Д-димер: какво е в норма

Действието на ензимен комплекс на Т-PA-плазминоген произвежда ензим, способен да разруши фибринов съсирек, - плазмин. По време на разграждането на фибрина, извършва този ключов ензим в фибринолитичната система на протофибрили (-D = D-E-D = D-E-D = D-) са разделени D-димери (-D = D-) и Е фрагменти (Е-). Тъй като D-димер са D-D-връзки (крос-свързващи), които отсъстват в фибриноген, фибрин мономер и насипно фибрин полимер, увеличаване на неговата концентрация в кръвта показва реализацията на коагулация и фибринолиза активиране.

принцип на метода

Принципът на метода ELISA се основава на специфично свързване на D-димер моноклонално антитяло на повърхността на микроплаки. След отстраняване на вещества, които не свързани към микроплаката, инкубирани с ензим-белязаното антитяло (конюгат). В резултат на това върху повърхността на микроплаки настъпва присъединяване антитела маркирани с ензим комплекси в съществуващото D-димер-анти-О-димер. Добавен след измиване 3,3`, 5,5`-тетраметилбензидин позволява да се оцени активността на ензим с характерната оцветяване на изпитвателната смес. Интензитетът на цвета е пропорционален на ензимна активност и съответно количеството на аналит в пробата.

Реактиви и оборудване

• Ензимен конюгат (заешко или козе антитяло, конюгирано с пероксидаза от хрян).
• На микроплаката покрити с анти-D-димер дупка.
• Калибратор / калибратори.
• Проба буфер.
• Промивен буфер.
• Разтвор на хромоген / субстрат (хромоген - тетраметилбензидин, субстрат - водороден пероксид).
• Спирането разтвор (0.5 М сярна киселина).
• Оборудване за извършване на ELISA (миене, четец за таблетки и др.).

Дистрибутор диагностичен комплект от реагенти - CJSC "BIOHIMMAK".

Кръвните проби за изследвания

Като проба за определяне на концентрацията на D-димер, използване на стабилизиран плазма натриев цитрат цяла кръв. Функции за подготовка на проби, разгледани по-подробно в Приложение 3.

Видео: Увеличение на Д-димер с IVF (? Дали е-димер имплантиране)

Методи за определяне на

Реагенти включени в комплекта, и плаката преди анализа трябва да бъде при стайна температура. Последователността на действията лабораторен лекар при определяне на нивото на D-димер трябва стриктно да отговаря на указанията на реагент.

Видео: Express анализатор сърдечни маркери и D-димер RAMP Reader

Резултатите от оценката на изследването за измерване е необходимо концентрацията на D-димер използването на калибрационната крива. Калибратори в два екземпляра се препоръчва да се проучи определенията, както и изграждане на нова крива за всеки нов диагностикуми. За конструиране на калибрационната крива използване на абсорбцията, получена в откриването на различни концентрации на D-димер.

Трябва да се подчертае, че в момента на писане монография не общоприет стандарт D-димер, така че производителите използват различни диагностични комплекти и проби от звената за неговото определяне. В допълнение към традиционните съдържание указания тегло за единица обем (мг / л нг / мл, мкг / мл, мг / л, нмол / л), броят на производителите на диагностични комплекти предложения за определяне на D-димер оценени в единици, еквивалентни на фибриноген (FEU мг / L).

Видео: смазване предавка мелница (LBM)

Тази функция е много важен фактор, тъй като в различните изпълнения на представяне на резултатите от изследване показва концентрация (мг / мл) и нормални граници и резултатите за определяне на различни измервателни единици се различават с около 2 пъти. Често, поради липсата на единни стандарти, разликите в фона на много патологични състояния (DIC, белодробна емболия и няколко други), когато използвате различни опции за изразяване на резултатите се различават с повече от 2 пъти.

Формулата за изчисляване на резултатите от определяне на концентрацията на D-димер в SI единици: [нмола / л] = [мкг / мл] х 5476. Най-често използваните тегловни единици съответстват една на друга, както следва: 250 нг / мл = 0.25 мкг / мл = 0.25 мг / л = 250 г / л.

Нормалният обхват на концентрация на D-димер трябва да се определя във всеки лаборатория с характеристиките на оборудването и консумативите. Нормални нива на D-димер, определени от повечето производители е по-малко от 250 мг / л, по-малко от 0.5 мг / л FEU. Тъй като полуживотът на D-димер е повече от 24 часа, нивото му е стабилно достатъчно дълго.

Оценка на резултатите от теста трябва да се извърши като се вземе предвид определението на коректност. За да се контролира качеството на всеки лаборатории за контрол, предложени да се използват материали с единиците, препоръчани от производителя.

Тълкуване на резултатите от проучването

Определяне на концентрацията на D-димер често се използва за откриване на тромбоза и тромбоемболия. Специфичността на този индекс по отношение на тромботични смущения е ограничен поради този индекс се увеличава, и в много други патологични състояния.

Въпреки ограничената спецификата на тест, то е тромбоза съдържание много високо информация и тромбоемболизъм, защото тестът показва много добра отрицателна прогностична ниво, т.е.. Д. резултат отрицателен тест е почти винаги свидетелства за липса на тромбоемболични процеси.

Високите нива на D-димер да се тълкуват като се отчитат резултатите от други тестове и клинично заболяване. Този индекс се използва за оценка на ефикасността на антитромботична терапия.

Други аналитични техники Освен ELISA за определяне на D-димер използват и други имунохимични техники (immunoturbidimetry, immunohemilyuminestsentsiya, латекс аглутинация, имунохроматографски, мембрана имунодифузия). На пазара са широко представени полуколичествените методи за неговото определяне. Много съвременни модели на автоматични и полуавтоматични коагулометри в състояние да определи нивото на D-димер използване immunoturbidimetry.

Причини за възникване на грешки

• Неспазването на режима на съхранение температура.
• Нарушаването на измиващата процедура, (за миене трябва да се измиват най-малко 3-4 пъти). След промиване на плаката източване на филтърната хартия като течността, обикновено остава в гнездата след промиване, може да повлияе на долния субстрат и оптичната плътност на пробата.
• Смесване на реагенти от различни партиди.
• Кондензацията в ямките. За да се предотврати появата на кондензация не трябва да отвори опаковката до тогава, докато се загрее до стайна температура.