Adamts13

Следователно, при нормални условия на тази протеаза разцепва фактор мултимери на фон Вилебранд и създава нормални и с ниско молекулно тегло.

Недостигът на ADAMTS13 играе важна роля в патогенезата на тромботична тромбоцитопенична пурпура (синдром Moshkovitsa), след провала на този металопротеиназа големи мултимери на VWF са отговорни за неконтролирано образуване на микроагрегати на тромбоцитите, блокиране микроциркулацията. През последните години, намаляване на ADAMTS13 не се срещат само в микроангиопатия синдроми, но също така и в хроничен гломерулонефрит, сепсис, чернодробна цироза, DIC, и много други.

принцип на метода

Принцип на метод (ELISA), базирани на свързване на молекули ADAMTS13 антитяло на повърхността на микроплаката специфичното. След отстраняване на вещества, които не свързани към микроплаката, инкубирани с ензим-белязаното антитяло (конюгат). В резултат на това върху повърхността на микроплаки настъпва присъединяване антитела маркирани с ензим комплекси на съществуващи анти-антитяло ген. Добавен след измиване 3,3`, 5,5`-тетра-metilbenzidin за оценка на ензимната активност характеристика оцветяване тест смес. Интензитетът на цвета е пропорционален на ензимна активност и съответно броя на ADAMTS13 в пробата.

Видео: TTP ADAMTS13

Реактиви и оборудване

• Микроплака ямки, покрити с антитела към ADAMTS13.
• Проба буфер.
• Промивен буфер.
• Разтвор на хромоген / субстрат (хромоген - тетраметилбензидин, субстрат - водороден пероксид).
• Спрете Solution.
• Оборудване за извършване на ELISA (миене, четец за таблетки и др.).

Дистрибутор диагностичен комплект от реагенти - CJSC "BIOHIMMAK".

Кръвни проби за изследване като проба за определяне на концентрацията на ADAMTS13 BTP използване на стабилизиран натриев цитрат цяла кръв.

техниката производителност

Последователността на действията лаборатория лекар при определяне нивата на ADAMTS13 трябва стриктно следвайте инструкциите за набор от реактиви. Калибратори препоръчва да се проучи в дублиращи дефиниции.

Видео: ADAMTS13 Teil 1

Резултатите от оценката на изследването за определяне е необходимо концентрацията на ADAMTS13 за конструиране на стандартна крива. От кривата на калибриране определя абсорбцията стойност, получена чрез измерване на пробите за калибриране. След това, взаимосвързан точка се извършва на калибрационна крива за определяне на концентрацията на ADAMTS13 ( «от точка до точка"). Обикновено, концентрацията на ADAMTS13 е 50-140%.

Тълкуване на ADAMTS13 резултати от изследването - металопротеиназа разцепва фактор на фон Вилебранд. Ниската концентрация и / или намалена активност ADAMTS13 идиопатична причина тромботична тромбоцитопенична пурпура (синдром Moshkovitsa). синдром Moshkovitsa характеризира с пет основни клинични прояви: неврологични заболявания, бъбречна дисфункция, хемолитична анемия, тромбоцитопения, треска. Заболяването е трудно, без патогенетично базирани лечение процентът на смъртност достига 90%. Синдромът Moshkovitsa често показват намаляване в ADAMTS13 концентрация по-малко от 10%. Колкото по-полезно за диагностициране на тази патология е определянето на ADAMTS13 активност, като в този случай, с изключение за количествено намаляване на това инхибиране може да се открие металопротеиназни автоантитела.

Мутации в гена контролиращи синтеза на ADAMTS13, може да се определи чести рецидиви тромботична тромбоцитопенична пурпура. Клиничните прояви на синдром наследствено ADAMTS13 дефицит наречени Upshaw-Schulman (Upshaw-Schulman). В това ниво синдром ADAMTS13 е по-малко от 6,7%.

Към момента на писане на монографии, за съжаление, не са определени ясни характеристики тромботична тромбоцитопенична пурпура и хемолитично-уремичен синдром. Въпреки това, повечето експерти са склонни да вярват, че хемолитична-уремичен синдром, не се наблюдава намаляване ADAMTS13, така че тази цифра е много важно за диференциалната диагноза на тези животозастрашаващи състояния.

Причини за възникване на грешки

• Липса на температурата режим на съхранение реагент.
• Нарушение процедури за измиване (в случай на ръчно пране се промиват най-малко 4 пъти).
• Смесване на реагенти от различни партиди.
• Кондензация на влага в ямките (за да се предотврати появата на кондензация не трябва да се отварят до опаковка, докато не се затопля до стайна температура).

Други аналитични технологии добавяне на реагенти за измерване на концентрацията на ADAMTS13 има метод за определяне на активността на металопротеиназата. Липсата на активност, причинена от мутация или наличието на автоантитела срещу ADAMTS13.