Структурата на активните центрове на антитела. Изследването на активните места на имуноглобулини

Hsia и Piette използване едновалентни и двувалентни спин-белязан хаптени DMF Ние изследвахме дълбочината и хетерогенността на активните места на заешки анти-DNP антитяло. Те изследва зависимостта на съответствието на спин-белязан моновалентен DFT-хаптен свързан към активния сайт на антитела от Ха + г 1Ds, В - дължина на хаптен, г - разстоянието между хаптен и етикет, който може да се променя чрез повишаване на верига въглеводород между тях.

Ако промените Ха + г от 10 до 12 Авторите наблюдава рязко намаляване на клеймото на съответствието, която след това се променя малко. Това намаление е така, защото Ха + г в горния диапазон надвишава дебелината на активното място и етикета, оставяйки става може да се върти свободно. От това следва, че дълбочината на активните места е 10-12 А. Подобни резултати са получени в експерименти с бивалентни хаптени.

При добавяне към антитяло двувалентен хаптен в излишък наблюдавания ESR спектър силно се имобилизира от образуването на димери или тримери антитела. Минималната дължина на двувалентен хаптен, като способността да се свързват две молекули на антитела все още остава, е равна на 21 А. Очевидно е, минималната дълбочина на активния център е 10,5 А.

размери антитела активни центрове, Струва зависи малко от спецификата на вида. По този начин, като се използва същият метод последователно увеличаване на разстоянието между DFT и етикета завъртане, е показано, че дълбочината на активните центрове на пилешки анти-DFT-антитела и IgA mislomnyh миши МОРС 315 с висок афинитет към DNP е 10 ± 1 А. Друга група автори проучване център Fv-fragmsnta протеин МОРС структура 315 чрез спин-белязан хаптени, стигна до същия резултат.

По този начин, информацията, от активното дълбочина антитела центрове, получена чрез спин маркер, са в добро съгласие с анализа на рентгенови лъчи.

Spin-белязан хаптени бяха използвани (Willan Д а, 1977.) за сравнително изследване на активните места на следните размери mislomnyh IgA анти-DNP активност: МОРС 315, 460 и SIDS XRPC 25. Анализ на имунни комплекси EPR спектри на спин-белязан DNP и някои от неговите производни Като се има предвид тези хаптени стереохимия доведе до следните заключения. Дълбочината на активните центрове на три идентични IgA (11-12 А), но има разлики в напречните размери на центровете на входа.

За XRPC 25 това измерение е 7,5X8 А за МОРС 460>10X 11 X А "и за SIDS 315В>8h11A. И трите протеини имат места за свързване lantanndov La III и Gd III. Взаимодействието между тези обекти и активни центрове. В МОРС 160 и разстоянието между 315 метала и N-О група спин-белязан хаптен около 10 А и XRPC - 25-20 А.

Ядрено-резонансна (NMR), с висока разделителна способност (270 MHz) се прилага от същата група от автори за проучване на активното място Fv-фрагмент от МОРС 315 (Dower напр. A., 1977). възможни Специфични изчисления за определяне на геометрията на активното място, във връзка с хаптена DNP, който образува ван дер Ваалс взаимодействие с четири централни ароматни аминокиселини.

Установено е, че лентите в спектъра ЯМР, съответстваща на фенилаланина или тирозинови остатъци, се разшири в присъствието на хаптен. Най-вероятното обяснение за това - намаляване на мобилността, съответстващ на остатъци, които могат да варират с честота от около 104 Hz.