carnotite.

Характеристики цитогенетичен анализ на клетки различни ембрионален произход околоплодна течност клетки Клетките AF са представени от няколко типа различен произход:
- клетки на околоплодната мембрана (всъщност амниоцити)
- фетални епителни клетки (епидермис, стомашно-чревни, пикочо-половите и дихателни пътища, орална лигавица кухина).

Видео: майка Club (11.25.2015 - Част 1)

Качествен и количествен състав AF клетки и концентрацията на жизнеспособни клетки имат вариабилност и зависят от степента на развитие. Оптимална за цитогенетичен изследване е околоплодната епител - активно пролифериращи клетъчен клон, специфични за дадена култура. В същото време точно да се установи вида клетки, способни да митотични разделение и klonoobrazovaniyu по клетъчна култура в лабораторни, много трудно.

Най-често за отглеждането употребявани амниотични клетки, получени в продължение на 15-18 седмица от бременността. Използването за тази цел амниоцити по-рано (12-14 гестационна седмица), или по-късно (след 20 седмица от бременността) условия по принцип е възможно, но като правило, което значително усложнява и удължава диагностичния процес, увеличава броя на неуспешните опити.

Стандартни култивиране на клетки AF включва следните стъпки: определяне на културата, субкултурата, хипотоничен лечение и фиксиране. Въпреки широко разпространеното използване на клетъчни култури на AF в света, обща техника за хромозомни препарати са несъществуващи. За култивиране на клетки AF използват два основни подхода, различаващи се по метода за получаване на колонии и методи на фиксиране.

Видео: ново поколение последователност: принципи, възможности и перспективи - Мария Logacheva

1. Колба-Метод-клетъчна култура Пациентите в суспензия и фиксиране монослойна култура след трипсинизация. Анализът се извършва в два от трите култури (10 метафази на проба). Ако всички метафазните плочи, наблюдавани по същия кариотипа, диагнозата е установена. В случай на един метафаза с анормална кариотип (структурна или цифров) се анализира за архивиране трета култура. Ако една и съща за хромозомни аберации се определя от повече от един метафаза от една бутилка, но не е потвърдено в други бутилки, на диагноза "psevdomozaitsizm". При същите хромозомни аномалии в повече от една бутилка, диагнозата е зададена "истинска мозаицизъм".

2. Методът на място - отглеждане и фиксиране на клетките върху покривни стъкла в блюда на Петри или специални бутилки - пързалки. Анализът се провежда в метафаза плочи на три блюда за култивиране (общо 10 колонии се анализира). При откриване на анормален клон анализира vsekultury. Хромозомни аберации, наблюдавани само в една чаша, показва "psevdomozaitsizme", повече от един - "истинският mozaigshzme".

стандартния процес на култивиране амниоцити от получаването на образеца чак кариотипиране отнема средно 14-21 дни. Недостатъците са високите разходи за културален бульон и оборудване, което е важно за домашни лаборатории, както и високо (до 2%), вероятността от замърсяване на пробата майчини клетки.

През последните години тя се развива нов подход към хромозомен анализ на култивирани клетки. «Pipett» Методът се основава на изолация mikromanipulyatsionnoy metafaznyhiprometafaznyhkletokiz на nesuspenzionnyh култури поради ihmorfologicheskim функции и намалява в следствие на субстрата. Освен хипотонична обработка и фиксиране се осъществява от единични клетки. Този метод намалява периода култура neskolkihdney и най-значително намаляване на риска от диагностични грешки, причинени от двете мозаицизъм и замърсяване на пробата. Получаване прометафаза и метафазните плочи по този начин може за всички първични и трансплантирани култури. За съжаление, скъпо оборудване и труд предотврати широкото приемане на този прогресивен метод в клиничната практика.