Определяне на броя на тромбоцитите в кръвта

Определяне на броя на тромбоцитите - ключов метод за научни изследвания, може да открива най-често срещаните проблеми с кръвното хемостатична потенциал - тромбоцитопения. Понастоящем, за да се определи броя на тромбоцитите има няколко лабораторни техники (автоматизирани от Fonio и др.). Най-голямата точност е микроскопски метод при изчисляване на камерата, но този метод изисква лабораторен лекар опит преумора на очите, концентрация.

принцип на метода

Принципът на метода се основава на определяне на броя на тромбоцитите от тяхното преброяване в камера Горяев или конвенционален светлинна микроскопия с помощта на микроскоп с фазов контраст префикс кръв разреждане след червени кръвни клетки хемолиза и амониев оксалат.

За да се подобри точността на метода на броя на тромбоцитите микроскопични Брой в двете камери, и след това се изчислява средната аритметична стойност.

Реактиви и оборудване

• 1% разтвор на амониев оксалат.
• Сали миксер.
• Горяев камера (2 бр.).
• Светлинен микроскоп с увеличение от 40 х микроскоп или с фазов контраст префикс (например CF 4 или други подобни.).

Кръвните проби за изследвания

Определяне на броя на тромбоцитите в кръвта евентуално стабилизирани с натриев цитрат или отлагат по стените на пластмасови тръби фин прах на етилендиаминтетраоцетна киселина (EDTA). При използване на микроскопски метод взема кръв в натриев цитрат за предпочитане да се елиминира ефекта на EDTA върху тромбоцитите резултати брой.

техниката производителност

Сух пластмасова тръба е изработена от 1,98 мл 1% амониев оксалат и 0.02 мл кръв. Бавно и внимателно се разбърква в продължение на 2 минути и след това се инкубира в продължение на 20 мин при стайна температура. Освен това, две камери, напълнени със съдържанието Goryaeva тръби и за 10 минути ги поставят в петриево блюдо, което е мокър или напоена марля филтър. След тази инкубация, което е необходимо за утаяване на тромбоцитите Брой номер 25 квадрати. Средноаритметичната стойност на резултатите от преброяване в двете камери, умножено по 1000. В резултат на разследване на цитратна кръв се увеличава с 10% и умножено по 1000, което позволява да се коригира разреждане венозна кръв разтвор на натриев цитрат.

Видео: Тромбоцитите, плюс увеличени тромбоцити, минус намалени тромбоцити в кръвните тестове,

Оценка на резултатите от изследването

В един здрав човек на броя на тромбоцитите в периферната кръв варира в доста широк диапазон - 150-400 х 109 / L.

Недопустимо проучване на броя на тромбоцитите в кръвните проби в хладилник. Когато хемолиза възможно подценяване на броя на тромбоцитите. В някои случаи, в изследването на броя на тромбоцитите върху хематологичните анализатори псевдотромбоцитопения отговаря т.нар поради тромбоцитната агрегация и групиране в присъствие на EDTA. Този проблем е решен в кръвните проби на натриев цитрат.

За да се осигури контрол на качеството при отчитане на броя на тромбоцитите върху хематологичните анализатори, има контролни проби с различно съдържание на тези клетки. На възможността за използване на тези проби, за да се гарантира контрол на качеството при изчисляването на броя на тромбоцитите микроскопски метод не съществува общоприетите препоръки. За да се подобри точността на резултатите от изследване с микроскоп трябва периодично да следи възпроизводимост определяне на броя на тромбоцитите в различни лабораторни техници по време на работния ден и въз основа на получените данни, за да се подобри точността и по-ниско отклонение при определяне на коефициента на вариация на тази техника микроскопски метод в експерименталната лаборатория не надвишава 10%.

Видео: Практически умения в физиология отчитане на броя на червените кръвни клетки

Тълкуване на резултатите от проучването

Клиничната картина на тежък идиопатичен тромбоцитопенична пурпура синдром господстващо хеморагичен. Когато синдром вторична тромбоцитопения хеморагичен, обикновено умерено, и се смесва с клиничните симптоми на основното заболяване, допринасящи за тромбоцитопения. В случаите, когато броят на тромбоцитите по-малко от 100 х 109 / L дълго наблюдават без основни прояви на болестта, трябва да се мисли за идиопатична тромбоцитопенична пурпура.

Тромбоцитоза се наблюдава също в миелопролиферативни заболявания. Често във фонов mieloproliferatsii нарушение марка реологичните свойства на кръв поради poliglobulii на. В последния случай, както и брой на тромбоцитите повече от 700 х 109 / л при пациенти увеличава риска от тромбоза. Въпреки срещу миелопролиферативни заболявания, свързани тромбоцитоза 1500 x 109 / L, парадоксално наблюдавания хеморагичен синдром.

В присъствието на тромбоцитопения и хеморагичен история от ранното детство е изключително важно да се оцени размера на тромбоцитите в т. Н. MPV (среден обем) в кръвта намазка, както и наличието на включвания в тромбоцитите.

Причини за възникване на грешки

• С помощта на една камера, отчитат по-малко квадрати.
• Неточността на калибрирането на различни смесители.
• Грешки preanalytical фаза на изследването, в т. Н. погрешно дозиране на цитрат в ограда от венозна кръв.
• Недостатъчна квалификация на лаборатория.

Други методи за анализ

Почти всички хематологични анализатори добро установяване на броя на червените кръвни клетки и левкоцити, добри резултати са точни и възпроизводими метод за определяне на концентрацията на хемоглобин показва прилага в такива устройства. Въпреки това, в момента има повече анализатори проби, че броят на тромбоцитите за броене тромбоцитопения е неточна, и като правило, има завишение на броя на тромбоцитите в тяхното автоматизирано отчитане. Особено ясно показано този недостатък при работа с кръвни проби, в които броят на тромбоцитите е под 50 х 109 / L. Този недостатък е следствие от факта, че тромбоцитите са много по-малки в сравнение с другите кръвни клетки, така че е трудно да се извърши корекция на броя им в една и съща клетка и техниките и методите, други кръвни клетки. Трябва също да се отбележи, че точността броене на тромбоцитите параметри хематология анализатор много значително влияние на качеството и надеждността на използваните калибратор. Ето защо в трудни ситуации или диагностични тежка тромбоцитопения в историята, за да се изясни броят на тромбоцитите трябва да се използва микроскопичен техника.

Преброяване на кръвни клетки в оцветени петна имат ниска точност и възпроизводимост, така че не може да се препоръча за използване в модерни болници.