Свойства на антитела активни центрове. реактивност на имуноглобулини

метод спин маркер позволено също се възползва от различията в свойствата на заешки антитела срещу 2,4,6-тринитрофенил (TIF) след първични и вторични имунизации. Тези антитела бяха изследвани като се използва различна в пространствената структура на спин-белязан TNP-хаптени като EPR и да намали добива флуоресценция квантовата на антитела.

Тя установи, че антитяло, образувани по време на първични и вторични имунни отговори са разлики в структурата на активните сайтове. Комплекси на първични антитела към хаптени са по-твърди и по-податливи на органични разтворители и до промени в пространствени лиганди.

Piett и служители (Piette напр. A., 1972) изследва комплекси отрицателно зареден спин-белязан бензоат и положително заредени комплекси на спин-белязан заек trimetilfenilammoniya с подходящи антитела. Съдейки по EPR спектрите, комплекси антитяло с отрицателно заредени спин-белязан хаптени са по-строги от комплексите антитяло с положително заредена спин-белязан хаптен.
В допълнение, беше установено, че степента на имобилизация N-О група спин-белязан бензоат в активното място на свързване варира индивидуално в различни зайци.

Hsia и Piette (Hsia, Piette, 1969) изследва кръстосаната реактивност и структурна хетерогенност на заешки анти-DNP антитяло. Те са сравнени EPR спектри антитела, изолирани чрез хомоложна DNP - (анти-А) и напречно хаптен (анти-Т), след взаимодействие с спин-белязан DNP (DNP-СМ). Amax EPR спектър на комплекса на анти-DNP-D- и CM е установено, че 59 гауса, комплекс спектър Amax (анти-DNP + T CM) - 62 гауса.

Amax е функция от времето на корелация и полярност среда N-О група (Hamilton, McConnell, 1970). Следователно, разликите в тези EPR спектри може да се дължи обездвижване или повече N-О група в комплекс (анти-DNP-D + ОМ), или неговата по-хидрофобен среда. Във всеки случай, те точка на структурните разлики на анти-D и анти-Т активни центрове.

В друга серия от експерименти изследва комплекси на анти-D хомоложна с DNP-SM и напречно спин-белязан хаптени орто и пара-нитрофенол: ONF-SM и SM-nNF. Amax напречно EPR спектри на спин-белязан хаптени, ANE и LNF-SM-SM разположен в активните места, също така е по-голяма от тази на хомоложна DNP-CM.

Авторите отдават това на факта, че хомоложни хаптън Той намира в активното място, така че етикета на N-О група не директно взаимодейства с аминокиселинните остатъци на активното място. От друга страна, напречно хаптен сложни форми по-малко строги, при които марката е по-голяма степен на свобода, което му позволява да взаимодейства с хидрофобните части на активния център. EPR спектри на спин-белязан хаптени премине различават от хомоложна неподвижни присъствие компоненти, съответстващи на по-бързо въртене.

Това може да се дължи съществуването на равновесие между двете ориентации въртене mechepyh-хаптени в активните центрове или неравномерно афинитет за различни популации от антитела, специфични за съответния хаптен.