Модификация на антитяло след реакция с антигена. допълни центрове

Подобни резултати са получени при използване на същите метод antipolisaharidnymi антитела. Като антигени, използвани олигозахариди на увеличаване на дължината, включително тетра-, хекса- и октазахариди и 16-членен олигомер. Както и в горните експерименти, след взаимодействието с антигена са наблюдавани промени в спектъра, въпреки че използването на изолирани или Fab-F (аб) 2 фрагменти, тези промени са по-слабо изразени.

Тези експерименти показват също, наличието на взаимодействие между Fab- и Fc-части на IgG молекули и съответните промени в Fc-антиген свързваща част след това е достатъчно голям, за да се запълни кухината на активния център. Чрез добавяне на малък размер хаптен конформационни промени могат да бъдат намерени.

Големият интерес във връзка с това въпрос наличието на антитела причиняват конформационни промени работата, която предполагат възможността за сътрудничество промени алостерични между субединици на молекули на антитела след антигенно свързване.

Една серия от експерименти, произвежда в лаборатория Koshlenda (Brown, Koshland, 1975), въз основа на изследването на Fc-фрагмент способността да се определи комплемент чрез свързване на антитялото с антигена. В тези експерименти, използването на IgM антитела срещу бета-lactosides. Сам по себе си този хаптън не предизвиква комплемента определяне дейност. Само след като се присъедини неспецифичен носител протеин (RNase един хаптън за мол) той е придобил способността да предизвикат тази дейност.

Тъй като това е антиген едновалентни, той не може да се определи на агрегация или напречно-свързващи молекули lgM-антитела, които са известни може да доведе до активиране на системата на комплемента. Друго обяснение, а именно, че операцията на някои части на Fc-фрагмента зависи от конформационни промени в резултат на свързване в активния сайт на антигена, е по-вероятно.
Това обяснение предполага, че алостерични свойства на имуноглобулини.

В проучването на komplementaktiviruyuschey способността IgG клас антитяло е установено, че не може да се индуцира от конформационни промени Fab- и Fc-субединици, които се основават на данни CPP придружават едновалентен антиген свързване. Въпреки това реакционната антитяло с двувалентен антиген (лизозимен димер верига пептид) способност прикрепен антитяло да активира комплемент.

В този случай, по-специално проведена експерименти на аналитична ултрацентрофуга показа, че като имунен отговор, както и в експерименти с едновалентен антиген, не е съпроводено с образуването на агрегати. Авторите смятат, че двувалентни антигена, необходим, за да генерира определени ъглови отношения между Fab- и FC-фрагменти, в които възможностите за показване на комплемента сечения.

Други експерименти изследвани способността на заешки антитела Клас IgG да се свързва с комплемент, след реакцията с антигените, в зависимост от размера на антигени. Антителата, получени в зайци чрез имунизация с пневмококови полизахариди. Антигените бяха определени олигозахариди изолирани от източника на полизахарида от неговата специална обработка. В тази система, комплемент-определяне активността на имунните комплекси проявява само когато размерът на захар олигомер повишава до 21 или повече захарни остатъци.

анализ на утаяване Това показа, че агрегатите образуват антиген - антитела в този случай съдържа четири или повече молекули на антитела (Jaton Д а, 1976.). В такива единици ъглите между границите на Fab-subedinitsamiIgG от 90 ° до 180 °, докато в комплексите са неактивни по отношение на комплемента на ъгъла между Fab-фрагменти е по-малък от 60 °.

Чрез кръгова поляризация паралелно флуоресценция корелация е намерено между размера на хаптен на олигозахарид и величината на конформационни промени в Fc.

По този начин, можем да заключим, че активиране на комплемента фиксиране IgG сайтове Това се осъществява чрез комбинация на антиген-индуцирана конформационни промени субединица IgG и увеличаване на ъгъла между Fab-фрагменти от повече от 90 °. Възможно е в второто условие IgM вече съществува за свързване на антиген, следователно, агрегацията на тези молекули не е необходимо.