Основните подходи за пренатална диагностика на генетични заболявания. Директна диагностика на генетични аномалии.

Методи за молекулярна диагностика - основен продукт и основен инструмент анализ структура, т.е. последователността на нуклеотиди в молекулата на ДНК - геномната база (наследствен апарати) лице. Първият етап от големия международен дешифриране на молекулярната структура на ДНК изследователска програма на човека е завършена през 2000 г., за създаване на "чернова на човешкия геном". В този раздел ще се ограничим да очертае основните принципи на база ДНК методи. По-подробно с техниката на молекулярни изследвания могат да бъдат намерени в специални монографии и учебници.

диагностични методи на база ДНК, насочено към идентифициране на мутации или молекулно мутант хромозома маркировка е полимеразна верижна реакция на ДНК синтеза (PCR). Исторически рано метод излича Southern хибридизация в момента се използва много по-рядко, въпреки че се използва за идентифициране на определени мутации, особено динамични мутации ", което води до разширяване заболяване (Fragile-X синдром, miotonicheskayadistrofiya, хорея на Хънтингтън, редица невродегенеративни заболявания) и хемофилия а, и някои други заболявания.

Методът на PCR е предложено през 1983 г. от американския учен Curry Mullis присъжда за това откритие Нобелова награда през 1993 г., Методи за синтезиране на селективно позволява (амплифицирани) ин витро относително малки ДНК сегменти и дължина от няколко десетки до няколко килобази, използвайки като шаблон ДНК от всеки съдържащ амплифицираната последователност.

необходимо условие за PCR е познаването на нуклеотидната последователност на амплифицираната ДНК региона, като специфичната Изборът на обекта се осъществява чрез хибридизация на ДНК шаблон с две изкуствено синтезирани праймер - ДНК олигонуклеотидни последователности, обикновено от 15 до 30 нд комплементарна 3`-краищата на амплифицирания част на смисъл и антисенс вериги на ДНК, съответно. Разстоянието между праймерите определя дължината на синтезираните молекули. Подробности за техника продукции PCR могат да бъдат намерени в ръководствата.

PCR метод Той се превръща в основен в молекулярна диагностика на генетични заболявания. Разработен и широко използвани в практиката, различните варианти на този метод за бързо и ефективно идентифициране мутации, проучване на ДНК полиморфизми използвани за молекулно етикетиране на мутантни хромозоми.

В момента има два основни подхода за пренатална диагностика, както и като цяло да диагностициране на генетични заболявания:
- директна диагностика на базата на незабавно откриване на мутации в специфичен ген;
- индиректно (косвено) диагностика, които се основават на етикетиране на мутантния ген (понякога се нарича маркиране "пациент" хромозома носещ мутантния ген), използвайки молекулярни маркери.

Директен диагностика на генетични аномалии

Чрез директна диагностика Идентификация на мутации в гена. Предимства на метода - високо (приближава 100%) диагностичната точност, възможността за PD и информативен анализ (годност за молекулярна диагностика) семейства и идентифициране на хетерозиготни носители в отсъствие на дете пациент.

при Няма големи генни мутации Тя изисква подробно молекулярен анализ (сканиране) на първичната структура на гена за откриване на мутации, които могат да бъдат приписани на недостатъците на метода.

В основата на всяко заболяване моногенна са нарушения на генни функции, причинени от различни мутации в неговите семантични части, т.е. ген последователност, кодираща протеин синтез (сДНК). тип и мутация спектри, като им фенотипна експресия (тежестта на заболяването) са специфични за всеки ген и се определя до голяма степен от уникалните характеристики на основната структура (нуклеотидна последователност).

Известно е също, че честотата на различни мутации в всеки ген е различна. Има чести "форсмажорни" мутации, диагностичната стойност на което е особено висока, както и "малки" (единичен спорадично), регистриране изключително рядко. За много от гените, отговорни за наследствени заболявания, спектрите на мутация са добре проучени и разработени оптимални алгоритми за идентифицирането им. Например, положителни за гена за кистозна фиброза е delF508 мутация, която се намира в почти 50% от всички мутантни хромозоми при пациенти CF в Русия за генна фенилаланин - това R408W мутация открива Y45% от пациентите с фенилкетонурия в Русия, за гена на дистрофина се характеризира с достатъчно големи делеции, записана в 60% от X хромозомите на пациенти с мускулна дистрофия на Дюшен, и т.н.

повече детайли Алгоритми за Molecular Diagnostics различни моногенни болести са дадени в специални водачи, коментари.